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沉默酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1基因对人前列腺癌细胞生物学行为的影响 被引量：1
1
作者 陈心 徐细明 +3 位作者 甘园园 曹德东 伍龙 陈志远 《中国医药导报》 CAS 2017年第22期4-7,15,共5页
目的观察ACAT1在人前列腺癌PC-3细胞增殖和侵袭迁移中的作用。方法体外培养人前列腺癌PC-3细胞,通过脂质体Hiper Fect将ACAT1 siRNA转染至人前列腺癌PC-3细胞中沉默酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因的表达,Real-time PCR验证沉... 目的观察ACAT1在人前列腺癌PC-3细胞增殖和侵袭迁移中的作用。方法体外培养人前列腺癌PC-3细胞,通过脂质体Hiper Fect将ACAT1 siRNA转染至人前列腺癌PC-3细胞中沉默酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因的表达,Real-time PCR验证沉默的效果。利用CFSE染色法分别检测加入无血清1640培养基的空白对照组、加入阴性-siRNA-Hiper Fect复合物的阴性对照组和加入ACAT1 siRNA-Hiper Fect复合物的ACAT1组人前列腺癌PC-3细胞的增殖率,比较ACAT1基因沉默前后细胞增殖的变化。利用Transwell小室法检测ACAT1基因沉默前后人前列腺癌PC-3细胞侵袭和迁移能力的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,ACAT1 siRNA组转染48 h ACAT1 mRNA表达水平最低(P<0.05)。与阴性对照组和空白对照组比较,ACAT1siRNA组细胞增殖率下降,侵袭和迁移实验中穿膜细胞数减少,差异有高度统计学意义(P<0.01)。阴性对照组与空白对照组比较,细胞增殖率、侵袭和迁移能力无变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ACAT1基因干扰能抑制PC-3细胞的增殖,减弱侵袭迁移能力,为探寻前列腺癌发病机制和治疗提供新的思路和手段。 展开更多
关键词 前列腺癌 酰基辅酶a-胆固醇酰基转移酶1 小干扰RNA 生物学行为
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胰岛素抵抗对巨噬细胞ACAT-1表达的影响及罗格列酮的干预作用 被引量：2
2
作者 陈心 成蓓 +2 位作者 王洪星 何平 葛晶 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第2期21-23,共3页
目的进一步探讨动脉粥样硬化的发生机制及罗格列酮的干预作用。及过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)高亲和性配体罗格列酮的干预作用。方法体外培养人单核细胞系THP-1细胞,诱导分化为巨噬细胞,分别采用高浓度胰岛素、葡萄糖和不... 目的进一步探讨动脉粥样硬化的发生机制及罗格列酮的干预作用。及过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)高亲和性配体罗格列酮的干预作用。方法体外培养人单核细胞系THP-1细胞,诱导分化为巨噬细胞,分别采用高浓度胰岛素、葡萄糖和不同浓度罗格列酮进行干预,实时定量PCR法检测巨噬细胞人巨噬细胞酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)mRNA表达水平,Western blot检测其蛋白表达。结果在高浓度胰岛素和葡萄糖状态下巨噬细胞ACAT-1m RNA和蛋白表达明显增加(P<0.01);罗格列酮可明显下调其表达且呈浓度依赖性。结论胰岛素抵抗状态下巨噬细胞ACAT-1表达水平升高,罗格列酮可明显下调其表达;此可能为其发挥抗动脉粥样硬化作用的机制之一。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ 酰基辅酶a胆固醇酰基转移酶-1 胰岛素抵抗
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干扰素-γ对单核—巨噬细胞源性泡沫细胞ACAT-1表达的影响 被引量：8
3
作者 柯丽 成蓓 +2 位作者 余其振 何平 白智峰 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第10期14-15,共2页
