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以UPS构建的酿酒酵母表达载体及GFP的表达被引量：3: 1; 作者王弘郑文岭 +2 位作者杨连生于淑娟马文丽《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第9期30-32,39,共4页; 利用通用载体质粒融合系统UPS构建出了以GFP(绿色荧光蛋白 )为报告基因的酵母表达载体 ,经PCR、电泳、测序等手段证明了构建的准确性。; 关键词 UPS 酿酒酵母通用载体质粒融合系统酵母表达载体 GFP基因绿色荧光蛋白基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

菠菜乙醇酸氧化酶编码区cDNA在酵母表达载体中的克隆被引量：1: 2; 作者刘志斌陈国广 +3 位作者李霜何娉婷韦萍欧阳平凯《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期81-84,共4页; 目的 :克隆菠菜乙醇酸氧化酶cDNA并构建其酵母表达载体。方法 :从新鲜菠菜叶子中提取总RNA ,用RT PCR法扩增菠菜乙醇酸氧化酶编码区cDNA并插入pMD T载体中进行序列测定 ;将此cDNA构建入P .Pastoris酵母表达体系中的pPIC3 5k上的SnaBI/N... 展开更多; 关键词菠菜乙醇酸氧化酶编码区 CDNA 酵母表达载体克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

皮蝇素A基因的克隆及其毕赤酵母表达载体的构建被引量：2: 3; 作者王艳华殷宏 +1 位作者罗建勋蒋锡仕《动物医学进展》 CSCD 2007年第9期15-18,共4页; 提取采自甘肃玛曲皮蝇一期幼虫的总RNA,合成cDNA,根据设计的特异引物,利用PCR技术扩增出皮蝇素A(Hypodermin A,HA)基因片段,用XhoⅠ、XbaⅠ消化,将消化后的目的基因HA纯化并回收,与经同样的酶消化后并纯化回收的载体pPICZa连接并转化,... 展开更多; 关键词皮蝇素A 克隆毕赤酵母表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

HBV preS1基因酵母表达载体的构建及表达被引量：1: 4; 作者张曦蔺淑梅 +4 位作者吴列秀陈天艳叶峰赵英仁张树林《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期265-268,共4页; 目的构建HBV preS1基因的酵母表达载体,探讨HBV preS1蛋白的功能。方法以HBVayw亚型全长质粒PCP10为模板,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增HBV preS1基因,克隆到pGEM-T载体中命名为T-preS1,以NcoⅠ和MluⅠ双酶切T-preS... 展开更多; 关键词乙肝病毒 PRES1蛋白酵母表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

以UPS构建的重组酿酒酵母表达载体及其稳定性研究被引量：1: 5; 作者王弘郑文岭 +1 位作者杨太成冼江《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期4-7,共4页; 采用通用载体质粒融合系统UPS构建了一种以绿色荧光蛋白GFP为报告基因的酿酒酵母表达载体pYES-GFP,并研究了其在重组酿酒酵母中的稳定性。实验表明,所构建的附加型质粒pYES-GFP在经近100代传代后,仍未发生丢失,具有良好的稳定性。同时,... 展开更多; 关键词酿酒酵母表达载体 GFP基因 UPS 重组酿酒酵母表达载体构建酵母表达载体稳定性研究通用载体质粒融合系统绿色荧光蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

大豆疫霉多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因毕赤酵母表达载体的构建被引量：1: 6; 作者孙文秀《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第19期8895-8897,共3页; [目的]构建大豆疫霉多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因毕赤酵母表达载体。[方法]利用PCR方法从大豆疫霉菌cDNA中扩增多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因,用限制性内切酶EcoRⅠ和NotⅠ分别酶切此基因和毕赤酵母表达载体pPIC9K,然后用T4连接酶将目的基因... 展开更多; 关键词大豆疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶毕赤酵母表达载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

