通过对比试验研究了蛋白提取液、提取时间、还原剂DTT、封闭液、包被物与抗体浓度等对小麦胚乳贮藏蛋白多克隆抗体的影响,建立了适宜于小麦胚乳醇溶蛋白(G liad in)和低分子量谷蛋白亚基(Low molecu lar we ight glute-n in subun it,LM...通过对比试验研究了蛋白提取液、提取时间、还原剂DTT、封闭液、包被物与抗体浓度等对小麦胚乳贮藏蛋白多克隆抗体的影响,建立了适宜于小麦胚乳醇溶蛋白(G liad in)和低分子量谷蛋白亚基(Low molecu lar we ight glute-n in subun it,LMW-GS)多克隆抗体的间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)。展开更多
文摘用牛乳铁蛋白(Bovine Lactoferrin,BLf)、纯品免疫新西兰白兔制得兔抗BLf的多克隆抗体,琼扩效价最高为1:64。经ELISA方法检测,该抗体与牛乳中的主要蛋白质:α-乳清蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白以及酪蛋白之间不存在免疫交叉性,说明抗体特异性良好。以BLf纯品为包被抗原,自制抗体为一抗,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG为二抗,邻苯二胺(OPD)为底物,建立了BLf的竞争抑制性ELISA方法。包被抗原及抗体的浓度均由方阵稀释实验确定。所建立的ELISA方法孔间误差1.6％,板间误差4.3％,灵敏度25μg/L,检测范围25～800μg/L。标准曲线线性方程(Logit)Y=-1.488 lg C+3.811 6,相关系数R=0.990。
文摘通过对比试验研究了蛋白提取液、提取时间、还原剂DTT、封闭液、包被物与抗体浓度等对小麦胚乳贮藏蛋白多克隆抗体的影响,建立了适宜于小麦胚乳醇溶蛋白(G liad in)和低分子量谷蛋白亚基(Low molecu lar we ight glute-n in subun it,LMW-GS)多克隆抗体的间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)。
