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草地螟酚氧化酶原基因的序列特征及表达分析
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作者 蒋苏皖 王成 +3 位作者 程云霞 张蕾 江幸福 孔海龙 《植物保护》 北大核心 2025年第3期16-22,61,共8页
酚氧化酶主要以无活性的酚氧化酶原(prophenoloxidase,PPO)形式存在,酚氧化酶活性在昆虫密度依赖的抗病性中具有重要作用。本研究克隆了草地螟Loxostege sticticalis酚氧化酶原基因LsPPO,通过RT-qPCR研究了草地螟不同发育阶段、组织,及... 酚氧化酶主要以无活性的酚氧化酶原(prophenoloxidase,PPO)形式存在,酚氧化酶活性在昆虫密度依赖的抗病性中具有重要作用。本研究克隆了草地螟Loxostege sticticalis酚氧化酶原基因LsPPO,通过RT-qPCR研究了草地螟不同发育阶段、组织,及不同密度幼虫感染球孢白僵菌前、后LsPPO转录水平的变化规律。结果表明,LsPPO cDNA全长2055 bp,编码685个氨基酸,其中包含有6个保守组氨酸组成的2个铜离子结合位点以及硫羟酸酯区域,与欧洲玉米螟Ostrinia nubilalis、亚洲玉米螟O.furnacalis的PPO氨基酸序列相似性较高。在草地螟不同发育阶段,LsPPO转录水平以预蛹期最高,其次为3、4龄幼虫,其他发育阶段较低,草地螟不同组织LsPPO转录水平以血淋巴中最高,显著高于表皮、脂肪体和中肠。不同饲养密度的草地螟幼虫LsPPO转录水平存在显著差异。感染球孢白僵菌前,以幼虫密度10头/瓶的LsPPO转录水平最低,明显低于1头/瓶和30头/瓶,但感病后以幼虫密度10头/瓶的LsPPO转录水平最高,显著高于其他2个密度。3个密度幼虫感病后的LsPPO转录水平明显高于感病前。综上所述,幼虫密度胁迫影响草地螟酚氧化酶原基因的转录水平。 展开更多
关键词 草地螟 酚氧化酶原基因 球孢白僵菌 幼虫密度
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棉铃虫酚氧化酶原基因的克隆、序列分析和组织表达 被引量:5
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作者 张小玉 徐晓宇 +2 位作者 张俊彦 王国秀 刘绪生 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期363-366,共4页
利用RT-PCR和RACE方法,获得了棉铃虫Helicoverpa armigera酚氧化酶原(prophenoloxidase,PPO)基因一个亚型cDNA的完整序列.该序列全长2 405 bp,含有一个2 097 bp的开放阅读框,编码一个由698个氨基酸残基组成的蛋白质.推导的氨基酸序列... 利用RT-PCR和RACE方法,获得了棉铃虫Helicoverpa armigera酚氧化酶原(prophenoloxidase,PPO)基因一个亚型cDNA的完整序列.该序列全长2 405 bp,含有一个2 097 bp的开放阅读框,编码一个由698个氨基酸残基组成的蛋白质.推导的氨基酸序列与其他鳞翅目昆虫PPO2基因相应氨基酸序列有较高的同源性(76%~80%),同时该序列具有铜离子结合位点等PPO基因所具有的典型特征.组织特异性表达分析表明,该基因在棉铃虫血细胞、体壁和中肠中均有表达. 展开更多
关键词 棉铃虫 酚氧化酶原基因 克隆 序列分析 组织表达
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家蚕和野桑蚕酚氧化酶原基因的组织表达差异比较 被引量:12
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作者 张永亮 朱勇 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期630-633,共4页
