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酵母单杂交技术的原理及应用
被引量：
5
1
作者
张开慧
《宁夏农林科技》
2012年第2期31-32,共2页
酵母单杂交技术是一种体外分析DNA与蛋白质相互作用的技术。文章就酵母单杂交技术的原理、操作步骤、应用及其优缺点作了简要概括。
关键词
酵母单杂交技术
DNA
蛋白质
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职称材料
白桦E-box元件的载体构建及与BplMYB46转录因子的互作分析
被引量：
3
2
作者
王博
王莲萍
+2 位作者
杨春雨
国会艳
魏继承
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期110-115,共6页
MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族成员之一,主要参与植物次生代谢调控、激素和环境因子的应答,在植物的生长发育中起着至关重要的作用。已有研究发现,E-box的核心序列为CANNTG(N:A/G/C/T),是一类与光响应和苯丙氨酸生物合成途径...
MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族成员之一,主要参与植物次生代谢调控、激素和环境因子的应答,在植物的生长发育中起着至关重要的作用。已有研究发现,E-box的核心序列为CANNTG(N:A/G/C/T),是一类与光响应和苯丙氨酸生物合成途径相关的元件。在前期研究中,先构建顺式作用元件库,然后以转录因子为中心的酵母单杂交技术筛选发现,白桦的BplMYB46转录因子能够与核心序列为CAAATG的E-box顺式作用元件结合。但是,是否能与E-box的其他核心序列结合还不清楚。本研究将每一种E-box顺式作用元件的核心序列分别进行双链DNA的复性并连接到pHIS2载体上,然后通过酵母单杂交技术筛选与BplMYB46转录因子能够特异结合的E-box顺式作用元件。结果显示,当E-box的核心序列第3个碱基为A/T/C、第四个碱基为A/G/C时,酵母单菌落能在三缺培养基TDO/3AT上生长,表明与BplMYB46转录因子结合的E-box顺式作用元件的特异性序列为CA(A/T/C)(A/G/C)TG。为后续通过BplMYB46转录因子与E-box顺式作用元件的结合来分析BplMYB46转录因子对下游基因的调控,以及为筛选优良下游基因改良白桦的遗传性状奠定数据基础。
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关键词
BplMYB46转录因子
E-box顺式作用元件
酵母单杂交技术
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职称材料
草莓AP2/ERF转录因子AD-cDNA文库的构建
被引量：
1
3
作者
肖宇玮
张圆圆
+3 位作者
张祖瑛
李绍佳
殷学仁
陈昆松
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期777-784,共8页
【目的】探究AP2/ERF家族成员在果实成熟过程中发挥的作用。【方法】利用CTAB法提取栽培草莓(Fragaria×ananassa)品种‘越心’的果实RNA,逆转录第1链c DNA;根据AP2 DNA-binding domain序列信息利用CDART工具在Genbank中获得草莓中...
【目的】探究AP2/ERF家族成员在果实成熟过程中发挥的作用。【方法】利用CTAB法提取栽培草莓(Fragaria×ananassa)品种‘越心’的果实RNA,逆转录第1链c DNA;根据AP2 DNA-binding domain序列信息利用CDART工具在Genbank中获得草莓中所有AP2/ERF家族成员的序列信息,设计基因编码区全长引物并获得所有家族成员全长序列;将AP2/ERF家族成员基因全长序列从测序载体p GEM-T easy转移至p GADT7载体上,转化至大肠杆菌并保存菌株,构建完整的AP2/ERF AD-c DNA文库;参照YeastmakerTMyeast transformation system2(Clontech)说明书,利用Dk PDC2启动子进行文库筛选和单一验证。【结果】从数据库获得了草莓(Fragaria×ananassa)基因组120个非冗余AP2/ERF家族成员基因全长序列,通过设计的7条引物将AP2/ERF家族成员基因全长序列从测序载体p GEM-T easy转移至p GADT7载体上,转化至大肠杆菌并保存菌株,构建了完整的AP2/ERF的AD-c DNA文库。利用已报道能与Dk ERF19互作的柿子基因Dk PDC2启动子对该文库进行酵母单杂交筛选,获得了2个草莓AP2/ERF家族成员Fa ERF#83和Fa ERF#87,且证明了两者均能与Dk PDC2启动子互作。【结论】成功构建了一个只含有草莓AP2/ERF转录因子全长序列的AD-c DNA文库,用Dk PDC2启动子进行筛选获得了Dk ERF19直系同源基因Fa ERF#87和同亚家族基因Fa ERF#83,证明了该文库的有效性,也为进一步研究潜在的AP2/ERF调控提供了手段。
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关键词
草莓
AP2/ERF转录因子
CDNA文库
酵母单杂交技术
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职称材料
题名
酵母单杂交技术的原理及应用
被引量：
5
1
作者
张开慧
机构
宝鸡职业技术学院
出处
《宁夏农林科技》
2012年第2期31-32,共2页
文摘
酵母单杂交技术是一种体外分析DNA与蛋白质相互作用的技术。文章就酵母单杂交技术的原理、操作步骤、应用及其优缺点作了简要概括。
关键词
酵母单杂交技术
DNA
蛋白质