啤酒酵母鲨烯合酶基因的克隆及其基因表达载体的构建: 7; 作者张建红《轻工设计》 2011年第1期10-10,共1页; 克隆啤酒酵母鲨烯合酶基因及构建其基因表达载体，为在微生物体内重建青蒿素合成途径打下基础。采用聚合酶链反应（PCR）扩增、扩增片段与T载体连接和克隆片段的序列分析；酶切并回收目的基因，反向插入酵母表达载体pGAPZαA，双酶切鉴... 展开更多; 关键词啤酒酵母鲨烯合酶基因基因复制反义酵母表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人血管内皮生长因子165在Pichia酵母中的表达被引量：2: 8; 作者刘煜吴国祥 +4 位作者赵建阳颜天华奚涛沈子龙成国祥《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期577-581,共5页; 目的 :采用基因工程方法构建基因工程菌制备人VEGF1 65蛋白。方法 :自人肿瘤组织中获取人VEGF1 65cDNA ,构建pPIC9K酵母表达载体 ,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白。结果 :SDS PAGE及Western blot结果显示目的蛋白已成功表达。... 展开更多; 关键词血管内皮生长因子165 巴氏毕赤酵母 pPIC9K酵母表达载体 SDS-PAGE WESTERN-BLOT; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组山羊FSH基因在毕赤酵母中的高效表达: 9; 作者杨欢利毛英姿丁家桐《黑龙江动物繁殖》 2011年第5期12-15,共4页; 为探讨快速高效表达山羊FSH(促卵泡素)基因的方法,将获得的FSHα,β亚基基因克隆到毕赤酵母快速表达载体pPICZαA中,然后将构建的载体线性化处理后,电击转化至毕赤酵母GS115中,经Zeocin抗生素筛选后获得阳性菌落,经甲醇诱导表达后进行SD... 展开更多; 关键词山羊 FSH基因毕赤酵母表达载体表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名以UPS构建的酿酒酵母表达载体及GFP的表达被引量：3: 1; 作者王弘郑文岭杨连生于淑娟马文丽; 机构华南理工大学食品与生物工程学院广州军区广州总医院医学实验科第一军医大学分子生物研究所; 出处《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第9期30-32,39,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目 (39880 0 4 4 ) 广州市重大科技项目 (199_2 0 0 5_0 0 1); 文摘利用通用载体质粒融合系统UPS构建出了以GFP(绿色荧光蛋白 )为报告基因的酵母表达载体 ,经PCR、电泳、测序等手段证明了构建的准确性。; 关键词 UPS 酿酒酵母通用载体质粒融合系统酵母表达载体 GFP基因绿色荧光蛋白基因表达; Keywords UPS S.cerecisiae expression vector GFP gene; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名菠菜乙醇酸氧化酶编码区cDNA在酵母表达载体中的克隆被引量：1: 2; 作者刘志斌陈国广李霜何娉婷韦萍欧阳平凯; 机构南京工业大学制药与生命科学学院南京航空航天大学材料科学与技术学院; 出处《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期81-84,共4页; 文摘目的 :克隆菠菜乙醇酸氧化酶cDNA并构建其酵母表达载体。方法 :从新鲜菠菜叶子中提取总RNA ,用RT PCR法扩增菠菜乙醇酸氧化酶编码区cDNA并插入pMD T载体中进行序列测定 ;将此cDNA构建入P .Pastoris酵母表达体系中的pPIC3 5k上的SnaBI/NotI位点 ,进行PCR筛选和限制性酶切鉴定。结果 :测序表明获得的基因为乙醇酸氧化酶cDNA序列 ,与国外文献报道的序列相比有约 98%的同源性 ;重组质粒的SnaBI/NotI双酶切证明构建正确。结论 :菠菜乙醇酸氧化酶cDNA克隆及重组质粒pPIC3 5K GO的获得。; 关键词菠菜乙醇酸氧化酶编码区 CDNA 酵母表达载体克隆; Keywords Spinach glycolate oxidase Cloning Yeast expression vector; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名皮蝇素A基因的克隆及其毕赤酵母表达载体的构建被引量：2: 3; 作者王艳华殷宏罗建勋蒋锡仕; 机构中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室西南民族大学; 出处《动物医学进展》 CSCD 2007年第9期15-18,共4页; 基金欧盟项目INCO-DEV-牛皮蝇病控制计划(ICA4-CT-2000-30036); 文摘提取采自甘肃玛曲皮蝇一期幼虫的总RNA,合成cDNA,根据设计的特异引物,利用PCR技术扩增出皮蝇素A(Hypodermin A,HA)基因片段,用XhoⅠ、XbaⅠ消化,将消化后的目的基因HA纯化并回收,与经同样的酶消化后并纯化回收的载体pPICZa连接并转化,获得重组表达质粒pPICZa-HA,经PCR、酶切、测序表明,目的基因插入位置、方向和阅读框正确。