酚氧化酶在昆虫体液免疫反应中起着非常重要的作用。根据GenBank中登录的家蚕和野桑蚕酚氧化酶原基因cDNA序列设计特异引物,用半定量RT-PCR方法检测了家蚕和野桑蚕各组织中酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)的表达谱,发现该基因在家蚕和野桑... 酚氧化酶在昆虫体液免疫反应中起着非常重要的作用。根据GenBank中登录的家蚕和野桑蚕酚氧化酶原基因cDNA序列设计特异引物,用半定量RT-PCR方法检测了家蚕和野桑蚕各组织中酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)的表达谱,发现该基因在家蚕和野桑蚕组织中的表达差异较大,且具有明显的组织特异性。家蚕PPO1基因只在血液中被检出有很高的表达,而野桑蚕PPO1基因在血液和头部中均有表达,且在血液中的表达量最高;PPO2基因在家蚕组织中的表达量从高至低顺序为血液、脂肪体、卵巢、头部、表皮、精巢、中肠和丝腺,而在野桑蚕组织中的表达量从高至低顺序为血液、头部、中肠、表皮、精巢、卵巢和脂肪体,在丝腺中没有被检出有表达。推测可能是由于起源于野桑蚕的家蚕在长期的驯化及人工选择过程中引起了酚氧化酶原基因功能的变化。 展开更多
关键词 家蚕 野桑蚕 酚氧化酶原基因 组织表达谱 半定量RT-PCR
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野桑蚕酚氧化酶原基因cDNA的分子克隆及其特征(英文) 被引量:2
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作者 张永亮 黄重 +2 位作者 李志清 张春冬 朱勇 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期437-442,共6页
酚氧化酶在昆虫的免疫防御机制中起着重要作用。利用RT-PCR和RACE方法,克隆了野桑蚕酚氧化酶原基因,获得了其cDNA序列。该序列长2 134 bp,含有一个2 082 bp的完整开放阅读框,编码一个由693个氨基酸残基组成的蛋白质。推导的氨基酸序列... 酚氧化酶在昆虫的免疫防御机制中起着重要作用。利用RT-PCR和RACE方法,克隆了野桑蚕酚氧化酶原基因,获得了其cDNA序列。该序列长2 134 bp,含有一个2 082 bp的完整开放阅读框,编码一个由693个氨基酸残基组成的蛋白质。推导的氨基酸序列与其他鳞翅目昆虫PPO2基因相应氨基酸序列有较高的同源性,该序列具有它们的PPO基因所共有的典型特征。组织特异性表达分析表明了该基因在野桑蚕5龄幼虫的血细胞、体壁、头部、精巢、卵巢、脂肪体和中肠等组织及其不同的发育阶段均有表达。这些结果为进一步研究野桑蚕酚氧化酶原基因的功能提供了分子基础。 展开更多
关键词 野桑蚕 酚氧化酶原基因 克隆 序列分析 组织表达
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家蚕变态期酚氧化酶原基因PPO1的表达谱分析 被引量:6
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作者 张永亮 朱勇 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期741-744,共4页
酚氧化酶在昆虫的变态发育和免疫防御机制中起着非常重要的作用。利用GenBank上登录的家蚕酚氧化酶原基因PPO1的cDNA序列设计正反向特异引物,通过半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测了家蚕变态期(从5龄第3天到化蛾)雌、雄个体酚氧... 酚氧化酶在昆虫的变态发育和免疫防御机制中起着非常重要的作用。利用GenBank上登录的家蚕酚氧化酶原基因PPO1的cDNA序列设计正反向特异引物,通过半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测了家蚕变态期(从5龄第3天到化蛾)雌、雄个体酚氧化酶原基因PPO1的转录活性。家蚕雌性变态期的PPO1基因仅在5龄第4天和上蔟第0、12、24、36、48、60小时及第3、4、5、6、8、10天有表达,其中上蔟第48小时和上蔟第3天的表达量最高;而在雄性家蚕变态期,该基因仅在5龄第4、5、6天及上蔟第36、48小时与第3、5、9、10天和蛾期有表达,其中上蔟第5天的表达量最高。家蚕PPO1基因的转录表达具有时空特异性,推测其在家蚕雌、雄个体变态发育的不同时期中执行不同的功能。 展开更多
