呋喃唑酮代谢物间接竞争酶联免疫检测方法的研究 被引量：7

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作者 史晓亚 高丽霞 黄登宇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期260-265,272,共7页

建立了呋喃唑酮代谢物间接竞争酶联免疫检测法。用活化酯法将卵清蛋白和半抗原连接成为包被原,对包被原和单克隆抗体的稀释倍数,封闭液浓度、竞争时间、酶标二抗孵育时间和显色反应时间进行优化,同时通过灵敏度、特异性、精密度和准确... 建立了呋喃唑酮代谢物间接竞争酶联免疫检测法。用活化酯法将卵清蛋白和半抗原连接成为包被原,对包被原和单克隆抗体的稀释倍数,封闭液浓度、竞争时间、酶标二抗孵育时间和显色反应时间进行优化,同时通过灵敏度、特异性、精密度和准确度等指标进行方法学评价。结果显示,最佳条件为:包被原和单克隆抗体稀释倍数分别为800倍和6 400倍,封闭液是1%脱脂乳,竞争时间是60 min,辣根过氧化物酶标记羊抗鼠二抗孵育时间是45 min,显色时间是15 min。通过建立的标准曲线计算得到线性方程是Y=-0.253X+1.336(R2=0.995),IC50是2.015 ng/m L,线性范围是0.131~30.911 ng/m L,空白猪肉添加回收率是84.8%~90.3%,批内和批间变异系数分别为3.3%~4.1%和4.6%~6.7%。此方法特异性强,准确性、精密度和重现性均良好,可用于动物源性食品中呋喃唑酮代谢物的快速筛查。 展开更多

关键词 兽药 呋喃唑酮 酶联免疫检测法

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莫米松糠酸酯高特异性抗体制备及酶联免疫分析方法 被引量：1

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作者 谢桂勉 黄莹星 +1 位作者 林俊虹 张世伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期126-131,共6页

莫米松糠酸酯(mometasone furoate,MF)是一种常见的糖皮质激素。为快速、便捷地监控MF的滥用情况,制备了MF单克隆抗体并建立了其竞争酶联免疫检测方法。将氨氧乙酸分别连接至MF和莫米松二糠酸酯(mometasone difuroate,MDF),合成了免疫... 莫米松糠酸酯(mometasone furoate,MF)是一种常见的糖皮质激素。为快速、便捷地监控MF的滥用情况,制备了MF单克隆抗体并建立了其竞争酶联免疫检测方法。将氨氧乙酸分别连接至MF和莫米松二糠酸酯(mometasone difuroate,MDF),合成了免疫半抗原和包被半抗原。免疫半抗原以活泼脂法连接钥孔血蓝蛋白获得全抗原,通过免疫小鼠、细胞融合及筛选获得能够稳定分泌抗MF单克隆抗体的细胞株,制备并纯化了抗体。该抗体的主要识别区域为MF的五元环区域,因此不和常见的64种糖皮质激素发生交叉反应。建立了基于异源包被的MF间接竞争酶联免疫检测法,其半抑制浓度(IC_(50))为1.2 ng/mL,对肌肉和肝脏的最低检出限分别为0.52μg/kg和0.59μg/kg。灵敏度相比于同源包被提升了20倍。使用60%甲醇水溶液提取动物组织的添加回收率为70%~82%。该方法能有效应用于动物组织中MF的快速筛查。 展开更多

关键词 糖皮质激素 莫米松糠酸酯 单克隆抗体 异源包被 间接竞争酶联免疫检测法(ic-ELISA)

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酶联免疫吸附法检测鸡蛋中三聚氰胺的残留 被引量：2

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作者 赵庆文 徐凤敏 +2 位作者 钟永本 张会彩 王建平 《现代农业科技》 2010年第8期361-363,共3页