目的观察干扰素-γ对THP-1、THP-1源性巨噬细胞泡沫细胞酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法将THP-1细胞与PMA孵育48小时使之分化为巨噬细胞,继以100mg/mlOx-LDL处理24小时使之形成泡沫细胞。将THP-1细胞、巨噬细胞、... 目的观察干扰素-γ对THP-1、THP-1源性巨噬细胞泡沫细胞酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法将THP-1细胞与PMA孵育48小时使之分化为巨噬细胞,继以100mg/mlOx-LDL处理24小时使之形成泡沫细胞。将THP-1细胞、巨噬细胞、泡沫细胞分别用300U/mlIFN-γ干预24小时。RT-PCR检测ACAT-1mRNA水平,WesternBlot检测其蛋白表达。结果THP-1细胞分化成巨噬细胞以及形成泡沫细胞时ACAT-1mRNA及蛋白含量增加(P<0.05),而后两种细胞之间无显著性差异。与各自的对照组相比,经IFN-γ作用后三种细胞ACAT-1mRNA及蛋白表达均增强(P<0.05)。结论IFN-γ诱导单核、巨噬细胞、泡沫细胞ACAT-1的mRNA及蛋白表达,这可能是其促进动脉粥样硬化的机制之一。 展开更多
关键词 泡沫细胞 干扰素-Γ 细胞源性 单核 THP-1细胞 胆固醇酰基转移酶 RT-PCR检测 IFN-γ Western 巨噬细胞 mRNA水平 蛋白表达 BLOT检测 动脉粥样硬化 酰基辅酶a OxLDL 显著性差异 细胞分化 蛋白含量 种细胞 PMA 对照组
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白介素-1对单核细胞向泡沫细胞分化过程中ACAT-1蛋白表达和活性的影响 被引量：1
4
作者 王庸晋 王治平 +1 位作者 魏武 周胜华 《中国心血管病研究》 CAS 2011年第9期691-695,共5页
目的探讨白介素-1（IL-1）对单核细胞向泡沫细胞分化过程中脂酰辅酶A-胆固醇酰基转移酶-1（ACAT-1）蛋白表达和活性的影响。方法200nmol／L佛波酯（PMA）诱导THP-1单核细胞48h使其转化为巨噬细胞，流式细胞术检测CDl4的表达；巨噬细胞与... 目的探讨白介素-1（IL-1）对单核细胞向泡沫细胞分化过程中脂酰辅酶A-胆固醇酰基转移酶-1（ACAT-1）蛋白表达和活性的影响。方法200nmol／L佛波酯（PMA）诱导THP-1单核细胞48h使其转化为巨噬细胞，流式细胞术检测CDl4的表达；巨噬细胞与80mg／L氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）共孵育24h，使之向泡沫细胞分化，油红O染色观察细胞质内脂质沉积；Westernblot检测各组细胞（单核细胞组、巨噬细胞组、泡沫细胞组、泡沫细胞＋IL-1组、泡沫细胞＋IL-1／Anti-ILl组）ACAT-l的蛋白表达，液相闪烁计数法检测ACAT-1的酶活性。结果单核细胞株THP-1与200nM的PMA共孵育48h后，分化为巨噬细胞，CDld阳性表达率为85．7％；巨噬细胞与Ox-LDL共孵育24h后，油红O染色胞浆内可见大量吞噬的脂质小滴。与单核细胞组相比，巨噬细胞组、泡沫细胞组和泡沫细胞＋IL-1组ACAT-1蛋白表达上调，活性升高（P〈0．05），泡沫细胞＋IL-1／Anti-ILl组蛋白表达上调及活性升高不明显（P〉0．05）。结论IL-1对单核细胞向泡沫细胞分化过程中ACAT-1蛋白表达及酶活性有上调作用，IL-1单克隆抗体可以拮抗这种效应。 展开更多
关键词 白介素-1 巨噬细胞 泡沫细胞 脂酰辅酶a 胆固醇酰基转移酶-1
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PPAR-γ对巨噬细胞ACAT-1表达的影响及可能的信号途径 被引量：1
5
作者 陈心 成蓓 +2 位作者 王洪星 何平 葛晶 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第27期7-9,共3页
目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)对巨噬细胞中酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达影响及可能参与的信号途径。方法在RPMI1640培养基中培养人单核细胞(THP-1),加入佛波酯(PMA)培养48h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化... 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)对巨噬细胞中酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达影响及可能参与的信号途径。方法在RPMI1640培养基中培养人单核细胞(THP-1),加入佛波酯(PMA)培养48h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化。