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邻苯三酚自氧化法适于测定SOD活性吗? 被引量:8
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作者 廖展如 陈文学 +3 位作者 艾常春 万平 刘合力 汪明 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期59-64,共6页
用邻苯三酚自氧化法测定了Cu-ZnSOD(Superoxidedismutase,SOD)及根据天然超氧化物歧化酶活性部位结构设计、合成的一些模型化合物(themodelsofSOD,MSOD)活性.测试结果表明:Cu-ZnSOD和含Cu( )、Fe( )、Mn( 、 )的SOD模型化合物随浓度升高... 用邻苯三酚自氧化法测定了Cu-ZnSOD(Superoxidedismutase,SOD)及根据天然超氧化物歧化酶活性部位结构设计、合成的一些模型化合物(themodelsofSOD,MSOD)活性.测试结果表明:Cu-ZnSOD和含Cu( )、Fe( )、Mn( 、 )的SOD模型化合物随浓度升高,有的对邻苯三酚氧化表现为负抑制(即促进邻苯三酚氧化);另一部分化合物在较低浓度表现为抑制,较高浓度表现为负抑制的交替变化;或抑制率的无规则变化.本文对出现负抑制的内在根源进行了探讨,鉴于邻苯三酚自氧化的复杂反应机理;含Cu( )、Fe( )、Mn( 、 )SOD模型化合物的多酚氧化酶活性和Fenton反应催化活性,及MSOD中金属离子的Lewis酸性,不宜采用邻苯三酚自氧化法测定SOD活性. 展开更多
关键词 SOD 邻苯三酚自氧化法 氧化物坡化酶 多酚氧化 活性检测 酶活性 催化活性
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邻苯三酚自氧化法测定SOD活性中检测波长的优化 被引量:15
2
作者 万军 黄国钧 周霞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第14期7315-7315,7381,共2页
[目的]确定邻苯三酚自氧化法测定SOD活性的波长。[方法]采用双光束紫外可见分光光度计分别对不同时间点及时间段邻苯三酚自氧化中间产物吸光度进行测定。[结果]邻苯三酚自氧化初始中间产物的吸收度在320nm处线性好、灵敏度高。[结论]32... [目的]确定邻苯三酚自氧化法测定SOD活性的波长。[方法]采用双光束紫外可见分光光度计分别对不同时间点及时间段邻苯三酚自氧化中间产物吸光度进行测定。[结果]邻苯三酚自氧化初始中间产物的吸收度在320nm处线性好、灵敏度高。[结论]320nm可作为邻苯三酚自氧化法测定SOD活性的测定波长。 展开更多
关键词 邻苯三酚自氧化法 SOD 活性 波长
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小麦苗中超氧化物歧化酶(SOD)提取条件的优化研究 被引量:16
3
作者 丛军 徐杰 +1 位作者 任飞 张志清 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期213-218,共6页
利用磷酸盐缓冲液提取小麦苗中抗氧化组分超氧化物歧化酶(SOD),对磷酸缓冲液pH、抽提时间、热处理温度、热处理时间四个提取工艺参数进行单因素实验,并采用四因素三水平的响应曲面分析法(RSA)对上述因素的最佳水平范围进行优化,以邻苯... 利用磷酸盐缓冲液提取小麦苗中抗氧化组分超氧化物歧化酶(SOD),对磷酸缓冲液pH、抽提时间、热处理温度、热处理时间四个提取工艺参数进行单因素实验,并采用四因素三水平的响应曲面分析法(RSA)对上述因素的最佳水平范围进行优化,以邻苯三酚自氧化法对超氧化物歧化酶的活性进行测定。结果表明,在磷酸缓冲液pH8.0、抽提时间1h、热处理温度70℃、热处理时间15min的最优工艺条件下酶的活性较高,超氧化物歧化酶的活性可达587.60U/mL,此技术为小麦苗的综合利用提供了新方向。 展开更多
关键词 小麦苗 氧化物歧化酶(SOD) 邻苯三酚自氧化法 响应面
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荸荠皮提取物的抗氧化活性研究 被引量:34
4