将三聚氰胺与琥珀酸酐反应以合成半抗原,再采用混合酸酐法合成人工完全抗原,然后免疫新西兰白兔获得针对三聚氰胺的特异性抗体(IC50为42 ng/mL),以此抗体为核心建立了检测三聚氰胺的间接竞争酶联免疫吸附检测法,检测限为8.5 ng/mL。鸡... 将三聚氰胺与琥珀酸酐反应以合成半抗原,再采用混合酸酐法合成人工完全抗原,然后免疫新西兰白兔获得针对三聚氰胺的特异性抗体(IC50为42 ng/mL),以此抗体为核心建立了检测三聚氰胺的间接竞争酶联免疫吸附检测法,检测限为8.5 ng/mL。鸡蛋样品以氨化乙腈提取,正己烷去脂,微孔滤膜过滤后检测;在空白样品中添加不同浓度的三聚氰胺,回收率范围为88.9%～96.1%,变异系数小于11.6%。表明:酶联免疫吸附法,快速、简便且灵敏,可作为鸡蛋或其他动物性食品中三聚氰胺残留的常规筛选方法。 展开更多

关键词 三聚氰胺 酶联免疫检测法 鸡蛋 残留

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牛布鲁氏杆菌病的间接酶联免疫快速检测 被引量：4

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作者 武玉香 路晟 柳家鹏 《中国奶牛》 2011年第5期43-45,共3页

本文通过制备布鲁氏杆菌菌壁抗原,建立了牛布鲁氏菌病的间接酶联免疫检测方法,应用虎红平板凝集试验方法、补体结合试验、间接酶联免疫吸附试验方法对145份牛血清进行了布鲁氏菌病的检验,间接酶联免疫吸附试验检出率最高,虎红平板凝集... 本文通过制备布鲁氏杆菌菌壁抗原,建立了牛布鲁氏菌病的间接酶联免疫检测方法,应用虎红平板凝集试验方法、补体结合试验、间接酶联免疫吸附试验方法对145份牛血清进行了布鲁氏菌病的检验,间接酶联免疫吸附试验检出率最高,虎红平板凝集试验与补体结合试验的结果符合率为95.6%,虎红平板凝集试验与间接酶联免疫吸附试验的结果符合率为96.7%,补体结合试验与间接酶联免疫吸附试验的结果符合率为92.7%。结果表明间接酶联免疫吸附试验方法特异性较强,具有检测快速、灵敏、准确等优点。 展开更多

关键词 牛布鲁氏菌病 间接酶联免疫检测法 血清学诊断

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酶联免疫吸附测定微孔板重复使用的研究

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作者 徐桦 孙爱民 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1995年第2期479-480,共2页

酶联免疫吸附测定微孔板重复使用的研究生物化学教研室徐桦，孙爱民关键词酶联免疫检测法，微孔板中图号Ｒ５０３酶联免疫吸附测定（ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ，ＥＬＩＳＡ）广泛用于科研和临床... 酶联免疫吸附测定微孔板重复使用的研究生物化学教研室徐桦，孙爱民关键词酶联免疫检测法，微孔板中图号Ｒ５０３酶联免疫吸附测定（ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ，ＥＬＩＳＡ）广泛用于科研和临床检测，由于通常应用的４０孔微孔板对... 展开更多

关键词 酶联免疫检测法 微孔板

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动物饲料中玉米赤霉烯酮ELISA检测方法的建立 被引量：18

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作者 张晓 张晴晴 +3 位作者 程罗根 张心明 刘媛 刘贤进 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2007年第4期351-355,共5页

为检测动物饲料中玉米赤霉烯酮的含量，建立酯联免疫检测法（ELISA）。结果显示：该方法检测回收率范围为67％～99％，其最低检出限为0．1μg／kg；以建立的ELISA法对随机添加的35个普通动物饲料样本进行分析，并以HPLC法对同一批样品... 为检测动物饲料中玉米赤霉烯酮的含量，建立酯联免疫检测法（ELISA）。结果显示：该方法检测回收率范围为67％～99％，其最低检出限为0．1μg／kg；以建立的ELISA法对随机添加的35个普通动物饲料样本进行分析，并以HPLC法对同一批样品进行检测，两种方法回收率相关系数为0．9561。证明建立的ELISA检测方法适合动物饲料中玉米赤霉烯酮的检测。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 动物饲料 酶联免疫检测法

