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利用酵母双杂合系统筛选与hERRα1相互作用的蛋白质
被引量：
5
1
作者
李渝萍
陈敏
+3 位作者
陈彬
陈健
李强
周度金
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第15期1352-1354,共3页
目的 利用酵母双杂合系统筛选乳腺组织中与人雌激素受体相关受体α1(Humanestrogenreceptorrelated receptorα1,hERRα1)相互作用的蛋白质 ,特别是新的核受体辅助活化因子 ,以进一步研究核受体辅助活化因子在乳腺癌发生、发展中如何参...
目的 利用酵母双杂合系统筛选乳腺组织中与人雌激素受体相关受体α1(Humanestrogenreceptorrelated receptorα1,hERRα1)相互作用的蛋白质 ,特别是新的核受体辅助活化因子 ,以进一步研究核受体辅助活化因子在乳腺癌发生、发展中如何参与ERR1调控基因的表达。方法 以质粒pGBT9 hERRα1 LBD为“诱饵” ,筛选人乳腺组织cDNA文库。结果 筛得有阳性相互作用的克隆共 17个。除 3种为已知核受体辅助调节因子外 ,其他为功能已经明确的蛋白 ,其中有3种与hERRα1有明显相互作用。结论 核受体辅助活化因子SRC 1,RIP14 0 。
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关键词
人雌激素受体相关受体α1
核受体辅助活化因子
酵母双杂合系统
乳腺癌
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职称材料
组蛋白脱乙酰化酶HDAC1 cDNA的克隆及其酵母表达质粒的构建
被引量：
4
2
作者
陈坚
张晓琴
傅继梁
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第4期205-208,共4页
目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并...
目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并用醋酸锂法转化酵母菌ＥＧＹ４８，在选择性培养基上观察ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１在ＥＧＹ４８中的表达情况。结果：获得的１．４５ｋｂ的ＤＮＡ编码的氨基酸序列与文献报道的ＨＤＡＣ１一致，转化的酵母菌在选择性培养基ＳＤ／Ｇａｌ／Ｒａｆ／－Ｕｒａ／－Ｈｉｓ／上培养３ｄ后，长出约１ｍｍ大小的白色菌落。结论：获得了ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ，ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１对ＥＧＹ４８没有毒性作用，也没有自身激活ＬａｃＺ功能，可作为酵母双杂合系统中的靶基因。
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关键词
组蛋白
脱乙酰化酶
酵母双杂合系统
质粒
克隆
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职称材料
hERR1/HBD酵母表达质粒的构建及初步鉴定
被引量：
2
3
作者
陈敏
李渝萍
+2 位作者
陈健
陈彬
周度金
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期51-53,共3页
目的 构建酵母双杂合系统诱饵蛋白表达质粒pGBT9 hERR1 HBD。方法 PCR扩增hERR1 HBD(激素激活域 )cDNA ,与酵母Gal4 DBD(DNA结合域 )表达质粒pGBT9重组构建融合蛋白表达质粒 ,酶切、测序鉴定后 ,用于酵母双杂合分析 ,检查其自主转录...
目的 构建酵母双杂合系统诱饵蛋白表达质粒pGBT9 hERR1 HBD。方法 PCR扩增hERR1 HBD(激素激活域 )cDNA ,与酵母Gal4 DBD(DNA结合域 )表达质粒pGBT9重组构建融合蛋白表达质粒 ,酶切、测序鉴定后 ,用于酵母双杂合分析 ,检查其自主转录激活作用及与已知hERR1辅活化子PNRC的相互作用。结果 该质粒有正确的阅读框 ,其表达蛋白不具有自主转录激活作用 ,与已知核受体辅活化子PNRC有明显的相互作用。结论 成功构建了表达质粒pGBT9 hERR1 HBD ,并证实该质粒可作为酵母双杂合系统的诱饵蛋白质粒 ,用于乳腺组织中与hERR1有相互作用的蛋白质基因的筛选。
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关键词
酵母
表达质粒
乳腺癌
雌激素受体相关受体-1
酵母双杂合系统
乳腺肿瘤
聚
合
酶链反应
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职称材料
题名
利用酵母双杂合系统筛选与hERRα1相互作用的蛋白质
被引量：
5
1
作者
李渝萍
陈敏
陈彬
陈健
李强
周度金
机构
第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第15期1352-1354,共3页
基金
国家自然科学基金"两个基地建设"专项资助项目 ( 9910 76 194 6 )
国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 70 359)
文摘
