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酶联免疫吸附分析双抗夹心法检测临床鼻咽抽吸物中呼吸道合胞病毒 被引量：3
1
作者 孙永鹏 靳输梅 +5 位作者 詹炉停 温桂平 赵敏 张伟 夏宁邵 郑子峥 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期505-510,共6页
呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起5周岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体.目前常用的试剂盒是美国Diagnostic Hybrids公司研发的7项呼吸道病毒检测试剂盒,但其价格昂贵,且需荧光显微镜辅助诊断,不利于在基层医... 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起5周岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体.目前常用的试剂盒是美国Diagnostic Hybrids公司研发的7项呼吸道病毒检测试剂盒,但其价格昂贵,且需荧光显微镜辅助诊断,不利于在基层医疗机构中推广,国内尚无上市的快速诊断试剂用于临床检测.为此建立用于RSV抗原检测的早期快速诊断试剂,并以反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测为参比,同时使用酶联免疫吸附分析(ELISA)双抗夹心法和免疫荧光法对112份临床鼻咽抽吸物(NPA)样本进行检测.ELISA双抗夹心法和免疫荧光法的灵敏度分别为79.31%和74.14%,特异度分别为100%和96.30%,Kappa值分别为0.787 1和0.689 5,两者均与RT-PCR检测结果具有高度一致性.此外,将ELISA双抗夹心法与免疫荧光法比较,两者无显著差异(p>0.05).综上,ELISA双抗夹心法操作简便,特异性高,有望代替进口检测试剂盒完成RSV感染的早期快速诊断. 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 融合蛋白 酶联免疫吸附分析双抗夹心法 快速诊断
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双抗夹心酶联免疫吸附法检测沙门氏菌 被引量：36
2
作者 伍燕华 牛瑞江 +4 位作者 赖卫华 山珊 刘道峰 倪小琴 冯荣华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期62-65,共4页
沙门氏菌是自然界中普遍存在的一种食源性致病菌,在中国的食物中毒中沙门氏菌引起的病例占第一位。本研究以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌多克隆抗体。以抗沙门氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以抗沙门... 沙门氏菌是自然界中普遍存在的一种食源性致病菌,在中国的食物中毒中沙门氏菌引起的病例占第一位。本研究以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌多克隆抗体。以抗沙门氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以抗沙门氏菌单克隆抗体C1359作为检测抗体,建立快速检测沙门氏菌双抗夹心ELISA方法。结果表明:该方法可以检测A、B、C、D、E等五种典型的沙门氏菌,对沙门氏菌纯培养液的最低检测量为1×104CFU/mL,与其他杂菌不存在交叉反应,具有较好的灵敏性和特异性。 展开更多
关键词 沙门氏菌 多克隆抗体 双抗夹心酶联免疫吸附法
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双抗体夹心酶联免疫吸附法检测杏仁过敏原苦杏仁球蛋白 被引量：9
3
作者 张洁琼 高淑霞 +2 位作者 生威 张燕 王硕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期173-177,共5页