作者 郭艳华 胡思前 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期128-130,共3页
用邻苯三酚自氧化法、Feton反应法、Na_2S_2O_3-I_2滴定法研究了荸荠皮提取物的抗氧化活性。结果表明:荸荠皮提取物的有明显的抗氧化活性,当浓度为0.10g/L时,对超氧高子自由基(O_2^-·)的抑制率为48.45%,对羟自由基(·OH)的清... 用邻苯三酚自氧化法、Feton反应法、Na_2S_2O_3-I_2滴定法研究了荸荠皮提取物的抗氧化活性。结果表明:荸荠皮提取物的有明显的抗氧化活性,当浓度为0.10g/L时,对超氧高子自由基(O_2^-·)的抑制率为48.45%,对羟自由基(·OH)的清除率为67.52%,其0.1%提取物对猪油的抗氧化效果优于0.02%的抗氧化剂BHT,且其活性具有剂量效应关系。荸荠皮提取物是一种应用前景广阔的具有抗氧化活性的天然资源。 展开更多
关键词 荸荠皮提取物 氧化活性 邻苯三酚自氧化法 Feton反应
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纳米蜂胶抗氧化活性的研究 被引量:2
5
作者 玄红专 吴玉厚 +1 位作者 桑青 周丽霞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第9期3500-3500,3515,共2页
[目的]为今后的纳米蜂胶研究提供理论依据。[方法]以纳米TiO2为主要原料,采用共混法,经过一系列的工艺,制得纳米蜂胶粉末。通过邻苯三酚自氧化法探讨纳米蜂胶对超氧阴离子(O2-)的清除效果,并将其效果与采用蜂胶醇提液和Vc的清除效果进... [目的]为今后的纳米蜂胶研究提供理论依据。[方法]以纳米TiO2为主要原料,采用共混法,经过一系列的工艺,制得纳米蜂胶粉末。通过邻苯三酚自氧化法探讨纳米蜂胶对超氧阴离子(O2-)的清除效果,并将其效果与采用蜂胶醇提液和Vc的清除效果进行比较。[结果]邻苯三酚自氧化速率为ΔA1/Δt=37.78×10-4。先分别往试管中加入蜂胶醇提液、纳米蜂胶、Vc,再加入邻苯三酚,180 s内均能够清除O2-,其中纳米蜂胶的清除效果好于Vc,而Vc又好于蜂胶醇提取液。对于这3种样品液而言,加入0.1 ml就能够很好的清除O2-。[结论]纳米蜂胶比普通蜂胶能更好地清除体内过多的自由基,降低过氧化脂质的生成,是一种新型的抗氧化产品。 展开更多
关键词 纳米二氧化 纳米蜂胶 氧化 邻苯三酚自氧化法
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超氧化物歧化酶模型化合物——N,N-二(2-苯并咪唑亚甲基)苄胺Cu(Ⅱ)配合物的晶体结构及量子化学计算 被引量:2
6
作者 孙云 马明 +2 位作者 孙美丽 张颜 刘小兰 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第4期9-12,共4页
以N,N-二(2-苯并咪唑亚甲基)苄胺(BN 3)为配体合成了Cu2(BN 3)2.(C6H5COO)2.(C lO4)2.2C2H6O的拟CuZn-SOD模型配合物,采用X射线衍射方法对在乙醇溶液中得到的蓝色透明单晶的晶体结构进行了测定,晶体学参数为:Mr=1 372.20,三斜晶系,a=1.4... 以N,N-二(2-苯并咪唑亚甲基)苄胺(BN 3)为配体合成了Cu2(BN 3)2.(C6H5COO)2.(C lO4)2.2C2H6O的拟CuZn-SOD模型配合物,采用X射线衍射方法对在乙醇溶液中得到的蓝色透明单晶的晶体结构进行了测定,晶体学参数为:Mr=1 372.20,三斜晶系,a=1.474(8)nm,b=1.526(8)nm,c=1.595(9)nm,α=76.118(13)o,β=77.917(13)o,γ=71.090(11)o,V=3.262(10)nm3,Dc=1.397M g/cm3,Z=2,F(000)=1 418,空间群为p,ī并对其进行了紫外、红外表征及元素分析.利用G 98量子化学程序包,在HF/LanL 2DZ基组水平上对配合物进行了从头计算.利用经典的邻苯三酚自氧化法对配合物的生物活性进行了测定. 展开更多
关键词 氧化物歧化酶 合成 量子化学计算 邻苯三酚自氧化法
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原花色素的类超氧化歧化酶活性的测定 被引量:1
7
