利用改进的酚-氯仿法从猪毛囊中提取基因组DNA 被引量：19

1

作者 王继英 俞英 +2 位作者 冯利霞 王怀中 张勤 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期752-756,共5页

为提高从猪毛囊组织中提取基因组DNA的效率，文章在借鉴从其他组织提取基因组DNA方法的基础上，对经典的酚-氯仿法的反应体系和步骤进行了改进。利用改进的酚-氯仿抽提法，从猪的毛囊组织中快速、高效地提取了高质量基因组DNA。利用该... 为提高从猪毛囊组织中提取基因组DNA的效率，文章在借鉴从其他组织提取基因组DNA方法的基础上，对经典的酚-氯仿法的反应体系和步骤进行了改进。利用改进的酚-氯仿抽提法，从猪的毛囊组织中快速、高效地提取了高质量基因组DNA。利用该方法从1-6根猪毛囊中提取的基因组DNA可满足基于PCR技术的相关分子生物学实验需要。 展开更多

关键词 猪毛囊组织 基因组DNA 酚-氯仿法

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运用酚-氯仿法结合磁珠法提取蝇蛆体内人类DNA 被引量：4

2

作者 王翔 蔡继峰 +3 位作者 钟鸣 李剑波 张金国 兰玲梅 《法医学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期421-424,共4页

目的建立运用酚-氯仿法结合磁珠法从蝇蛆嗉囊内提取人类DNA的方法,从而提高STR分型检验的灵敏度。方法采用酚-氯仿法对蝇蛆嗉囊内容物中的人类DNA进行提取,提取产物经磁珠法纯化浓缩后用QuantifilerTM人类DNA定量试剂盒在7500型实时荧... 目的建立运用酚-氯仿法结合磁珠法从蝇蛆嗉囊内提取人类DNA的方法,从而提高STR分型检验的灵敏度。方法采用酚-氯仿法对蝇蛆嗉囊内容物中的人类DNA进行提取,提取产物经磁珠法纯化浓缩后用QuantifilerTM人类DNA定量试剂盒在7500型实时荧光定量PCR仪上进行PCR定量,再用AmpF■STR IndentifilerTM试剂盒在3130XL-Avant遗传分析仪上对这些DNA样本进行STR分型。结果本研究建立的方法可增加模板DNA浓度约为单独使用酚-氯仿法的2倍。用此方法提取到的DNA浓度[(0.218±0.041)ng/μL]可获得全部16个STR分型结果。结论酚-氯仿法结合磁珠法可以有效地提高提取到的人类DNA样本STR分型检验的灵敏度,对于从事法医昆虫学方面研究的工作者有较好的实用价值。 展开更多

关键词 法医遗传学 昆虫学 提取法 酚-氯仿法 磁珠法 蝇科

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改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增检测陈旧性人骨DNA 被引量：2

3

作者 张玥 徐国昌 +3 位作者 徐凯 王友政 任甫 李红卫 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1134-1137,共4页

目的:探讨改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增对陈旧性人骨DNA检测的效果。方法:用传统和改良的酚-氯仿法对30例陈旧性人骨进行DNA提取,用Identifiler-plus试剂盒、Minifiler试剂盒和Godeneye TM 20A试剂盒行荧光标记和复合扩增,Genetic... 目的:探讨改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增对陈旧性人骨DNA检测的效果。方法:用传统和改良的酚-氯仿法对30例陈旧性人骨进行DNA提取,用Identifiler-plus试剂盒、Minifiler试剂盒和Godeneye TM 20A试剂盒行荧光标记和复合扩增,Genetic Analyzer软件对基因位点进行检测和分析。结果:改良酚-氯仿法提取及3种试剂盒对陈旧性人骨DNA基因位点检出469、262、588个,高于传统法的307、175、436个。结论:改良酚-氯仿法、3种试剂盒PCR复合扩增能对陈旧性人骨DNA进行有效提取和检测。 展开更多

关键词 DNA检验 酚-氯仿法 复合扩增 陈旧性骨

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用改进的酚-氯仿法提取鱼类基因组DNA效果的分析 被引量：8