提取中国甜杏仁过敏原蛋白苦杏仁球蛋白,分别制备兔和鼠多克隆抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法。结果表明:对甜杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限为(6.36±1.02)μg/L;对中国苦杏仁及美国大杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限分别为(12... 提取中国甜杏仁过敏原蛋白苦杏仁球蛋白,分别制备兔和鼠多克隆抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法。结果表明:对甜杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限为(6.36±1.02)μg/L;对中国苦杏仁及美国大杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限分别为(12.11±1.70)μg/L和(18.95±1.52)μg/L,且与常见的14种植物性蛋白没有交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。将该方法用于法式小面包、饼干和脱脂牛乳中杏仁过敏原的检测,苦杏仁球蛋白的添加回收率为78.94%～125.15%,且相对标准偏差均低于5.81%。 展开更多
关键词 杏仁 苦杏仁球蛋白 双抗体夹心酶联免疫吸附分析法
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酶联免疫吸附分析法测定水产品及水中孔雀石绿和无色孔雀石绿 被引量：36
4
作者 邢玮玮 王榕妹 +3 位作者 王俊卿 杨红 贺莉 邓安平 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期42-46,共5页
本文报道一种同时测定水产品及水样中孔雀石绿（MG）和无色孔雀石绿（LMG）的间接竞争酶联免疫吸附分析法。对无色孔雀石绿分子进行修饰，使其与载体蛋白交联，得到免疫原和包被抗原，经过多次免疫动物制得抗无色孔雀石绿的多克隆抗体... 本文报道一种同时测定水产品及水样中孔雀石绿（MG）和无色孔雀石绿（LMG）的间接竞争酶联免疫吸附分析法。对无色孔雀石绿分子进行修饰，使其与载体蛋白交联，得到免疫原和包被抗原，经过多次免疫动物制得抗无色孔雀石绿的多克隆抗体。在优化的实验条件下，IC50值（标准曲线中吸光度抑制至最大吸光度值的50％时所对应的待测物浓度）为0．9～2．6μg／L，检出限为0．02—0．10μg／L，无色孔雀石绿在水样及水产品中的回收率为76．2～95．0％，与孔雀石绿的交叉反应率为95．25％。真实样品测定中，两种食用鱼养殖水样及一个鱼样中未检出孔雀石绿和无色孔雀石绿，但在观赏鱼养殖水样及另一鱼样中检出孔雀石绿和无色孔雀石，浓度分别为1．84μg／L和1．38μg/L。 展开更多
关键词 孔雀石绿 无色孔雀石绿 酶联免疫吸附分析法 食品分析
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酶联免疫吸附法及其在食品分析中的应用 被引量：36
5
作者 朱慧莉 黎锡流 许喜林 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期80-82,共3页
简单介绍了酶联免疫吸附法 (ELISA) ,并且就其在食品分析中的应用进行了较详细的评述 ,主要包括ELISA用于食品微生物、食品中的毒素。
关键词 免疫分析 酶联免疫吸附法 食品分析 微生物 毒素 残留农药
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乳铁蛋白的免疫化学分析法——酶联免疫吸附测定法 被引量：15
6
作者 卢蓉蓉 孙震 +1 位作者 许时婴 王璋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期102-104,共3页
应用酶联免疫法测定初乳中乳铁蛋白的含量。检测的线性范围为３．１～２００　ｎｇ／ｍｌ，最小检测限为１．５　ｎｇ／ｍｌ，回收率在９１．８２％～１１５．５６　％之间，变异系数在６．２０％～９．１８　％之间。
关键词 乳铁蛋白 免疫化学分析法 酶联免疫吸附测定法
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用于测定多环芳烃的酶联免疫吸附分析法的研究 被引量：7
