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琼脂糖-DEAE离子交换介质的配基密度和孔径对BSA吸附的影响 被引量:14
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作者 卢慧丽 林东强 姚善泾 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期3164-3170,共7页
离子交换色谱是蛋白质分离纯化的有效方法之一,配基密度和介质孔径是影响蛋白质吸附的关键因素。采用3种不同琼脂糖浓度的凝胶为基质,具有不同的平均孔径,分别偶联上阴离子交换配基DEAE,通过调控反应条件,包括反应温度、反应时间、碱浓... 离子交换色谱是蛋白质分离纯化的有效方法之一,配基密度和介质孔径是影响蛋白质吸附的关键因素。采用3种不同琼脂糖浓度的凝胶为基质,具有不同的平均孔径,分别偶联上阴离子交换配基DEAE,通过调控反应条件,包括反应温度、反应时间、碱浓度和DEAE浓度,得到了不同配基密度和介质孔径的系列DEAE离子交换介质。考察了牛血清白蛋白(BSA)的静态和动态吸附性能,发现随配基密度增加或介质孔径减小,BSA饱和吸附容量有所增大;对于吸附动力学,介质孔径显著影响有效扩散系数。结果表明,配基密度和介质孔径共同决定了蛋白质的吸附性能,介质孔径主导蛋白质的孔内扩散,而配基密度则影响配基-蛋白质间的相互作用。 展开更多
关键词 离子交换色谱 配基密度 介质孔径 蛋白吸附
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配基密度和介质孔径对离子交换层析分离蛋白质的影响 被引量:3
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作者 卢慧丽 林东强 +1 位作者 朱咪咪 姚善泾 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第S2期209-213,共5页
离子交换层析广泛应用于蛋白质的分离纯化,介质的配基密度和孔径是影响蛋白质分离的关键因素,但相关研究却十分缺乏。本文制备了具有不同配基密度和孔径的DEAE离子交换层析介质,以牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)为模型蛋白质,测... 离子交换层析广泛应用于蛋白质的分离纯化,介质的配基密度和孔径是影响蛋白质分离的关键因素,但相关研究却十分缺乏。本文制备了具有不同配基密度和孔径的DEAE离子交换层析介质,以牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)为模型蛋白质,测定了系列离子交换层析介质的吸附等温线,并采用Langmuir吸附等温式进行拟合,提出综合指数N,用以关联饱和吸附容量与配基密度和介质孔径间的关系。进一步对吸附动力学进行研究,采用孔扩散模型进行拟合,分析配基密度和介质孔径对孔扩散系数的影响。 展开更多
关键词 离子交换层析 配基密度 介质孔径 吸附等温线 吸附动力学
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离子交换配基密度对蛋白质吸附行为的影响
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作者 杨小雁 李雯露 +3 位作者 孔英俊 王明林 张贵锋 苏志国 《生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期39-43,68,共6页
利用双偏振极化干涉测量仪(DPI)研究了离子交换配基密度对蛋白质吸附行为的影响。用N,N-二乙基-3-氨基丙基三甲氧基硅烷(DAPTMS)对DPI芯片进行修饰,利用X射线光电子能谱表征了芯片上配基密度的差异。以溶菌酶、细胞色素C、糜蛋白酶、牛... 利用双偏振极化干涉测量仪(DPI)研究了离子交换配基密度对蛋白质吸附行为的影响。用N,N-二乙基-3-氨基丙基三甲氧基硅烷(DAPTMS)对DPI芯片进行修饰,利用X射线光电子能谱表征了芯片上配基密度的差异。以溶菌酶、细胞色素C、糜蛋白酶、牛血清白蛋白和免疫球蛋白为模型蛋白,利用DPI研究了5种蛋白质在不同配基密度界面上吸附量、吸附密度和空间形态。结果表明,随着配基密度的增加,蛋白在界面上的吸附量、吸附密度随之增加,起始吸附速率随之增大;蛋白的空间形态与配基密度密切相关,特别是免疫球蛋白,蛋白层厚度远小于其分子直径,空间形态发生变化。证明配基密度是影响界面上蛋白质吸附量、吸附密度和空间形态等吸附行为的关键因素。 展开更多
关键词 离子交换色谱 配基密度 吸附行为 双偏振极化干涉测量仪
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亲和膜配基的结构和密度对胆红素吸附的影响 被引量:14
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作者 鞠佳 聂飞 +1 位作者 段志军 贺高红 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期303-310,共8页
体内存在过量的胆红素会引起神经系统疾病,严重时危及生命,常用循环吸附法去除,但是多数胆红素与白蛋白形成复合物,难于拆分,导致血清胆红素的吸附去除率降低。以醋酸纤维素/聚乙烯基亚胺共混亲和膜(CA/PEI膜)为基质,通过戊二醛活化,引... 体内存在过量的胆红素会引起神经系统疾病,严重时危及生命,常用循环吸附法去除,但是多数胆红素与白蛋白形成复合物,难于拆分,导致血清胆红素的吸附去除率降低。以醋酸纤维素/聚乙烯基亚胺共混亲和膜(CA/PEI膜)为基质,通过戊二醛活化,引入间隔臂,固载具有一定特异性吸附的5种有机胺和8种氨基酸配基,强化血清胆红素的去除效果。研究结果表明,虽然改性膜的伯胺基含量仅为CA/PEI膜的1/3,但是因间隔臂的引入和配基特异性的增强,4种改性膜的胆红素吸附量提高了100%以上,并且提高了胆红素相对于蛋白的吸附选择性。增加胺基和疏水结构有利于胆红素的吸附;羧基不利于胆红素吸附;胆红素吸附还受到配基密度和空间位阻等诸多因素的影响。苯环等空间位阻较大的配基,不利于实际胆红素的吸附,且无法通过提高配基密度而提高其改性膜的胆红素吸附量,而含直链胺配基的己二胺(3-HMD)改性膜的胆红素吸附量随配基密度的提高而提高。 展开更多
关键词 胆红素 氨基酸 配基密度 空间位阻 亲和膜
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混合模式介质的制备及用于清除抗体中蛋白A 被引量:1
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作者 严军 钱永常 +1 位作者 姚善泾 林东强 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第7期3190-3197,共8页
针对抗体纯化过程中脱落蛋白A的清除,设计和制备了以N-苄基-N-甲基乙醇胺为功能配基的混合模式层析介质Adhere NUPharose FF,该配基兼有疏水、静电和氢键作用。采用烯丙基缩水甘油醚活化法,并对琼脂糖微球基质的活化和配基偶联条件进行... 针对抗体纯化过程中脱落蛋白A的清除,设计和制备了以N-苄基-N-甲基乙醇胺为功能配基的混合模式层析介质Adhere NUPharose FF,该配基兼有疏水、静电和氢键作用。采用烯丙基缩水甘油醚活化法,并对琼脂糖微球基质的活化和配基偶联条件进行了优化,优化后活化密度达260μmol·ml^(-1)以上,配基密度达120μmol·ml^(-1)。同时以抗体和蛋白A的混合物为研究对象来考察该介质对抗体中蛋白A的清除能力,结果表明对蛋白A的有效去除率达到83.1%,为抗体制品中蛋白A的清除提供了一种可行性方法。 展开更多
关键词 混合模式介质 制备 抗体 蛋白A 配基密度
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