4

作者 马洪雨 郭金峰 岳永生 《家畜生态学报》 2006年第2期85-87,共3页

提取鱼类基因组DNA的研究报道并不多见,效果也各有差异。本文以泰山螭霖鱼、东平湖鲤鱼、东平湖鲫鱼为材料,采用改进的酚-氯仿法提取基因组DNA,并进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明,本方法提取... 提取鱼类基因组DNA的研究报道并不多见,效果也各有差异。本文以泰山螭霖鱼、东平湖鲤鱼、东平湖鲫鱼为材料,采用改进的酚-氯仿法提取基因组DNA,并进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明,本方法提取的基因组DNA浓度在0.9μg/μL^3.25μg/μL之间,A260/A280比值在1.79~1.87之间,电泳条带整齐明亮,适合微卫星PCR扩增,且整个操作过程使用试剂较少,简单易行。 展开更多

关键词 鱼类 基因组DNA 酚-氯仿法

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不同提取方法和不同组织对中华绒螯蟹DNA提取效果的比较研究 被引量：4

5

作者 刘皓 刘青 +4 位作者 吴旭干 何杰 董鹏生 李彤 成永旭 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期147-150,共4页

为了优化中华绒螯蟹基因组DNA提取方法,采用酚-氯仿法和试剂盒法分别对中华绒螯蟹的鳃、肌肉、血淋巴液和刚毛4种组织进行DNA提取,并从纯度、浓度、片段完整性及微卫星标记PCR扩增效果4个方面评价提取DNA的质量。结果显示:酚-氯仿法提取... 为了优化中华绒螯蟹基因组DNA提取方法,采用酚-氯仿法和试剂盒法分别对中华绒螯蟹的鳃、肌肉、血淋巴液和刚毛4种组织进行DNA提取,并从纯度、浓度、片段完整性及微卫星标记PCR扩增效果4个方面评价提取DNA的质量。结果显示:酚-氯仿法提取的DNA片段比试剂盒法提取的更完整,且DNA浓度较高,但纯度稍低;无论何种提取方法,刚毛和血淋巴液中的DNA纯度都高于鳃和肌肉,4种组织中的DNA含量依次为鳃>肌肉>刚毛>血淋巴液,未剪碎刚毛中未能提取到基因组DNA;微卫星标记的电泳结果表明,两种提取方法下4种组织中提取的DNA均可满足微卫星标记的应用要求。综上,本研究建立了一种简便的非损伤性中华绒螯蟹的采样及其DNA提取方法,这对于进行中华绒螯蟹遗传育种和分子标记研究等方面具有一定的积极作用。 展开更多

关键词 中华绒螯蟹 DNA提取 酚-氯仿法 试剂盒法 不同组织

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鲫鱼基因组DNA提取方法的探讨 被引量：29

6

作者 刘臻 鲁双庆 +1 位作者 肖调义 陈开键 《水利渔业》 北大核心 2004年第6期20-22,共3页

以鲫鱼的血液、肌肉、肝、肾为材料,采用苯酚-氯仿法、试剂盒法提取鲫鱼基因组DNA,对不同方法提取的结果进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明不同方法提取的鲫鱼基因组DNA浓度在385.8～3167.5ng/... 以鲫鱼的血液、肌肉、肝、肾为材料,采用苯酚-氯仿法、试剂盒法提取鲫鱼基因组DNA,对不同方法提取的结果进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明不同方法提取的鲫鱼基因组DNA浓度在385.8～3167.5ng/μL,A260/280比值处于1.66～1.87,所提取的DNA适合微卫星PCR扩增。因此,用苯酚-氯仿法对鲫鱼的血液、肌肉、肝、肾,用试剂盒法对鲫鱼的血液均能提取鲫鱼基因组DNA。 展开更多

关键词 血液 试剂盒法 基因组DNA 肌肉 比值 琼脂糖凝胶电泳 PCR扩增 鲫鱼 微卫星 酚-氯仿法

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一种适于PCR扩增的快速提取猪基因组DNA的碱裂解法 被引量：3

7

作者 赵金艳 刘榜 +2 位作者 王文君 张宇 张庆德 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期90-94,共5页

