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用木瓜蛋白酶在两相系统中合成二肽甜味剂Aspartame 被引量:5
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作者 姚文兵 吴梧桐 +4 位作者 黄岩山 范光斌 金生浩 许激扬 严悦日 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期364-368,共5页
研究了多种因素对木瓜蛋白酶在水-有机溶剂两相反应体系中合成二肽甜味剂Aspartame能力的影响,结果表明,在本实验条件下,水与乙酸乙酯的比例为6:100~7:100之间为宜;反应最适pH为5.2;最适温度37℃;反... 研究了多种因素对木瓜蛋白酶在水-有机溶剂两相反应体系中合成二肽甜味剂Aspartame能力的影响,结果表明,在本实验条件下,水与乙酸乙酯的比例为6:100~7:100之间为宜;反应最适pH为5.2;最适温度37℃;反应时间为9h;酶用量为100~120mg/mmol底物;L-PheOMe与CBZ-L-Asp的摩尔比为1:1。 展开更多
关键词 二肽甜味剂 木瓜蛋白 酶促合成法 甜味剂
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多相酶膜反应器合成生物活性二肽 被引量:6
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作者 姜忠义 贾琦鹏 +1 位作者 刘家祺 陈洪钫 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期56-58,共3页
A multiphase enzyme membrane reactor using aqueous organic biphase instead of water phase alone as the reaction medium was employed to investigate the lipase catalyzed synthesis of bioactive dipeptides. The medium eff... A multiphase enzyme membrane reactor using aqueous organic biphase instead of water phase alone as the reaction medium was employed to investigate the lipase catalyzed synthesis of bioactive dipeptides. The medium effect on dipeptide yield was first studied. When N acetyl L phenylalanine ethyl ester(APEE) was used as a carboxyl component, the reactivity order of amino acid amides was found to be L Leu NH 2> L Val NH 2> L Ala NH 2> L Gly NH 2. The didpetide, N Ac L Phe L Leu NH 2, could be synthesized in the multiphase enzyme membrane reactor in a high yield and purity due to the simultaneous separation and reaction. 展开更多
关键词 多相膜反应器 合成 生物活性二肽 酶促合成法
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S-腺苷甲硫氨酸制备方法的研究进展 被引量:9
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作者 牛卫宁 左晓佳 +1 位作者 王丽衡 钦传光 《化学与生物工程》 CAS 2009年第3期1-5,共5页
S-腺苷甲硫氨酸(SAM)是生物体内重要的生理活性物质,参与多种生化反应,临床上被广泛用于治疗抑郁症、神经紊乱、肝病、关节炎等。综述了SAM制备方法的研究进展,述及的SAM制备方法包括化学合成法、微生物发酵法、体外酶促合成法以及全细... S-腺苷甲硫氨酸(SAM)是生物体内重要的生理活性物质,参与多种生化反应,临床上被广泛用于治疗抑郁症、神经紊乱、肝病、关节炎等。综述了SAM制备方法的研究进展,述及的SAM制备方法包括化学合成法、微生物发酵法、体外酶促合成法以及全细胞催化法。 展开更多
关键词 S-腺苷甲硫氨酸 微生物发酵 体外酶促合成法 全细胞催化
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霍乱弧菌DncV蛋白的原核表达及活性分析
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作者 韩莹倩 孔江南 +2 位作者 王江 张超 杨国宇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期868-872,共5页
DncV(VC0179)是在霍乱弧菌中发现的一种双核苷酸环化酶,其可以合成c-di-AMP、c-di-GMP和cGAMP。研究发现c-di-GMP作为胞内的第二信使,通过STING信号通路激活先天性免疫应答。为了体外制备cdi-GMP用于深入研究其功能,构建了VC0179融合che... DncV(VC0179)是在霍乱弧菌中发现的一种双核苷酸环化酶,其可以合成c-di-AMP、c-di-GMP和cGAMP。研究发现c-di-GMP作为胞内的第二信使,通过STING信号通路激活先天性免疫应答。为了体外制备cdi-GMP用于深入研究其功能,构建了VC0179融合cherry标签的丙酸诱导型表达载体,并将该重组表达载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。利用丙酸钠诱导表达后,观察菌体颜色是否为红色判断融合蛋白质的表达。超声破碎细菌后经SDS-PAGE电泳检测融合蛋白质的可溶性表达。最后通过Ni-NTA Agarose亲和纯化重组蛋白质,获得的重组蛋白质进行体外酶促反应,高效液相色谱检测合成产物c-di-GMP。结果表明:成功构建VC0179丙酸诱导型原核表达载体并获得了高纯度的VC0179重组蛋白质。该重组蛋白质通过体外酶促反应可一步生成c-di-GMP。本试验建立了稳定获得具有酶活性的VC0179重组蛋白质的方法;c-di-GMP的体外合成为其后续功能研究及大量制备奠定基础。 展开更多
关键词 VC0179 C-DI-GMP 原核表达 酶促合成法 高效液相色谱
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