关键词 家蚕 酚氧化酶原基因 表达谱 雌雄个体 变态期
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野桑蚕酚氧化酶原基因PPO1的克隆及其特征(英文) 被引量:2
6
作者 张永亮 盛东峰 朱勇 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期256-262,共7页
利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆野桑蚕(Bombyx mandarina)酚氧化酶原基因PPO1,获得其cDNA序列;该序列长2 086bp,含有一个2 058bp的完整开放阅读框,编码一个由685个氨基酸残基组成的蛋白质;该基因推导的氨基酸序列与其他鳞翅目昆... 利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆野桑蚕(Bombyx mandarina)酚氧化酶原基因PPO1,获得其cDNA序列;该序列长2 086bp,含有一个2 058bp的完整开放阅读框,编码一个由685个氨基酸残基组成的蛋白质;该基因推导的氨基酸序列与其他鳞翅目昆虫PPO1基因相应的氨基酸序列有较高的同源性,该序列具有它们的PPO基因所共有的典型特征。RT-PCR检测分析表明该基因仅在野桑蚕的头部和血液中表达,而Northern杂交检测表明该基因仅在血液中有表达。这些结果为进一步研究该基因的功能提供了分子基础。 展开更多
关键词 野桑蚕 酚氧化酶原基因PPO1 克隆 序列分析 基因表达
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野桑蚕各发育时期酚氧化酶原基因的表达谱分析 被引量:2
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作者 张永亮 朱勇 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第7期63-65,共3页
酚氧化酶在昆虫的免疫防御机制中起着非常重要的作用。利用在GenBank上登录的野桑蚕酚氧化酶原基因的cDNA序列,设计正反向特异引物,通过半定量RT-PCR技术检测了酚氧化酶原基因PPO1及PPO2在野桑蚕不同发育时期(蚁蚕、一龄、二龄、三龄... 酚氧化酶在昆虫的免疫防御机制中起着非常重要的作用。利用在GenBank上登录的野桑蚕酚氧化酶原基因的cDNA序列,设计正反向特异引物,通过半定量RT-PCR技术检测了酚氧化酶原基因PPO1及PPO2在野桑蚕不同发育时期(蚁蚕、一龄、二龄、三龄、四龄、五龄1~6 d、预化蛹和蛹)的转录表达活性。结果表明,PPO1基因除了五龄1 d无表达及二龄表达量较低外,其他时期的表达量均较高。PPO2基因在野桑蚕的不同发育时期中均有表达,并且没有明显的差异。说明在野桑蚕的不同发育时期,PPO1基因的表达是特异性的,而PPO2基因的表达是非特异的。 展开更多
关键词 野桑蚕 发育时期 酚氧化酶原基因 表达
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家蚕胚胎各发育时期酚氧化酶原基因的转录活性分析 被引量:6
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作者 张永亮 贾永红 朱勇 《蚕学通讯》 2008年第2期1-3,共3页
酚氧化酶在昆虫体液免疫反应中起着非常重要的作用。利用GenBank上登录的家蚕酚氧化酶原基因的cDNA序列设计特异引物,通过半定量RT-PCR技术检测了家蚕胚胎各发育时期(从未受精卵到产卵后第9d)酚氧化酶原基因的转录活性,发现该基因的转... 酚氧化酶在昆虫体液免疫反应中起着非常重要的作用。利用GenBank上登录的家蚕酚氧化酶原基因的cDNA序列设计特异引物,通过半定量RT-PCR技术检测了家蚕胚胎各发育时期(从未受精卵到产卵后第9d)酚氧化酶原基因的转录活性,发现该基因的转录表达具有时空特异性。我们的试验结果为进一步研究家蚕酚氧化酶原基因的功能提供了新的线索。 展开更多
关键词 家蚕 酚氧化酶原基因 转录活性
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家蚕眠期血淋巴酚氧化酶活性变化及其基因表达分析 被引量:6