Keywords
Yeast one-hybrid method
DNA
Protein
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
白桦E-box元件的载体构建及与BplMYB46转录因子的互作分析
被引量：
3
2
作者
王博
王莲萍
杨春雨
国会艳
魏继承
机构
牡丹江师范学院生命科学与技术学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期110-115,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31700587)
黑龙江省教育厅备案项目(1352MSYYB002)
研究生科技创新项目(kjcx 2018-06mdjnu)
文摘
MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族成员之一,主要参与植物次生代谢调控、激素和环境因子的应答,在植物的生长发育中起着至关重要的作用。已有研究发现,E-box的核心序列为CANNTG(N:A/G/C/T),是一类与光响应和苯丙氨酸生物合成途径相关的元件。在前期研究中,先构建顺式作用元件库,然后以转录因子为中心的酵母单杂交技术筛选发现,白桦的BplMYB46转录因子能够与核心序列为CAAATG的E-box顺式作用元件结合。但是,是否能与E-box的其他核心序列结合还不清楚。本研究将每一种E-box顺式作用元件的核心序列分别进行双链DNA的复性并连接到pHIS2载体上,然后通过酵母单杂交技术筛选与BplMYB46转录因子能够特异结合的E-box顺式作用元件。结果显示,当E-box的核心序列第3个碱基为A/T/C、第四个碱基为A/G/C时,酵母单菌落能在三缺培养基TDO/3AT上生长,表明与BplMYB46转录因子结合的E-box顺式作用元件的特异性序列为CA(A/T/C)(A/G/C)TG。为后续通过BplMYB46转录因子与E-box顺式作用元件的结合来分析BplMYB46转录因子对下游基因的调控,以及为筛选优良下游基因改良白桦的遗传性状奠定数据基础。
关键词
BplMYB46转录因子
E-box顺式作用元件
酵母单杂交技术
Keywords
BplMYB46transcription factor
E-box cis-acting element
yeast one-hybrid
分类号
S792.153 [农业科学—林木遗传育种]
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
草莓AP2/ERF转录因子AD-cDNA文库的构建
被引量：
1
3
作者
肖宇玮
张圆圆
张祖瑛
李绍佳
殷学仁
陈昆松
机构
浙江大学农业与生物技术学院果树研究所
出处
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期777-784,共8页
基金
国家重点研发项目(2016YFD0400101)
111项目(B17039)
文摘
【目的】探究AP2/ERF家族成员在果实成熟过程中发挥的作用。【方法】利用CTAB法提取栽培草莓(Fragaria×ananassa)品种‘越心’的果实RNA,逆转录第1链c DNA;根据AP2 DNA-binding domain序列信息利用CDART工具在Genbank中获得草莓中所有AP2/ERF家族成员的序列信息,设计基因编码区全长引物并获得所有家族成员全长序列;将AP2/ERF家族成员基因全长序列从测序载体p GEM-T easy转移至p GADT7载体上,转化至大肠杆菌并保存菌株,构建完整的AP2/ERF AD-c DNA文库;参照YeastmakerTMyeast transformation system2(Clontech)说明书,利用Dk PDC2启动子进行文库筛选和单一验证。【结果】从数据库获得了草莓(Fragaria×ananassa)基因组120个非冗余AP2/ERF家族成员基因全长序列,通过设计的7条引物将AP2/ERF家族成员基因全长序列从测序载体p GEM-T easy转移至p GADT7载体上,转化至大肠杆菌并保存菌株,构建了完整的AP2/ERF的AD-c DNA文库。利用已报道能与Dk ERF19互作的柿子基因Dk PDC2启动子对该文库进行酵母单杂交筛选,获得了2个草莓AP2/ERF家族成员Fa ERF#83和Fa ERF#87,且证明了两者均能与Dk PDC2启动子互作。【结论】成功构建了一个只含有草莓AP2/ERF转录因子全长序列的AD-c DNA文库,用Dk PDC2启动子进行筛选获得了Dk ERF19直系同源基因Fa ERF#87和同亚家族基因Fa ERF#83,证明了该文库的有效性,也为进一步研究潜在的AP2/ERF调控提供了手段。
关键词
草莓
AP2/ERF转录因子
CDNA文库
酵母单杂交技术
Keywords
Strawberry
AP2/ERF transcription factor
cDNA library
Yeast one-hybrid
分类号
S668.4 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
酵母单杂交技术的原理及应用
张开慧
《宁夏农林科技》
2012
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
白桦E-box元件的载体构建及与BplMYB46转录因子的互作分析
王博
王莲萍
杨春雨
国会艳
魏继承
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
草莓AP2/ERF转录因子AD-cDNA文库的构建
肖宇玮
张圆圆
张祖瑛
李绍佳
殷学仁
陈昆松
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
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