7
作者 张彦峰 张清敏 +1 位作者 高志贤 戴树桂 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期537-540,共4页
将芘丁酸(1-pyrenebutyricacid,PBA)通过活性酯法与牛血清白蛋白(BSA)共价结合,以PBA-BSA结合物为免疫原制备抗血清,利用该抗血清建立了测定多环芳烃类物质的间接竞争酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),并研究... 将芘丁酸(1-pyrenebutyricacid,PBA)通过活性酯法与牛血清白蛋白(BSA)共价结合,以PBA-BSA结合物为免疫原制备抗血清,利用该抗血清建立了测定多环芳烃类物质的间接竞争酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),并研究了10种多环芳烃与该抗血清的交叉反应。结果表明,该方法用于测定芘和芘丁酸的IC50值分别为0.132mg·L-1和0.253mg·L-1,检出限分别为0.1mg·L-1和0.01mg·L-1,该方法不受溶剂甲醇的影响,因此可以用于经过预富集的环境样品中多环芳烃类物质的测定。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附分析法(ELISA) 多环芳烃(PAHs) 芘 测定
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酶联免疫吸附分析法测定环境水体中的萘 被引量：3
8
作者 杨丽波 庄惠生 +1 位作者 周纯 叶其炎 《化工环保》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期563-566,共4页
使用自制的包被原和抗萘多克隆兔抗体,建立了测定环境水体中痕量萘的间接竞争酶联免疫吸附法,并优化了实验条件。工作曲线线性方程为I=8.394logρ+50.21(I为抑制率,ρ为萘的质量浓度),线性范围10^(-3)～10μg/L内的相关系数为0.985 6,... 使用自制的包被原和抗萘多克隆兔抗体,建立了测定环境水体中痕量萘的间接竞争酶联免疫吸附法,并优化了实验条件。工作曲线线性方程为I=8.394logρ+50.21(I为抑制率,ρ为萘的质量浓度),线性范围10^(-3)～10μg/L内的相关系数为0.985 6,方法灵敏度为0.944μg/L,检出限为0.250 ng/L,回收率为86.00%～106.00%,批间误差为5.00%～15.00%,批内误差为2.00%～8.00%,与四种结构类似物的交叉率均小于14.0%。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附法 萘 分析方法
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酶联免疫吸附分析法测定环境水样中痕量药物吲哚美辛 被引量：2
9
作者 贺莉 霍松岷 +2 位作者 杨红 张朔瑶 邓安平 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期984-987,共4页
将吲哚美辛与蛋白质载体结合,制成完全免疫抗原,经过多次动物免疫得到了性能优良的兔抗吲哚美辛抗体,在优化实验条件的基础上,建立了灵敏度高、特异性强、简便、稳定的测定水样中吲哚美辛的酶联免疫吸附分析方法(ELISA)。IC50值(标准曲... 将吲哚美辛与蛋白质载体结合,制成完全免疫抗原,经过多次动物免疫得到了性能优良的兔抗吲哚美辛抗体,在优化实验条件的基础上,建立了灵敏度高、特异性强、简便、稳定的测定水样中吲哚美辛的酶联免疫吸附分析方法(ELISA)。IC50值(标准曲线中吸光度抑制至最大吸光度值的50%时所对应的待测物浓度)为0.09μg/L^0.17μg/L,最低检出限为0.005μg/L^0.01μg/L。真实水样中,均发现含有吲哚美辛,浓度在0.016μg/L^0.083μg/L之间,水样的加标回收率在84.4%~127.0%之间。 展开更多
关键词 吲哚美辛 酶联免疫吸附分析法 环境分析
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酶联免疫吸附分析法测定苯并(a)芘和多氯联苯 被引量：35
10