作者 李梦青 王平 刘桂敏 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期58-59,68,共3页
采用邻苯三酚自氧化法测定原花色素的类SOD活性,通过实验确定了适宜的测定条件为测定波长420nm;缓冲体系为Tris-HAc;邻苯三酚浓度为10mmol/L;pH值为8 2;Tris-HAc浓度为0 05mol/L,原花色素对邻苯三酚的自氧化抑制率达到92%。
关键词 化妆品 原花色素 类SOD活性 邻苯三酚自氧化法
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茎瘤芥超氧化物歧化酶活性的研究 被引量:1
8
作者 何士敏 李吉 唐菊 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第30期18411-18413,18416,共4页
[目的]揭示茎瘤芥超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及pH、底物浓度、温度对SOD活性的影响。[方法]以茎瘤芥的瘤茎及叶片为试验材料,用邻苯三酚自氧化法分别测得它们中SOD的活性,以及pH、底物浓度、温度对其活性的影响,从而比较茎瘤芥瘤茎及... [目的]揭示茎瘤芥超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及pH、底物浓度、温度对SOD活性的影响。[方法]以茎瘤芥的瘤茎及叶片为试验材料,用邻苯三酚自氧化法分别测得它们中SOD的活性,以及pH、底物浓度、温度对其活性的影响,从而比较茎瘤芥瘤茎及叶片中SOD的含量,以及是否具有开发利用的价值。[结果]茎瘤芥瘤茎SOD的活性在200~300 U/g;茎瘤芥叶片SOD的活性在250~400U/g。说明茎瘤芥叶片SOD活性高于茎瘤芥瘤茎SOD活性。茎瘤芥SOD在pH为8.3~8.6有最大酶活性;最适温度为50℃;最适底物浓度为7 mmol/L左右。[结论]茎瘤芥叶片SOD活性高于茎瘤芥瘤茎SOD活性。研究结果为开发茎瘤芥资源提供了参考。 展开更多
关键词 氧化物歧化酶 茎瘤芥 酶活性 邻苯三酚自氧化法
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多发性骨髓瘤病人超氧化物歧化酶和脂质过氧化物的改变及意义
9
作者 张梅 邵文斌 +2 位作者 董青 洪顺儿 蒙秋锁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期217-218,共2页
血液系统恶性肿瘤中的自由基O<sub>2</sub><sup>+</sup>损伤作用不容忽视。多发性骨髓瘤(MM)是血液系统恶性肿瘤之一,其红细胞超氧化物歧化酶(SOD)及血浆脂质过氧化物(LPO)的变化尚不清楚。本文用邻苯三... 血液系统恶性肿瘤中的自由基O<sub>2</sub><sup>+</sup>损伤作用不容忽视。多发性骨髓瘤(MM)是血液系统恶性肿瘤之一,其红细胞超氧化物歧化酶(SOD)及血浆脂质过氧化物(LPO)的变化尚不清楚。本文用邻苯三酚自氧化法和改良硫代巴比妥酸(TBA)荧光微量法测定了MM初发期、缓解期及复发期病人红细胞SOD活力和血浆LPO含量的变化,其结果对判断疗效、分析疾病转归有实际意义。 展开更多
关键词 人超氧化物歧化酶 多发性骨髓瘤病 氧化 血液系统恶性肿瘤 SOD活力 邻苯三酚自氧化法 红细胞超氧化物歧化酶 人红细胞 缓解期 脂质
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瓯柑橘皮和陈皮类黄酮体外抗氧化作用 被引量:7
10
作者 马森 《畜牧兽医杂志》 2010年第3期9-10,13,共3页
从陈皮和瓯柑橘皮中提取类黄酮,试验不同剂量的类黄酮对邻苯三酚自氧化的抑制作用,比较它们体外清除O2.的效果,并和维生C进行比较。结果:维生C对邻苯三酚自氧化具有显著的抑制作用,0.1、0.2和0.3 mL的抑制率达到47.67±2.18(%)、78.... 从陈皮和瓯柑橘皮中提取类黄酮,试验不同剂量的类黄酮对邻苯三酚自氧化的抑制作用,比较它们体外清除O2.的效果,并和维生C进行比较。结果:维生C对邻苯三酚自氧化具有显著的抑制作用,0.1、0.2和0.3 mL的抑制率达到47.67±2.18(%)、78.61±1.45(%)和95.69±0.36(%);并呈现明显的量效关系(均P<0.01)。陈皮和瓯柑橘皮类黄酮对邻苯三酚自氧化的抑制率为44.32±2.85和43.17±2.53(P<0.01);两者均无量效关系,两者之间作用也无显著差异(P>0.05)。表明两种橘皮类黄酮都有一定的体外抗氧化作用,但作用小于同剂量的维生C(P<0.01)。 展开更多