目的 利用酵母双杂合系统筛选乳腺组织中与人雌激素受体相关受体α1(Humanestrogenreceptorrelated receptorα1,hERRα1)相互作用的蛋白质 ,特别是新的核受体辅助活化因子 ,以进一步研究核受体辅助活化因子在乳腺癌发生、发展中如何参与ERR1调控基因的表达。方法 以质粒pGBT9 hERRα1 LBD为“诱饵” ,筛选人乳腺组织cDNA文库。结果 筛得有阳性相互作用的克隆共 17个。除 3种为已知核受体辅助调节因子外 ,其他为功能已经明确的蛋白 ,其中有3种与hERRα1有明显相互作用。结论 核受体辅助活化因子SRC 1,RIP14 0 。
关键词
人雌激素受体相关受体α1
核受体辅助活化因子
酵母双杂合系统
乳腺癌
Keywords
human estrogen receptor related receptor α1(hERRα1)
nuclear receptor coactivator
yeast two hybrid system
breast cancer
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
Q71 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
组蛋白脱乙酰化酶HDAC1 cDNA的克隆及其酵母表达质粒的构建
被引量：
4
2
作者
陈坚
张晓琴
傅继梁
机构
第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室
第二军医大学基础医学部微生物学教研室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第4期205-208,共4页
基金
国家自然科学基金
文摘
目的：获得ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ及构建酵母双杂合系统中的靶基因。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人Ｊｕｒｋａｔ细胞中扩增出一约１．４５ｋｂ的ＤＮＡ片段，作全自动测序，重组入ｐＬｅｘＡ载体，构建成ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１，并用醋酸锂法转化酵母菌ＥＧＹ４８，在选择性培养基上观察ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１在ＥＧＹ４８中的表达情况。结果：获得的１．４５ｋｂ的ＤＮＡ编码的氨基酸序列与文献报道的ＨＤＡＣ１一致，转化的酵母菌在选择性培养基ＳＤ／Ｇａｌ／Ｒａｆ／－Ｕｒａ／－Ｈｉｓ／上培养３ｄ后，长出约１ｍｍ大小的白色菌落。结论：获得了ＨＤＡＣ１的ｃＤＮＡ，ｐＬｅｘＡ－ＨＤＡＣ１对ＥＧＹ４８没有毒性作用，也没有自身激活ＬａｃＺ功能，可作为酵母双杂合系统中的靶基因。
关键词
组蛋白
脱乙酰化酶
酵母双杂合系统
质粒
克隆
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
hERR1/HBD酵母表达质粒的构建及初步鉴定
被引量：
2
3
作者
陈敏
李渝萍
陈健
陈彬
周度金
机构
第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期51-53,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 0 70 59)
文摘
目的 构建酵母双杂合系统诱饵蛋白表达质粒pGBT9 hERR1 HBD。方法 PCR扩增hERR1 HBD(激素激活域 )cDNA ,与酵母Gal4 DBD(DNA结合域 )表达质粒pGBT9重组构建融合蛋白表达质粒 ,酶切、测序鉴定后 ,用于酵母双杂合分析 ,检查其自主转录激活作用及与已知hERR1辅活化子PNRC的相互作用。结果 该质粒有正确的阅读框 ,其表达蛋白不具有自主转录激活作用 ,与已知核受体辅活化子PNRC有明显的相互作用。结论 成功构建了表达质粒pGBT9 hERR1 HBD ,并证实该质粒可作为酵母双杂合系统的诱饵蛋白质粒 ,用于乳腺组织中与hERR1有相互作用的蛋白质基因的筛选。
关键词
酵母
表达质粒
乳腺癌
雌激素受体相关受体-1
酵母双杂合系统
乳腺肿瘤
聚
合
酶链反应
Keywords
breast cancer
estrogen receptor related receptor 1
yeast two hybrid system
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用酵母双杂合系统筛选与hERRα1相互作用的蛋白质
李渝萍
陈敏
陈彬
陈健
李强
周度金
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
组蛋白脱乙酰化酶HDAC1 cDNA的克隆及其酵母表达质粒的构建
陈坚
张晓琴
傅继梁
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1999
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
hERR1/HBD酵母表达质粒的构建及初步鉴定
陈敏
李渝萍
陈健
陈彬
周度金
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
2
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职称材料
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