作者 邓安平 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期340-343,共4页
对苯并(a)芘作了五种不同的化学修饰,并与载体蛋白交联,制备出十四种单克隆抗体.经单克隆抗体的筛选和实验条件的优化,建立了测定苯并(a)芘的酶联免疫吸附分析法.以4,4’-二氯联苯为测定多氯联苯的酶联免疫吸附分析法的起始物,作了二种... 对苯并(a)芘作了五种不同的化学修饰,并与载体蛋白交联,制备出十四种单克隆抗体.经单克隆抗体的筛选和实验条件的优化,建立了测定苯并(a)芘的酶联免疫吸附分析法.以4,4’-二氯联苯为测定多氯联苯的酶联免疫吸附分析法的起始物,作了二种化学修饰,制备出九种多克隆抗体,建立了以羊抗多氯联苯抗体为基础的酶联免疫吸附分析法,并用于土壤中多氯联苯的测定. 展开更多
关键词 酶联免疫吸附分析法 苯并(A)芘 多氯联苯
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酶联免疫吸附测定法及在兽药饲料分析中的应用 被引量：7
11
作者 田颖 李玉文 《中国饲料》 北大核心 2004年第10期33-34,共2页
关键词 酶联免疫吸附测定法 兽药分析 饲料分析 竞争分析模式 工作原理
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酶联免疫吸附结合荧光分析法测定乳粉加速贮藏过程中的褐变产物
12
作者 刘玲 杨双华 +1 位作者 纪淑娟 Leif Horsfelt SKIBSTED 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第18期249-252,共4页
在65℃封闭的加速贮藏条件下,对3种不同类型乳粉(全脂乳粉、脱脂乳粉和酪乳粉)的褐变产物——末端糖基化产物(AGEs)进行研究和检测。在确立酶联免疫吸附(ELISA)法测定末端糖基产物含量的基础上,结合荧光分析测定乳粉中蛋白末端糖基化所... 在65℃封闭的加速贮藏条件下,对3种不同类型乳粉(全脂乳粉、脱脂乳粉和酪乳粉)的褐变产物——末端糖基化产物(AGEs)进行研究和检测。在确立酶联免疫吸附(ELISA)法测定末端糖基产物含量的基础上,结合荧光分析测定乳粉中蛋白末端糖基化所产生的荧光物质。结果表明:AGEs产生的荧光物质和AGEs含量随着贮藏时间的延长而增加。酶联免疫吸附法采用初级抗体和酶标二抗稀释倍数均为2500倍时可以有效测定褐变乳粉中AGEs含量,其中加速贮藏20d后乳粉中AGEs含量最高,可达到0.61ng/mL。最低检出质量浓度达到0.006ng/mL,最大误差率在5%左右,重复性良好。因此,乳粉褐变的荧光强度和AGEs含量的ELISA检测可以作为评价乳粉质量的有效方法。 展开更多
关键词 乳粉 非酶褐变 末端糖基化产物 酶联免疫吸附法 荧光分析
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酶联免疫吸附分析法应用于战场水环境TNT检测的可行性研究
13
作者 刘婧婷 谯华 +1 位作者 冯孝杰 陈志莉 《湖北农业科学》 2017年第1期125-127,131,共4页
为了快速检测战场水环境中TNT含量以判断水源可用性,提出了建立关于TNT的酶联免疫吸附分析法(ELISA)。分析ELISA的建立要点:根据TNT分子结构官能团的可改造性提出了合成半抗原的3种方法;对应3类半抗原采用不同蛋白偶联方法合成3种人工抗... 为了快速检测战场水环境中TNT含量以判断水源可用性,提出了建立关于TNT的酶联免疫吸附分析法(ELISA)。分析ELISA的建立要点:根据TNT分子结构官能团的可改造性提出了合成半抗原的3种方法;对应3类半抗原采用不同蛋白偶联方法合成3种人工抗原;分析动物体对TNT人工抗原可产生有效免疫应答并可获得满足ELISA要求的抗血清;样品前处理方法可满足快速检测要求。从理论证明建立TNT的ELISA并满足检测要求的可行性;同时,提出了利用此法检测待解决和优化的问题。 展开更多
关键词 TNT 水环境 酶联免疫吸附分析法 半抗原 抗血清
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酶联免疫吸附分析法测定猪、鸡粪便中11种β_2-受体激动剂残留 被引量：11
14
作者 周悦榕 李丹妮 +3 位作者 顾欣 严凤 吴剑平 张鑫 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第8期39-45,共7页