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小麦赤霉病菌定性和定量ELISA检测方法的建立 被引量：4

7

作者 李潮霞 田世民 +3 位作者 马平 杨文香 李社增 刘大群 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第1期178-181,共4页

以3株小麦赤霉菌(禾谷镰刀菌BDX4-5,BDX3-2,HwH4-5)的混合菌体蛋白为免疫原,制备多克隆抗体,建立了检测小麦赤霉菌的间接ELISA法。结果表明,小麦赤霉菌抗血清的效价为1∶640 000,灵敏度为0.005μg/mL。由ELISA法测定的结果可知,此抗体... 以3株小麦赤霉菌(禾谷镰刀菌BDX4-5,BDX3-2,HwH4-5)的混合菌体蛋白为免疫原,制备多克隆抗体,建立了检测小麦赤霉菌的间接ELISA法。结果表明,小麦赤霉菌抗血清的效价为1∶640 000,灵敏度为0.005μg/mL。由ELISA法测定的结果可知,此抗体可以与镰刀菌发生特异性反应,而与其他供试的病原真菌的菌体蛋白呈阴性反应。对田间人工接种的小麦籽粒进行了ELISA定量测定,病菌的生物菌量与病害的发病程度相符合。 展开更多

关键词 小麦赤霉病 多克隆抗体 酶联免疫检测法

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湖北省主栽甘薯品种病毒种类的血清学检测 被引量：4

8

作者 刘意 苏文瑾 +4 位作者 雷剑 王连军 柴沙沙 杨新笋 张文英 《湖北农业科学》 2016年第22期5821-5824,5827,共5页

对湖北省2个甘薯主产区内3个甘薯主栽品种,共计39份样本甘薯病毒病采用硝酸纤维膜酶联免疫检测法(NCM-ELISA)检测。结果表明,39份测试甘薯样本中,1个样本感染了甘薯退绿病毒(SPCFV),检出率为2.56%;18个样本感染了甘薯羽状斑驳病毒(SPFM... 对湖北省2个甘薯主产区内3个甘薯主栽品种,共计39份样本甘薯病毒病采用硝酸纤维膜酶联免疫检测法(NCM-ELISA)检测。结果表明,39份测试甘薯样本中,1个样本感染了甘薯退绿病毒(SPCFV),检出率为2.56%;18个样本感染了甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV),检出率为46.15%;4个样本感染了甘薯潜隐病毒(SPLV),检出率为10.26%;1个样本感染了甘薯G病毒(SPVG),检出率为2.56%。3个主栽甘薯品种中,鄂薯6号病毒检出率最高,为66.67%;其次为徐薯22,病毒检出率为45.45%;福薯18的病毒检出率为43.75%。不同产地甘薯主栽品种带毒状况调查表明,鄂州主产区病毒病种类最多,病毒检出率最高。在5种受测目标病毒中,SPFMV的发生和危害最为严重,其单个采样点的样本感染率最高为52.12%;其次为SPLV,单个采样点的样本感染率为20.00%。2个主产区检测样品均未检测到甘薯退绿矮化病毒(SPCSV),但并不意味SPCSV在2个主产区没有发生,因此有待进一步大范围调查验证。 展开更多

关键词 甘薯 病毒病 硝酸纤维膜酶联免疫检测法(NCM-ELISA)

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三种奶牛早期妊娠诊断方法临床应用效果比较 被引量：3

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作者 甄志刚 王春强 吴思思 《现代畜牧兽医》 2015年第10期35-37,共3页