以大白猪背最长肌、脾脏、耳组织为材料,用碱裂解法和酚-氯仿法分别提取猪基因组DNA,用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增检测DNA的产量和质量,结果发现2种方法提取的DNA产量没有明显差异。通过猪MC4R、TEF-1基因特异引物进行PC... 以大白猪背最长肌、脾脏、耳组织为材料,用碱裂解法和酚-氯仿法分别提取猪基因组DNA,用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增检测DNA的产量和质量,结果发现2种方法提取的DNA产量没有明显差异。通过猪MC4R、TEF-1基因特异引物进行PCR扩增均能得到目的条带。碱裂解法提取的DNA原液稀释5倍、10倍后作为模板均获得了较为稳定的扩增产物。该结果表明,简单、快速、无毒的碱裂解法适用于动物定性PCR检测时DNA的提取。 展开更多

关键词 猪基因组DNA 碱裂解法 酚-氯仿法 PCR扩增

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血液中DNA提取方法的比较研究 被引量：8

8

作者 万发春 王慧 吴乃克 《山东畜牧兽医》 1999年第1期6-7,共2页

通过蛋白酶K和SDS消化破碎细胞，用酚一氧仿去除蛋白质，用异丙醇沉淀解离出DNA。此法获取的DNA与用酚抽提法、甲醇胺解聚法、异丙醇沉淀法、血细胞DNA快速提取法获得的DNA比较，分子长度较大，纯度较高，能够同时满足以噬菌作为载体的... 通过蛋白酶K和SDS消化破碎细胞，用酚一氧仿去除蛋白质，用异丙醇沉淀解离出DNA。此法获取的DNA与用酚抽提法、甲醇胺解聚法、异丙醇沉淀法、血细胞DNA快速提取法获得的DNA比较，分子长度较大，纯度较高，能够同时满足以噬菌作为载体的DNA构建基因组文库和PCR实验的要求。 展开更多

关键词 DNA 提取 琼脂糖凝胶电泳 酚-氯仿法 血液

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3种提取淡水涡虫基因组DNA方法比较

9

作者 孙健 张合彩 +1 位作者 陈广文 刘德增 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期168-171,共4页

分别用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的酚-氯仿抽提法提取活体涡虫和95%酒精固定的涡虫标本的基因组DNA.结果显示:试剂盒法提取的基因组DNA质量最好,主要表现在分子完整,几乎无降解,并且该方法所得DNA的产率也比另外两种方法的产率要高... 分别用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的酚-氯仿抽提法提取活体涡虫和95%酒精固定的涡虫标本的基因组DNA.结果显示:试剂盒法提取的基因组DNA质量最好,主要表现在分子完整,几乎无降解,并且该方法所得DNA的产率也比另外两种方法的产率要高,试剂盒法是最适合涡虫基因组DNA制备的方法.相同起始物质量条件下,3种方法从活体涡虫中提取的DNA量和纯度均高于95%酒精固定的涡虫标本,但试剂盒法提取95%酒精固定半年以上的涡虫标本,所得DNA产率较高、质量较好,可满足PCR扩增等分子生物学实验的要求. 展开更多

关键词 淡水涡虫 DNA提取 试剂盒法 改良CTAB法 改良酚-氯仿法

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DNA提取方法的比较及改良 被引量：24

10

作者 童大跃 伍新尧 +4 位作者 陆惠玲 蔡贵庆 区敬华 陈勇 曾艳红 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期411-412,共2页

用于处理 DNA检材以分离和提取 DNA的方法很多.不同的方法有不同的优缺点,其适用的分析技术也不同 [1～ 5].在法医检案的实际应用过程中经常会遇到不少的问题,如微量检材的 DNA提取,既要纯度高,又要回收率高;常用的几种方法单独进行时... 用于处理 DNA检材以分离和提取 DNA的方法很多.不同的方法有不同的优缺点,其适用的分析技术也不同 [1～ 5].在法医检案的实际应用过程中经常会遇到不少的问题,如微量检材的 DNA提取,既要纯度高,又要回收率高;常用的几种方法单独进行时则很难达到这样的要求.本文就几种常用的方法进行了改良及它们效果比较. 展开更多

关键词 DNA提取方法 酚-氯仿提取法 Chelex-100处理法 酶裂解法 序列分析

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两种DNA提取法对不同色泽肋软骨STR分型成功率的比较 被引量：6

11

作者 徐庆文 吴丹 胡伟 《法医学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期436-437,共2页