以市售β2-受体激动剂酶联免疫检测试剂盒为基础,建立了可同时测定猪、鸡粪便中克仑特罗、溴布特罗、沙丁胺醇、特布他林、马布特罗、卡布特罗、马喷特罗、吡布特罗、西马特罗、西布特罗、克仑潘特11种β2-受体激动剂的酶联免疫吸附（EL... 以市售β2-受体激动剂酶联免疫检测试剂盒为基础,建立了可同时测定猪、鸡粪便中克仑特罗、溴布特罗、沙丁胺醇、特布他林、马布特罗、卡布特罗、马喷特罗、吡布特罗、西马特罗、西布特罗、克仑潘特11种β2-受体激动剂的酶联免疫吸附（ELISA）分析法。该方法对猪、鸡粪便样品的检出限为5 ng/g,猪粪便样品的添加回收率为57.3%-247.4%,鸡粪便样品的添加回收率为89.3%-177.3%,猪粪便样品重复测定结果的相对标准偏差为0.3%-14.3%,鸡粪便样品重复测定结果的相对标准偏差为0.2%-23.5%。 展开更多
关键词 Β2-受体激动剂 多残留 猪粪便 鸡粪便 酶联免疫吸附分析法
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间接竞争酶联免疫吸附分析法测定土壤和面粉中的异丙隆 被引量：8
15
作者 吴春菊 李方实 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期1080-1084,共5页
采用自制的抗异丙隆多克隆抗体建立了测定异丙隆残留的间接竞争酶联免疫分析方法,优化的包被抗原和抗体的浓度分别为0.1和0.016mg·L-1。结果表明,6种常用的与异丙隆结构相似的脲类除草剂的交叉反应都小于0.6%,标准曲线的线性范围为... 采用自制的抗异丙隆多克隆抗体建立了测定异丙隆残留的间接竞争酶联免疫分析方法,优化的包被抗原和抗体的浓度分别为0.1和0.016mg·L-1。结果表明,6种常用的与异丙隆结构相似的脲类除草剂的交叉反应都小于0.6%,标准曲线的线性范围为3.42～121.33ng·mL-1,线性相关系数r2=0.9410,方法的检测限为3.42ng·mL-1。利用建立的间接竞争ELISA方法检测土壤和面粉样品中的异丙隆,测得土壤中异丙隆的加标回收率为100%～108%,变异系数为3%～6%;面粉中异丙隆的加标回收率为81%～84%,变异系数为5%～7%。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附分析法(ELISA) 异丙隆 土壤 面粉 测定
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酶联免疫吸附分析法测定猪、鸡粪便中11种β_2–受体激动剂残留的不确定度评定 被引量：5
16
作者 周悦榕 李丹妮 +4 位作者 顾欣 吴剑平 严凤 潘娟 张婧 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第8期24-32,共9页
以市售β_2–受体激动剂酶联免疫检测试剂盒为基础,对采用酶联免疫吸附分析法测定猪、鸡粪便中11种β_2–受体激动剂残留的不确定度进行评估,找到影响不确定度的主要因素,为控制实验过程和评价检测结果可靠性提供依据。本研究对标准溶... 以市售β_2–受体激动剂酶联免疫检测试剂盒为基础,对采用酶联免疫吸附分析法测定猪、鸡粪便中11种β_2–受体激动剂残留的不确定度进行评估,找到影响不确定度的主要因素,为控制实验过程和评价检测结果可靠性提供依据。本研究对标准溶液配制、样品称量、样品前处理过程、样品添加回收率、酶联免疫吸附分析测试程序、酶标仪吸光度示值误差等测量不确定度来源进行了分析,通过评定各不确定度分量与不确定度大小,得到猪、鸡粪便中11种β_2–受体激动剂扩展不确定度的范围分别在0.25~2.4 ng/g和0.42~1.7 ng/g范围内。由各因素对合成不确定度贡献比的分析可知,标准溶液配制、样品前处理过程、样品添加回收率、酶联免疫吸附分析测试程序、酶标仪吸光度示值误差是主要的影响因素。通过合理地控制各影响因素有利于提高检测结果的准确性与可靠性。 展开更多
关键词 不确定度 β2–受体激动剂 酶联免疫吸附分析法 猪粪便 鸡粪便
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酶联免疫吸附分析法测定水中双氯芬酸钠 被引量：4
17
作者 蒲纯 邓安平 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期548-551,共4页