关键词 邻苯三酚自氧化法 陈皮 瓯柑橘皮 类黄酮
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锰超氧化物歧化酶模型化合物的合成、表征及量化计算
11
作者 孙云 尹宇新 +1 位作者 陈克 刘小兰 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第1期10-12,共3页
以N,N,N',N'-四(2-苯并咪唑亚甲基)-1,2乙二胺(EDTB)为配体合成了Mn(EDTB)·(C6H5COO)·ClO4·3C2H6O·H2O的单核锰配合物.在乙醇溶液中得到其无色透明单晶,用X射线衍射方法对其晶体结构进行了测定.晶体学参数... 以N,N,N',N'-四(2-苯并咪唑亚甲基)-1,2乙二胺(EDTB)为配体合成了Mn(EDTB)·(C6H5COO)·ClO4·3C2H6O·H2O的单核锰配合物.在乙醇溶液中得到其无色透明单晶,用X射线衍射方法对其晶体结构进行了测定.晶体学参数为:Mr=1011.41,三斜晶系,a=1.258(4)nm,b=1.314(4)nm,c=1.592(5)nm,α=105.33(5)o,β=99.75(5)o,γ=101.25(5)o,V=2.419(10)nm3,Dc=1.388Mg/cm3,Z=2,F(000)=1060,空间群为P1.对该化合物进行了紫外、红外表征及元素分析.利用G98量子化学程序包,在HF/Lan2DZ基组水平上对配合物进行了从头计算.采用经典的邻苯三酚自氧化法对配合物的生物活性进行了测定. 展开更多
关键词 锰超氧化物歧化酶 量子化学计算 邻苯三酚自氧化法
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青海甘蒙柽柳移植木体内黄酮含量及抗氧化性研究
12
作者 王云云 梁林怀 +1 位作者 华燕青 王磊 《陕西农业科学》 2019年第11期53-56,共4页
对青海省同德县"原始野生林地"及移植地甘蒙柽柳,用50%乙醇,固液比1∶15;100 W;40℃;40 min;3次,超声波提取其黄酮,用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇进行萃取,用紫外可见分光光度计测定黄酮含量,用邻苯三酚自氧化法测定抗氧化活性... 对青海省同德县"原始野生林地"及移植地甘蒙柽柳,用50%乙醇,固液比1∶15;100 W;40℃;40 min;3次,超声波提取其黄酮,用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇进行萃取,用紫外可见分光光度计测定黄酮含量,用邻苯三酚自氧化法测定抗氧化活性,研究移植对柽柳主要化学成分黄酮的影响,旨在为柽柳保护、移植提供理论依据。结果:移植组正丁醇层黄酮高于原生组,黄酮含量均匀,个体差异小;石油醚层黄酮较原生组低,各样品黄酮含量稳定,较原生组差异小;乙酸乙酯层黄酮含量低于原生组,但移植2远高于原生组;柽柳黄酮的抗氧性较强,三种移植样品中两组的抗氧化值高于原生组。说明移植对黄酮的含量有影响,对抗氧化性影响较小。说明移植后柽柳的长势平稳,移植是成功的。 展开更多
关键词 甘蒙柽柳 原生地 移植地 黄酮 邻苯三酚自氧化法
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神香草挥发油抗氧化能力和血管舒张作用及其机制研究 被引量:5
13
作者 阿勒腾图娅 姜敏 +1 位作者 郭玉婷 张洪平 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期579-585,共7页