目的比较两种DNA提取法对不同色泽肋软骨的DNASTR分型结果的影响。方法利用Chelex-100法和酚-氯仿法,分别对30例不同色泽的腐败尸体肋软骨进行DNA提取,STR复合扩增,ABI3100型基因分析仪对扩增产物进行检测。结果用酚-氯仿法提取的30例... 目的比较两种DNA提取法对不同色泽肋软骨的DNASTR分型结果的影响。方法利用Chelex-100法和酚-氯仿法,分别对30例不同色泽的腐败尸体肋软骨进行DNA提取,STR复合扩增,ABI3100型基因分析仪对扩增产物进行检测。结果用酚-氯仿法提取的30例腐败尸体肋软骨,均检测到全部STR基因座的等位基因型。用Chelex-100法提取的肋软骨中,22例(11例白色、8例淡黄色、3例黄色)检测出全部STR基因座的等位基因型;7例(3例黄色、4例黄褐色)检测出部分STR基因座的等位基因型;1例黑灰色的腐败尸体肋软骨,未检测出STR基因座的等位基因型。结论根据肋软骨的色泽,选择适宜的DNA提取方法。对于颜色较深的肋软骨,用酚-氯仿法进行DNA提取有助于提高其STR基因座的检出率。 展开更多

关键词 Chelex-100法 酚-氯仿法 DNA提取 肋软骨

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紫薇叶片DNA的提取及AFLP反应体系的建立 被引量：17

12

作者 王献 柴永生 职永普 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第2期189-192,230,共5页

以紫薇叶片为材料,利用改进的酚—氯仿法,提取到了高质量的紫薇叶片DNA,并建立了20个紫薇品种和南紫薇的AFLP银染反应体系,首次在紫薇DNA提取、酶切连接、预扩增、选择性扩增等实验过程取得了成功,得到了清晰的紫薇品种的AFLP指纹图谱,... 以紫薇叶片为材料,利用改进的酚—氯仿法,提取到了高质量的紫薇叶片DNA,并建立了20个紫薇品种和南紫薇的AFLP银染反应体系,首次在紫薇DNA提取、酶切连接、预扩增、选择性扩增等实验过程取得了成功,得到了清晰的紫薇品种的AFLP指纹图谱,为紫薇基因库的建立、优良品种选育以及亲缘关系的系列研究奠定了理论基础. 展开更多

关键词 紫薇 叶片DNA 提取 AFLP 反应体系 酚-氯仿法 基因库 指纹图谱

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烧骨DNA提取与检测技术的实验研究 被引量：5

13

作者 徐国昌 侯续伟 +1 位作者 任甫 刘海东 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第1期91-95,共5页

目的探索烧骨DNA提取与检测方法。方法常压下以200℃分别对30例成人股骨焚烧1h后,生物冷冻研磨,EDTA脱钙,改良酚-氯仿提取DNA,光度计检测DNA浓度和纯度;5色荧光标记,PCR复合扩增,基因分析仪毛细管电泳,软件收集数据和分析。结果改良酚-... 目的探索烧骨DNA提取与检测方法。方法常压下以200℃分别对30例成人股骨焚烧1h后,生物冷冻研磨,EDTA脱钙,改良酚-氯仿提取DNA,光度计检测DNA浓度和纯度;5色荧光标记,PCR复合扩增,基因分析仪毛细管电泳,软件收集数据和分析。结果改良酚-氯仿法提取烧骨DNA浓度为(28.5±1.7)ng/μl,16个基因位点基本齐全,相对荧光单位(RFU)>500;传统酚-氯仿法提取烧骨DNA浓度为(4.7±0.8)ng/μl,基因位点检出不全,RFU<500。结论改良酚-氯仿法、PCR复合扩增、基因分析能对烧骨DNA进行有效提取和检测,但操作时要严格规程。 展开更多

关键词 DNA检验 酚-氯仿法 复合扩增 烧骨

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不同提取条件对DNA质量的影响 被引量：3

14

作者 张海泉 符晓棠 +1 位作者 杨国荣 郎杰 《安徽农学通报》 2006年第6期58-60,共3页

以大豆、玉米的茎、叶片为材料,采用酚-氯仿法提取DNA。通过不同提取条件获得DNA,用琼脂糖凝胶电泳检测,发现适当的水浴时间为90m in到120m in;改变离心转速对DNA质量的影响不明显。

关键词 植物DNA 提取条件 酚-氯仿法 大豆

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聚合酶链反应检测实验动物弓形虫核酸的研究 被引量：3

15

作者 丛斌 姚玉霞 +1 位作者 尤红煜 彭郁葱 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1998年第2期9-12,共4页