本研究报道一种高灵敏度的测定自来水和表面水中药物残留双氯芬酸钠含量的间接酶联吸附分析法(ELISA)。在包被抗原为20μg/L,抗体为1∶20000倍稀释,辣根过氧化物酶-羊抗兔IgG为1∶20000倍稀释的优化条件下,双氯芬酸钠的检出限(LOD)为0.... 本研究报道一种高灵敏度的测定自来水和表面水中药物残留双氯芬酸钠含量的间接酶联吸附分析法(ELISA)。在包被抗原为20μg/L,抗体为1∶20000倍稀释,辣根过氧化物酶-羊抗兔IgG为1∶20000倍稀释的优化条件下,双氯芬酸钠的检出限(LOD)为0.004μg/L^0.008μg/L,IC50值(标准曲线中吸光度抑制至最大吸光度值的50%时所对应的待测物浓度)为0.03μg/L^0.12μg/L。双氯芬酸钠在自来水中和表面水中的回收率分别为96%和113%。表面水存在一定的基体效应,但仅需要简单过滤稀释就可以消除。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附分析法 双氯芬酸钠 水样分析
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DPPs类有机磷农药宽谱酶联免疫吸附分析方法的建立 被引量：9
18
作者 吕丽兰 张娅 +7 位作者 陆覃昱 邹承武 甘志勇 李冬桂 吴静娜 王艺霖 李鑫生 何丽珊 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第11期2659-2666,共8页
【目的】制备识别二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析法(ic-ELISA),为实现农产品有机磷农药残留快检提供技术支持。【方法】以化合物4-(二乙氧基硫代磷酰氧基)-肉桂酸为半抗原,制备完全... 【目的】制备识别二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析法(ic-ELISA),为实现农产品有机磷农药残留快检提供技术支持。【方法】以化合物4-(二乙氧基硫代磷酰氧基)-肉桂酸为半抗原,制备完全抗原。筛选免疫小鼠,制备稳定分泌可识别DPPs抗体的单克隆细胞株,筛选出抗原和抗体最佳工作浓度组合,建立该单抗的ic-ELISA标准曲线,并分析该单抗与6种DPPs的交叉反应率,评估ic-ELISA的广谱性。利用所得抗体与喹硫磷交叉反应最强的特性对采购的柑橘和鲜橙样品进行喹硫磷添加回收试验。【结果】成功合成识别DPPs的人工抗原,包括包被抗原DPPs-OVA和免疫抗原DPPs-BSA。通过有限稀释法筛选获得灵敏度高、广谱性最强的单克隆细胞株5G_(8)。以0.5μg/mL包被抗原DPPs-OVA、1.0μg/mL抗体5G_(8)2D_(5)为最佳工作浓度组合,将细胞株筛选过程中抗体识别率较高的有机磷农药——对硫磷选定为抑制标准物,建立对硫磷ic-ELISA及其标准曲线,其半抑制浓度(IC_(50))为41.78 ng/mL,检测范围(IC_(20)~IC_(80))为3.21~239.59 ng/mL;所建立的ic-ELISA与5种DPPs(蝇毒磷、喹硫磷、甲拌磷、甲基对硫磷和倍硫磷)均存在不同程度的交叉反应,其中以喹硫磷的交叉反应率最高,达19.79%。比较ic-ELISA和气相色谱法(GC)对柑橘和鲜橙样品中喹硫磷的添加回收结果发现,ic-ELISA的添加回收率为75.80%~116.12%,GC的添加回收率介于92.5%~115.00%,2种方法的检测结果一致性较好。【结论】建立的ic-ELISA经GC交叉验证准确性较高,可用于快速检测农产品中的喹硫磷残留。 展开更多
关键词 二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs) 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附分析法(ic-ELISA) 气相色谱法(GC) 农药残留检测
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间接酶联免疫吸附分析法对环境水样中左旋18-甲基炔诺酮含量的测定 被引量：2
19
作者 吴亚飞 邓安平 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期645-648,共4页