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作者 杨伟克 刘增虎 +1 位作者 钟健 董占鹏 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期391-396,共6页
【目的】探究酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)及酚氧化酶在家蚕眠期血淋巴中的变化规律,为深入解析家蚕眠期酚氧化酶的功能及其基因表达特征提供新线索。【方法】以家蚕四龄将眠、四龄眠(头壳刚开裂)0 h、四龄眠6 h、四龄眠12 h、四龄眠24 ... 【目的】探究酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)及酚氧化酶在家蚕眠期血淋巴中的变化规律,为深入解析家蚕眠期酚氧化酶的功能及其基因表达特征提供新线索。【方法】以家蚕四龄将眠、四龄眠(头壳刚开裂)0 h、四龄眠6 h、四龄眠12 h、四龄眠24 h和五龄起蚕为试验材料,采用实时荧光定量PCR检测其血淋巴PPO1和PPO2基因的表达情况,并分析血淋巴酚氧化酶活性的变化规律。【结果】家蚕血淋巴PPO1和PPO2基因在四龄将眠至五龄起蚕不同发育时期均有一定程度的表达,且两者的变化规律一致,表现为四龄将眠最高、五龄起蚕最低,总体上呈先减后增再减的变化趋势。在家蚕四龄将眠至五龄起蚕不同发育时期血淋巴酚氧化酶活性整体上也呈先降低后急剧升高再降低的变化趋势,四龄将眠为5.99 U/mg,五龄起蚕为6.02 U/mg,与酚氧化酶原基因表达模式基本一致。【结论】家蚕四龄将眠至五龄起蚕不同发育时期血淋巴酚氧化酶活性变化规律与酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)的转录表达模式基本一致,说明酚氧化酶在家蚕眠期即发挥免疫防御功能,又参与蚕体新旧表皮的更替过程。 展开更多
关键词 家蚕 氧化酶 酚氧化酶原基因 眠期 血淋巴 变化规律
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咪唑类物质KK-42提高日本沼虾成活率机制的研究 被引量:1
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作者 王文锋 关建义 +2 位作者 郭爱莲 杨洪 宁黔冀 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期162-166,共5页
目的:探讨KK-42提高感染嗜水气单孢菌后的日本沼虾成活率的机制.方法:首先将虾分为两组,分别用1.95×10^-4mol/L的KK-42溶液(处理组)或不含KK-42的溶液(对照组)浸泡1 min后取出,放置养殖水槽中饲养12h后,进行嗜水气单胞菌感... 目的:探讨KK-42提高感染嗜水气单孢菌后的日本沼虾成活率的机制.方法:首先将虾分为两组,分别用1.95×10^-4mol/L的KK-42溶液(处理组)或不含KK-42的溶液(对照组)浸泡1 min后取出,放置养殖水槽中饲养12h后,进行嗜水气单胞菌感染实验,每组又分别分为两个亚组(Challenged和Unchallenged);于感染后的不同时刻,分别测定日本沼虾的成活率、细菌清除率及proPO基因(甲壳动物重要的免疫因子)表达水平和酶活力的变化.结果:KK-42预处理可以提高感染嗜水气单孢菌后的日本沼虾的成活率及细菌清除率;KK-42处理后3、12和24 h,proPO基因表达明显提高,PO活力也于6~48 h持续升高,在24 h达到最高值,是对照组的2.3倍.嗜水气单胞菌刺激也可诱导血细胞proPO mRNA水平及血清中PO活力的增加,但对照组分别在菌注射后3h和6 h,mRNA表达突然升高,而KK-42实验组则在整个时期处于缓慢升高趋势;PO活力变化趋势和基因表达相一致.结论:KK-42可以诱导proPO mRNA表达水平及PO活力的升高,并能提高沼虾细菌清除能力,可能是KK-42提高日本沼虾成活率的分子机制之一. 展开更多
关键词 KK-42 酚氧化酶原基因 嗜水气单胞菌 表达分析
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