; 关键词皮蝇素A 克隆毕赤酵母表达载体; Keywords Hypodermin A Cloning Pichia pastoris expression plasmid; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学] S852.743 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HBV preS1基因酵母表达载体的构建及表达被引量：1: 4; 作者张曦蔺淑梅吴列秀陈天艳叶峰赵英仁张树林; 机构西安交通大学医学院第一附属医院传染科; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期265-268,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30571649)~~; 文摘目的构建HBV preS1基因的酵母表达载体,探讨HBV preS1蛋白的功能。方法以HBVayw亚型全长质粒PCP10为模板,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增HBV preS1基因,克隆到pGEM-T载体中命名为T-preS1,以NcoⅠ和MluⅠ双酶切T-preS1后回收与酵母表达载体pSos连接,对重组质粒进行序列测定后命名为pSos-preS1,经醋酸锂法将其转化酵母菌cdc25(a),提取酵母蛋白质进行Western免疫印迹分析。结果成功构建了HBV preS1基因的酵母表达载体,Western免疫印迹分析显示HBV preS1基因在酵母细胞中正确表达。结论pSos-preS1的构建为通过SOS招募系统(sos-recruit ment system,SRS)筛选与HBV preS1蛋白相互作用的蛋白和进一步探讨HBV preS1蛋白在HBV致病中的作用奠定了基础。; 关键词乙肝病毒 PRES1蛋白酵母表达载体; Keywords hepatitis B virus preS1 protein yeast expression vector; 分类号 R512.62 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名以UPS构建的重组酿酒酵母表达载体及其稳定性研究被引量：1: 5; 作者王弘郑文岭杨太成冼江; 机构华南农业大学食品学院广州军区广州总医院医学试验科; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期4-7,共4页; 基金国家自然科学基金(No.30400354) 广东自然科学基金(No.04300502); 文摘采用通用载体质粒融合系统UPS构建了一种以绿色荧光蛋白GFP为报告基因的酿酒酵母表达载体pYES-GFP,并研究了其在重组酿酒酵母中的稳定性。实验表明,所构建的附加型质粒pYES-GFP在经近100代传代后,仍未发生丢失,具有良好的稳定性。同时,通过实验验证了,UPS在进行表达载体构建时快速、简便、高效。; 关键词酿酒酵母表达载体 GFP基因 UPS 重组酿酒酵母表达载体构建酵母表达载体稳定性研究通用载体质粒融合系统绿色荧光蛋白; Keywords Saccharomyces cerevisiae, expression vector, GFP gene, univector plasmid fusion system（UPS）; 分类号 TS261.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大豆疫霉多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因毕赤酵母表达载体的构建被引量：1: 6; 作者孙文秀; 机构长江大学生命科学学院; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第19期8895-8897,共3页; 基金长江大学博士创新基金项目; 文摘 [目的]构建大豆疫霉多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因毕赤酵母表达载体。[方法]利用PCR方法从大豆疫霉菌cDNA中扩增多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因,用限制性内切酶EcoRⅠ和NotⅠ分别酶切此基因和毕赤酵母表达载体pPIC9K,然后用T4连接酶将目的基因克隆到pPIC9K载体中构建此载体。[结果]扩增的大豆疫霉菌pspg1基因成熟肽片段大小为1 250 bp。用基因特异性引物扩增阳性重组子,可得到大小为1 200 bp的片段。而用载体特异性引物扩增阳性重组子,可得到大小为1 200和1 700 bp两条带,多出来的400 bp恰好符合载体部分的大小。将此特异性片段PCR扩增回收,序列测定发现大豆疫霉pspg1基因已经成功地插入到表达载体中。[结论]该研究为进一步研究大豆疫霉菌pspg1基因在毕赤酵母中高效表达奠定了基础。; 关键词大豆疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶毕赤酵母表达载体构建; Keywords Phytophthora sojae Polygalaeturonase Pichia expression vector Construction; 分类号 S435.651 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名啤酒酵母鲨烯合酶基因的克隆及其基因表达载体的构建: 7; 作者张建红; 机构哈尔滨啤酒有限公司; 出处《轻工设计》 2011年第1期10-10,共1页; 文摘克隆啤酒酵母鲨烯合酶基因及构建其基因表达载体，为在微生物体内重建青蒿素合成途径打下基础。