建立弓形虫动物模型，常规方法提取肝、脾、肾、肺等组织DNA，应用聚合酶链反应（PCR）扩增，产物经电泳检测显示199bp的弓形虫特异带谱。并以γ－32p标记克隆的弓形虫特异DNA片段为探针，对扩增产物行Southern印迹分析，结果上述4种标... 建立弓形虫动物模型，常规方法提取肝、脾、肾、肺等组织DNA，应用聚合酶链反应（PCR）扩增，产物经电泳检测显示199bp的弓形虫特异带谱。并以γ－32p标记克隆的弓形虫特异DNA片段为探针，对扩增产物行Southern印迹分析，结果上述4种标本均出现阳性杂交带，进一步证实扩增条带是弓形虫特异DNA顺序。同时用酶标法检测显示鼠血清弓形虫抗体IgG；阳性。组织病理学检查结果，肝组织损伤较严重，肝细胞肿大，肝窦消失，脾、肾、肺组织可见轻微的病理改变。另外本文介绍一种简单PCR方法[1]，取鼠尾静脉血2μl直接进行扩增，结果与酚-氯仿法提取的DNA扩增结果一致。 展开更多

关键词 弓形虫抗体 扩增产物 阳性 肝组织损伤 肝窦 酶标法 严重 聚合酶链反应检测 杂交 酚-氯仿法

全文增补中

牛支原体分离株全基因组序列测定及初步分析 被引量：10

16

作者 王艳杰 李平安 +1 位作者 吴太平 关平原 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第8期44-49,共6页

为全面了解牛支原体NM2012株的基因序列,研究其潜在的致病机制及其复制、转录、翻译过程的调控机制,采用体外大量培养,酚-氯仿法提取牛支原体NM2012株基因组DNA,并送往北京华大基因公司进行全基因组测序注释。结果显示,牛支原体NM2012... 为全面了解牛支原体NM2012株的基因序列,研究其潜在的致病机制及其复制、转录、翻译过程的调控机制,采用体外大量培养,酚-氯仿法提取牛支原体NM2012株基因组DNA,并送往北京华大基因公司进行全基因组测序注释。结果显示,牛支原体NM2012株基因组大小为993 483bp,GC含量为29.26%,测序组装后共产生3个scaffolds,24个contigs。基因组组分分析后发现,NM2012株的基因组含有885个基因,总长度为834 042bp,基因平均长度为942bp,占基因组全长的83.95%。串联重复序列共79个,总长为9 203bp,占基因组全长的0.926 3%。小卫星序列53个,微卫星序列5个,tRNA 34个,rRNA 4个。牛支原体NM2012株16SrRNA序列与支原体属致牛羊病主要菌株构建进化树进一步证实NM2012株为牛支原体,为后期进一步研究牛支原体提供依据。 展开更多

关键词 牛支原体 酚-氯仿提取法 全基因组测序

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乌鳢不同组织DNA提取研究 被引量：1

17

作者 肖畅 赵岩 肖明松 《现代农业科技》 2018年第1期223-224,共2页

[目的]研究乌鳢的肌肉、肝脏、肾脏、尾鳍、鳞片、肠、鳃盖、鳃等组织的DNA提取。[方法]利用酚-氯仿法提取乌鳢的肌肉、肝脏、肾脏、尾鳍、鳞片、肠、鳃盖、鳃等组织的DNA,采用紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳法和PCR扩增法检测提取的... [目的]研究乌鳢的肌肉、肝脏、肾脏、尾鳍、鳞片、肠、鳃盖、鳃等组织的DNA提取。[方法]利用酚-氯仿法提取乌鳢的肌肉、肝脏、肾脏、尾鳍、鳞片、肠、鳃盖、鳃等组织的DNA,采用紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳法和PCR扩增法检测提取的DNA质量。[结果]结果表明,不同组织的DNA含量不同(0.370~0.975μg/μL),其中肌肉、肝脏、肾脏和肠等组织DNA质量较高,而尾鳍、鳞片、鳃和鳃盖等组织DNA质量较差。[结论]乌鳢的肌肉、肝脏、肾脏和肠等组织提取的DNA可用于后续的分子生物学研究。 展开更多

关键词 乌鳢 DNA 酚-氯仿法

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