本文报道测定环境水样中的左旋18-甲基炔诺酮(NG)的间接酶联免疫吸附分析法(ELISA)。通过对左旋18-甲基炔诺酮的化学修饰,将左旋18-甲基炔诺酮与蛋白质载体结合,制成完全免疫抗原,经过多次动物免疫得到了兔抗左旋18-甲基炔诺酮抗体,在... 本文报道测定环境水样中的左旋18-甲基炔诺酮(NG)的间接酶联免疫吸附分析法(ELISA)。通过对左旋18-甲基炔诺酮的化学修饰,将左旋18-甲基炔诺酮与蛋白质载体结合,制成完全免疫抗原,经过多次动物免疫得到了兔抗左旋18-甲基炔诺酮抗体,在优化实验条件的基础上,建立了灵敏度高、特异性强、简便、稳定的测定水样中左旋18-甲基炔诺酮的酶联免疫吸附分析方法。IC50值(标准曲线中吸光度抑制至最大吸光度值的50%时所对应的待测物浓度)在1μg/L^5μg/L,最低检出限为0.05μg/L^0.1μg/L。水样的加标回收率在88%~140%之间。真实环境水样中,均发现含有左旋18-甲基炔诺酮,浓度在0.3μg/L-0.6μg/L之间。 展开更多
关键词 左旋18-甲基炔诺酮 酶联免疫吸附分析法 甾体化合物 孕激素
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基于特异性对硫磷单克隆抗体的间接竞争酶联免疫吸附分析方法建立 被引量：2
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作者 吕丽兰 张娅 +7 位作者 邹承武 甘志勇 吴静娜 李乾坤 吕玉莲 易国强 温绍聪 何丽珊 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1193-1200,共8页
【目的】制备特异性识别对硫磷(PA)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA),为实现对硫磷的农残快检提供技术支持。【方法】以化合物4-(二乙氧基硫代磷酸酯基)苯甲酸为半抗原,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(... 【目的】制备特异性识别对硫磷(PA)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA),为实现对硫磷的农残快检提供技术支持。【方法】以化合物4-(二乙氧基硫代磷酸酯基)苯甲酸为半抗原,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备人工抗原,免疫7周龄Balb/c雌性小鼠,取抗血清效价最高、特异性最优小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,采用间接酶联免疫方法(i-ELISA)及ic-ELISA分别评价融合细胞株的阳性和特异性,通过有限稀释法筛选稳定分泌对硫磷抗体的单克隆细胞株。再通过棋盘格试验筛选出抗原抗体最佳工作浓度组合建立对硫磷ic-ELISA标准曲线,并基于对硫磷单克隆抗体与各结构类似物的交叉反应率,评估ic-ELISA的特异性。采购西红柿样品进行对硫磷的添加回收试验,运用气相色谱法(GC)验证ic-ELISA的准确性。【结果】成功合成对硫磷人工抗原PA-BSA和PA-OVA,经5次免疫后融合小鼠的血清效价为8×103;通过有限稀释法筛选获得灵敏度高、特异性最强的对硫磷单克隆细胞株4F11A10。以2μg/mL包被抗原PA-OVA、0.25μg/mL细胞株4F11A10分泌抗体为最佳抗原抗体工作浓度组合,建立对硫磷ic-ELISA及其标准曲线,其半抑制浓度(IC50)为50 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为2.34~300 ng/mL;所建立的对硫磷ic-ELISA与5种有机磷农药(丙溴磷、杀扑磷、倍硫磷、水胺硫磷和甲拌磷)均无交叉反应。对比ic-ELISA和GC测定西红柿样品中对硫磷的添加回收试验结果,发现ic-ELISA的添加回收率为84.86%~100.27%,GC的添加回收率为97.60%~106.40%,两种方法的检测结果一致性较好。【结论】建立的ic-ELISA可用于快速检测蔬菜、水果等农产品中的对硫磷残留。 展开更多
关键词 对硫磷 间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA) 单克隆抗体 气相色谱法(GC)
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