为了提高奶牛场早期妊娠诊断的准确性和实用性,本研究使用酶联免疫检测法、可视化酶联免疫检测法和直肠检查法对配种后28~30 d奶牛妊娠的阳性率、假阳性率进行检测,通过对检测结果的比较来探讨将酶联免疫检测法应用于奶牛生产的可行性... 为了提高奶牛场早期妊娠诊断的准确性和实用性,本研究使用酶联免疫检测法、可视化酶联免疫检测法和直肠检查法对配种后28~30 d奶牛妊娠的阳性率、假阳性率进行检测,通过对检测结果的比较来探讨将酶联免疫检测法应用于奶牛生产的可行性。结果表明：从妊娠的阳性率上看,三种方法分别为62.2%±1.9%、62.2%±1.9%和63.3%±2.2%,无显著性差异;从假阳性率上看,采用直肠检查法的假阳性率最高,常规酶联免疫检测法和可视化酶联免疫检测法也存在一定的假阳性,但显著低于直肠检查法。考虑诊断的准确性和实用性,在奶牛生产中推荐采用可视化酶联免疫检测法进行早期妊娠诊断工作。 展开更多

关键词 奶牛 早期妊娠诊断 酶联免疫检测法

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4种市售莱克多巴胺检测试剂盒的质量评价 被引量：1

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作者 张文刚 李丹妮 +2 位作者 曹向英 孙文梅 顾欣 《饲料研究》 CAS 北大核心 2010年第4期36-37,共2页

莱克多巴胺的残留检测目前常用的检测方法有高效液相色谱法、气相色谱一质谱联用、液相色谱一质谱联用及酶联免疫检测法等，试验旨在通过对不同莱克多巴胺ELISA试剂盒质量评价与检测研究，为莱克多巴胺监测试剂盒的使用提供科学的参考... 莱克多巴胺的残留检测目前常用的检测方法有高效液相色谱法、气相色谱一质谱联用、液相色谱一质谱联用及酶联免疫检测法等，试验旨在通过对不同莱克多巴胺ELISA试剂盒质量评价与检测研究，为莱克多巴胺监测试剂盒的使用提供科学的参考数据。 展开更多

关键词 检测试剂盒 莱克多巴胺 质量评价 高效液相色谱法 ELISA试剂盒 酶联免疫检测法 市售 质谱联用

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新疆石河子地区猪伪狂犬病的血清学调查 被引量：3

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作者 王鹏雁 张高轩 +1 位作者 蒋建军 刘洪斌 《甘肃畜牧兽医》 2001年第4期17-18,共2页

用乳胶凝集试验 (LAT)和斑点—酶联免疫检测法 (DOT ELISA)对石河子地区几个猪场进行了猪伪狂犬病的血清学调查。结果显示 ,阳性率占 5%～ 96%。由此可以得出此病在石河子地区存在 ,且有流行趋势。

关键词 新疆石河子地区 猪 伪狂犬病 血清学调查 乳胶凝集试验 斑点-酶联免疫检测法

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国际科技资讯

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《肉类研究》 2012年第12期I0011-I0011,共1页

日本研究出一种可用于检测加工食品中鱼肉蛋百的灵敏酶联免疫检测法 鱼肉是引起食物过敏的最普遍的原因之一，其中的主要过敏原是一种12kD的肌肉蛋白——小清蛋白。日本是一个岛国，也是水产品生产和消费大国，日本科学家近期研究了一... 日本研究出一种可用于检测加工食品中鱼肉蛋百的灵敏酶联免疫检测法 鱼肉是引起食物过敏的最普遍的原因之一，其中的主要过敏原是一种12kD的肌肉蛋白——小清蛋白。日本是一个岛国，也是水产品生产和消费大国，日本科学家近期研究了一种操作简单、灵敏度高的三明治式酶联免疫法（ELISA）用于检测食品中的鱼肉蛋白成分（拟发表于2013年l期Food Chemistry）。 展开更多

关键词 酶联免疫检测法 日本科学家 资讯 科技 国际 酶联免疫法 食物过敏 肌肉蛋白

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