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恶性疟原虫ABRA基因真核表达重组质粒的构建及序列分析
1
作者
单志新
余新炳
+3 位作者
李学荣
马长玲
卞国武
胡旭初
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2001年第5期16-20,共5页
目的 构建恶性疟原虫海南 (FCC1/HN)株ABRA基因真核表达重组质粒 pcDNA3-ABRA ;测定ABRA基因序列 ,并了解FCC1/HN株与其它分离株ABRA序列的差异。方法 根据ABRA基因已知序列设计合成一对引物 ,用PCR技术从FCC1/HN株基因组DNA中扩增ABR...
目的 构建恶性疟原虫海南 (FCC1/HN)株ABRA基因真核表达重组质粒 pcDNA3-ABRA ;测定ABRA基因序列 ,并了解FCC1/HN株与其它分离株ABRA序列的差异。方法 根据ABRA基因已知序列设计合成一对引物 ,用PCR技术从FCC1/HN株基因组DNA中扩增ABRA基因 ;将ABRA基因定向克隆入真核表达载体 pcDNA3,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ;用酶切 ,PCR扩增鉴定筛选到的重组质粒阳性克隆。以正确的重组质粒为模板 ,用双脱氧链末端终止法测定ABRA基因序列 ,应用软件辅助分析ABRA序列及进行同源性比较。结果 PCR扩增得到特异的FCC1/HN株ABRA基因 ;经双酶切及PCR鉴定表明获得正确的 pcDNA3-ABRA重组质粒。测序表明 ,FCC1/HN株ABRA基因大小为 2 2 2 0bp ,编码 73 9个氨基酸。恶性疟原虫FCC1/HN株与Camp ,3D7,FC2 7株ABRA基因编码氨基酸序列主要在C -端存在少量不同 ;FCR3株与以上 4株ABRA基因编码氨基酸序列相比 ,只有少量的氨基酸替换。结论 从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中获取ABRA基因 ,成功构建真核表达重组质粒pcDNA3-ABRA ,并测定了FCC1/HN株ABRA基因的序列 ;FCC1/HN株与其它分离株ABRA基因有很高的同源性。
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关键词
恶性疟原虫
酸碱氨基酸重复抗原
聚合酶链反应
克隆
序列分析
ABRA基因
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题名
恶性疟原虫ABRA基因真核表达重组质粒的构建及序列分析
1
作者
单志新
余新炳
李学荣
马长玲
卞国武
胡旭初
机构
中山医科大学寄生虫学研究室
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2001年第5期16-20,共5页
基金
中山医科大学"211"重点学科建设课题资金 (NO .98169)
广东省自然科学资金 (NO .980 0 89)
教育部博士点基金 (博教NO .93-186)资助
文摘
目的 构建恶性疟原虫海南 (FCC1/HN)株ABRA基因真核表达重组质粒 pcDNA3-ABRA ;测定ABRA基因序列 ,并了解FCC1/HN株与其它分离株ABRA序列的差异。方法 根据ABRA基因已知序列设计合成一对引物 ,用PCR技术从FCC1/HN株基因组DNA中扩增ABRA基因 ;将ABRA基因定向克隆入真核表达载体 pcDNA3,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ;用酶切 ,PCR扩增鉴定筛选到的重组质粒阳性克隆。以正确的重组质粒为模板 ,用双脱氧链末端终止法测定ABRA基因序列 ,应用软件辅助分析ABRA序列及进行同源性比较。结果 PCR扩增得到特异的FCC1/HN株ABRA基因 ;经双酶切及PCR鉴定表明获得正确的 pcDNA3-ABRA重组质粒。测序表明 ,FCC1/HN株ABRA基因大小为 2 2 2 0bp ,编码 73 9个氨基酸。恶性疟原虫FCC1/HN株与Camp ,3D7,FC2 7株ABRA基因编码氨基酸序列主要在C -端存在少量不同 ;FCR3株与以上 4株ABRA基因编码氨基酸序列相比 ,只有少量的氨基酸替换。结论 从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中获取ABRA基因 ,成功构建真核表达重组质粒pcDNA3-ABRA ,并测定了FCC1/HN株ABRA基因的序列 ;FCC1/HN株与其它分离株ABRA基因有很高的同源性。
关键词
恶性疟原虫
酸碱氨基酸重复抗原
聚合酶链反应
克隆
序列分析
ABRA基因
Keywords
Plasmodium falciparum
Acidic basic repeat antigen
Polymerase Chain Reaction
Cloning
Sequence analysis
分类号
R531.3 [医药卫生—内科学]
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出处
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1
恶性疟原虫ABRA基因真核表达重组质粒的构建及序列分析
单志新
余新炳
李学荣
马长玲
卞国武
胡旭初
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2001
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