在高浓度胰岛素状态下,分别加入PPAR-γ的配体罗格列酮和胰岛素信号途径阻滞剂[细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD98059、p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580和c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125],采用Western-blot法检测巨噬细胞ACAT-1蛋白水平,实时定量PCR法检测ACAT-1mRNA水平。结果在高胰岛素状态下,给予罗格列酮干预后ACAT-1mRNA和蛋白表达均降低;再加入SB203580后ACAT-1mRNA和蛋白表达较加入罗格列酮时均增加。结论p38MAPK途径参与了PPAR-γ抑制ACAT-1的表达,并发挥抗动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活型受体-γ 胆固醇酰基转移酶-1 信号途径
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参苓白术丸对原发性高胆固醇血症豚鼠模型的影响 被引量：1
6
作者 张雨田 王红 +3 位作者 屈子怡 杨朝帅 冯彬彬 王悦豪 《中国医药导报》 CAS 2021年第30期33-37,共5页
目的探讨参苓白术丸对原发性高胆固醇血症豚鼠模型的影响。方法60只雄性Hartley豚鼠,分为对照组,模型组,依折麦布组,参苓白术丸高、中、低剂量组,每组10只。对照组给予普通饲料,其余组均给予高脂饲料,建立外源性高胆固醇血症豚鼠模型。... 目的探讨参苓白术丸对原发性高胆固醇血症豚鼠模型的影响。方法60只雄性Hartley豚鼠,分为对照组,模型组,依折麦布组,参苓白术丸高、中、低剂量组,每组10只。对照组给予普通饲料,其余组均给予高脂饲料,建立外源性高胆固醇血症豚鼠模型。造模4周后开始药物灌胃干预,依折麦布组予依折麦布混悬液1 mg/kg,参苓白术丸高、中、低剂量组分别予17.00、8.50、0.85 g/kg,模型组和对照组给予等体积生理盐水。比较各血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及胆汁TC、总胆汁酸水平;观察各组肝脏组织形态学变化;同时记录各组小肠组织尼曼-匹克C1型类蛋白1(NPC1L1)、三磷酸腺苷结合盒转运体G5(ABCG5)、胆固醇酰基转移酶2(ACAT2)及肝脏X受体α(LXRα)的表达水平。结果与对照组比较,模型组血清TG、TC、LDL-C及胆汁TG、总胆汁酸水平均升高(P<0.05)。与模型组比较,参苓白术丸低剂量组血清TG水平降低(P<0.05);参苓白术丸中剂量组血清TC、LDL-C水平均降低,HDL-C水平升高(P<0.05);参苓白术丸高剂量组血清TG、TC、LDL-C水平均降低,HDL-C水平升高(P<0.05);参苓白术丸中、高剂量组胆汁TC、总胆汁酸水平均降低(P<0.05)。对照组肝脏组织基本正常;模型组可见弥漫性大泡性脂肪变,肝组织内广泛的肝细胞气球样变、少量炎症细胞浸润和点状细胞坏死;参苓白术丸中、高剂量组脂肪变性及肝细胞气球样变显著减轻;参苓白术丸低剂量组肝细胞脂肪样变性改善较模型组不明显。与对照组比较,模型组NPC1L1、ACAT2、ABCG5、LXRα水平均升高(P<0.05)。与模型组比较,参苓白术丸中、高剂量组NPC1L1、ACAT2、LXRα水平均降低,ABCG5水平均升高(P<0.05)。结论参苓白术丸中、高剂量可以缓解高胆固醇饮食诱导的高脂血症,减轻肝细胞脂肪变性,抑制原发性高胆固醇血症豚鼠模型小肠组织中NPC1L1、ACAT2及LXRα的表达,上调ABCG5的表达。 展开更多
关键词 参苓白术丸 原发性高胆固醇血症 尼曼-匹克C1型类蛋白1 胆固醇酰基转移酶2 三磷酸腺苷结合盒转运体G5
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人ACAT1基因P1启动子的克隆及意义
7
作者 葛晶 成蓓 +3 位作者 文晖 何平 柯丽 余其振 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第2期4-6,共3页
