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题名Cdh1和Num1过表达菌株的构建
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作者
李巧巧
庞文颖
海力
唐仙英
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机构
中南民族大学生命科学学院武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室生物技术国家民委重点实验室
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出处
《安徽农业科学》
CAS
2019年第10期1-4,9,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(31371366,31401155)
中南民族大学基本科研业务费专项资金项目(3212018CZY18021)
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文摘
[目的]研究Cdh1和Num1之间是否存在相互作用,构建用于Cdh1和Num1免疫共沉淀试验的过表达菌株。[方法]首先在酵母菌株YWL630中用GAL1和3HA对CDH1进行标记,构建GAL1-3HA-CDH1NUM1-GFP菌株,再利用酵母四分体解离的方法使菌株YWL63和YWL490分别与该菌株杂交并进行四分体解离,从而得到所需菌株。[结果]成功构建不同基因型和配型的重组酵母菌株,其中YT52成功过表达了约340kD的Num1,YT53成功过表达了340kD的Num1和75kD的Cdh1,YT57成功过表达了75kD的Cdh1。[结论]经过同源重组的方法成功标记CDH1并诱导蛋白过表达,通过酵母四分体解离的方法构建用于Cdh1和Num1互作试验的过表达菌株,为揭示APC/C是否介导Num1的降解及机制奠定基础。
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关键词
过表达
酵母四分体解离
CDH1
Num1
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Keywords
Over-expression
Yeast tetrad dissociation
Cdh1
Num1
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分类号
Q26
[生物学—细胞生物学]
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