采用聚合酶链反应（PCR）扩增、扩增片段与T载体连接和克隆片段的序列分析；酶切并回收目的基因，反向插入酵母表达载体pGAPZαA，双酶切鉴定重组子。通过PCR扩增获得1335bp片段，克隆后经PCR和酶切反应进行了鉴定。初步测序结果与GenBank上已登录的酵母鲨烯合酶基因序列基本吻合，相差仅数个碱基对；将此片段反向插入酵母表达载体pGAPZαA，构建了反义酵母表达载体，并通过双酶切加以鉴定。成功克隆了啤酒酵母鲨烯合酶基因并进行了测序，同时构建了反义酵母表达载体。; 关键词啤酒酵母鲨烯合酶基因基因复制反义酵母表达载体; 分类号 TS262.5 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人血管内皮生长因子165在Pichia酵母中的表达被引量：2: 8; 作者刘煜吴国祥赵建阳颜天华奚涛沈子龙成国祥; 机构中国药科大学生物制药学院上海转基因研究中心南京军医学院; 出处《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期577-581,共5页; 基金上海市科技发展基金(No .0 2 4 31 91 0 5); 文摘目的 :采用基因工程方法构建基因工程菌制备人VEGF1 65蛋白。方法 :自人肿瘤组织中获取人VEGF1 65cDNA ,构建pPIC9K酵母表达载体 ,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白。结果 :SDS PAGE及Western blot结果显示目的蛋白已成功表达。结论 :在Pichia酵母中成功表达人VEGF1 65。; 关键词血管内皮生长因子165 巴氏毕赤酵母 pPIC9K酵母表达载体 SDS-PAGE WESTERN-BLOT; Keywords Vascular endothelial growth factor 165 Pichia pastroris pPIC9K vector SDS-PAGE Western-blot; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组山羊FSH基因在毕赤酵母中的高效表达: 9; 作者杨欢利毛英姿丁家桐; 机构浙江省台州医院生殖中心扬州大学动物科学与技术学院; 出处《黑龙江动物繁殖》 2011年第5期12-15,共4页; 文摘为探讨快速高效表达山羊FSH(促卵泡素)基因的方法,将获得的FSHα,β亚基基因克隆到毕赤酵母快速表达载体pPICZαA中,然后将构建的载体线性化处理后,电击转化至毕赤酵母GS115中,经Zeocin抗生素筛选后获得阳性菌落,经甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE和Western–blot分析。结果表明:pPICZαA载体可以快速正确的表达FSH,分子量为27KD,放射免疫法测定表达上清,表达量为20.155 mIU/mL,显著高于本实验室在细胞中的表达。; 关键词山羊 FSH基因毕赤酵母表达载体表达; Keywords goat follicular-stimulating hormone gene Pichia pastoris vector expression; 分类号 S826.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	以UPS构建的酿酒酵母表达载体及GFP的表达	王弘郑文岭杨连生于淑娟马文丽	《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2002	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	菠菜乙醇酸氧化酶编码区cDNA在酵母表达载体中的克隆	刘志斌陈国广李霜何娉婷韦萍欧阳平凯	《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	皮蝇素A基因的克隆及其毕赤酵母表达载体的构建	王艳华殷宏罗建勋蒋锡仕	《动物医学进展》 CSCD	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	HBV preS1基因酵母表达载体的构建及表达	张曦蔺淑梅吴列秀陈天艳叶峰赵英仁张树林	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	以UPS构建的重组酿酒酵母表达载体及其稳定性研究	王弘郑文岭杨太成冼江	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	大豆疫霉多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因毕赤酵母表达载体的构建	孙文秀	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	啤酒酵母鲨烯合酶基因的克隆及其基因表达载体的构建	张建红	《轻工设计》	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	重组人血管内皮生长因子165在Pichia酵母中的表达	刘煜吴国祥赵建阳颜天华奚涛沈子龙成国祥	《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
9	重组山羊FSH基因在毕赤酵母中的高效表达	杨欢利毛英姿丁家桐	《黑龙江动物繁殖》	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料