目的克隆人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT 1)基因P 1启动子。方法应用PCR方法从人单核细胞系THP-1扩增分离出ACAT 1基因P 1启动子全长片段,将PCR产物克隆入T载体,并对所获得的序列进行生物信息学分析。结果经琼脂糖凝胶电泳及直接... 目的克隆人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT 1)基因P 1启动子。方法应用PCR方法从人单核细胞系THP-1扩增分离出ACAT 1基因P 1启动子全长片段,将PCR产物克隆入T载体,并对所获得的序列进行生物信息学分析。结果经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定,克隆的ACAT 1基因P 1启动子片段碱基序列与G enB ank数据库一致,未发现突变。结论人ACAT 1基因P 1启动子克隆成功,此为动脉粥样硬化(A S)过程中ACAT 1基因转录调控机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 酰基辅酶a:胆固醇酰基转移酶1 基因 启动子区(遗传学) 克隆
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同型半胱氨酸对高密度脂蛋白逆转运和抗氧化功能的影响 被引量：5
8
作者 钟建开 谭迎 +3 位作者 陈盈文 王航鹰 陈玉映 吴焱贤 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2016年第3期233-236,共4页
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对HDL逆转运和抗炎抗氧化功能的影响。方法选择顺德第一人民医院住院患者120例,根据血Hcy水平,将患者分为正常对照组60例和高Hcy组60例,记录患者的人口学特点和检测血液生化指标,同时测定患者血卵磷脂胆固醇... 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对HDL逆转运和抗炎抗氧化功能的影响。方法选择顺德第一人民医院住院患者120例,根据血Hcy水平,将患者分为正常对照组60例和高Hcy组60例,记录患者的人口学特点和检测血液生化指标,同时测定患者血卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)和胆固醇酯转运蛋白(CETP)水平,患者HDL颗粒中的对氧磷酶1(PON1)、髓过氧化物酶(MPO)活性以及脂质过氧化物(LPO)含量。结果与正常对照组比较,高Hcy组患者血LCAT[(925.6±127.0)U/mg vs(1015.3±131.1)U/mg,P=0.000]、CETP[(26.3±4.1)μg/mg vs(34.6±5.0)μg/mg,P=0.000]和PON1[(213.4±71.4)U/ml vs(416.5±85.1)U/ml,P=0.000]活性显著降低,MPO[(4.8±1.9)U/L vs(3.3±1.5)U/L,P=0.000]活性和LPO[(0.93±0.08)U/L vs(0.83±0.09)U/L,P=0.000]含量显著升高。结论高Hcy通过降低血LCAT、CETP浓度,降低HDL胆固醇逆转运功能,并通过降低HDL颗粒中PON1活性,升高HDL颗粒中MPO活性,导致HDL颗粒中LPO含量升高,从而降低HDL的抗炎抗氧化功能。 展开更多
关键词 高半胱氨酸 脂蛋白类 HDL 磷脂酰胆碱-甾醇O-酰基转移酶 胆固醇酯转运蛋白质类 过氧化物酶
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雌激素对高糖诱导的HepG2细胞ACAT2表达的影响
9
作者 张闻宇 张素华 +1 位作者 李蓉 龚莉琳 《山东医药》 CAS 2012年第31期30-31,共2页
目的探讨雌激素对高糖诱导的酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶2(ACAT2)在HepG2细胞中表达的影响。方法将培养好的HepG2细胞以0.7×106/L接种于六孔培养板内,加入无血清培养基继续培养24 h,将细胞分为四组,对照组加入正常培养基,甘露醇组... 目的探讨雌激素对高糖诱导的酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶2(ACAT2)在HepG2细胞中表达的影响。方法将培养好的HepG2细胞以0.7×106/L接种于六孔培养板内,加入无血清培养基继续培养24 h,将细胞分为四组,对照组加入正常培养基,甘露醇组计入终浓度为25 mmol/L甘露醇溶液,高糖组加入的葡萄糖溶液培养基孵育12 h;雌激素组用含总浓度25 mmol/L葡萄糖的培养基与细胞孵育4 h后,再加入终浓度为1×10-8mol/L的17β-雌二醇孵育8 h。RT-PCR和Western blot法检测各组ACAT2的表达水平。结果高糖组HepG2细胞ACAT2的表达明显高于对照组和雌激素组(P<0.001),雌激素组与对照组、甘露醇组比较无统计学意义。结论雌激素可下调高糖诱导的ACAT2表达。 展开更多
关键词 酰基辅酶a 胆固醇酰基转移酶2 雌激素 高糖
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