研究神香草挥发油(Hyssopus officinalis Essential Oil,HEO)抗氧化能力和对大鼠离体胸主动脉环血管舒张作用及其作用机制。采用2,2-二(4-叔辛基苯基)-1-苦肼基自由基(DPPH)自由基法、邻苯三酚自氧化法,以维生素C(Vc)为参照,研究HEO抗... 研究神香草挥发油(Hyssopus officinalis Essential Oil,HEO)抗氧化能力和对大鼠离体胸主动脉环血管舒张作用及其作用机制。采用2,2-二(4-叔辛基苯基)-1-苦肼基自由基(DPPH)自由基法、邻苯三酚自氧化法,以维生素C(Vc)为参照,研究HEO抗氧化活性;采用BL-420生物机能实验系统,描记血管张力变化,每组血管来自同批大鼠。结果显示HEO具有一定清除自由基能力,DPPH自由基法和邻苯三酚法测得HEO最大抑制率分别为19.24%和11.44%。在测定大鼠胸主动脉实验中,HEO各浓度(100~1100 mg/L)对去氧肾上腺素(phenylephrine,PE)预收缩的血管舒张作用明显。内皮完整组和去内皮组最大舒张效率Emax分别为96.34%±5.13%和94.39%±8.95%;HEO对多巴胺(Dopamine,Dopa)、K^+和PE诱导血管收缩的最大抑制率分别为74.38%、89.91%和95.81%;与对照组相比,HEO处理组Ca Cl2量效曲线被明显右移(P<0.01)。HEO的抗氧化性较弱且具有非内皮依赖和浓度依赖舒张血管作用,其机制可能与抑制外钙内流干扰胞质内钙离子平衡和抑制部分血管收缩物质引起的血管收缩有关。 展开更多
关键词 神香草 氧化 血管舒张 钙通道 邻苯三酚自氧化法
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啤酒酵母超氧化物歧化酶的分离及其稳定性研究
14
作者 方林求 曹应杰 周道华 《安徽大学学报(自然科学版)》 CAS 1995年第S1期163-165,共3页
啤酒酵母超氧化物歧化酶的分离及其稳定性研究方林求,曹应杰,周道华(安徽大学生物系合肥230039)超氧化物歧化酶(ECI.15.1.玉,SuPeroxidedismutase,SOD)是广泛存在于生物体内的一种超氧化... 啤酒酵母超氧化物歧化酶的分离及其稳定性研究方林求,曹应杰,周道华(安徽大学生物系合肥230039)超氧化物歧化酶(ECI.15.1.玉,SuPeroxidedismutase,SOD)是广泛存在于生物体内的一种超氧化物自由基清除剂,它在体内的活性变化... 展开更多
关键词 啤酒酵母 物歧化酶 氧化 稳定性研究 离子交换 生化药物 生物化学 邻苯三酚自氧化法 类风湿性关节炎 有机溶剂
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天然食物对自由基的作用 被引量:4
15
作者 王春雨 牛淑敏 +1 位作者 刘方 孙庆 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期21-22,共2页
提取了绿豆中的超氧化物歧化酶 (SOD) ,测定了其清除邻苯三酚自氧化法产生的O2- 自由基的作用。用乙醇沉淀法提取了银耳的多糖 ,初步认为它可能有促进自由基生成的作用。经网上检索 ,未见类似报导。
关键词 绿豆 氧化物岐化酶 银耳 多糖 自由基 邻苯三酚自氧化法 清除作用
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羊血中Cu,Zn-SOD酶活的研究 被引量:4
16
作者 赵海霞 孙文华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期130-131,135,共3页
以羊血为原料提取了Cu,Zn-SOD,利用邻苯三酚自氧化法对Cu,Zn-SOD的酶活进行了测定。实验结果表明:1L羊血中提取的Cu,Zn-SOD,经丙酮沉淀、冷冻干燥及SephadexG-100葡聚糖凝胶过滤后的酶活分别为3.2×103U/mg、4.51×103U/mg和5.8... 以羊血为原料提取了Cu,Zn-SOD,利用邻苯三酚自氧化法对Cu,Zn-SOD的酶活进行了测定。实验结果表明:1L羊血中提取的Cu,Zn-SOD,经丙酮沉淀、冷冻干燥及SephadexG-100葡聚糖凝胶过滤后的酶活分别为3.2×103U/mg、4.51×103U/mg和5.85×103U/mg。 展开更多
关键词 羊血 Cu Zn—SOD 邻苯三酚自氧化法 酶活
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不同产地大豆SOD的提取及活性比较 被引量:5
17
作者 侯赋园 杨光忠 徐婧 《绿色科技》 2017年第8期232-235,共4页
指出了超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内防御氧化损伤的一种十分重要的金属酶,作为超氧阴离子自由基的专一清除剂,在疾病的治疗、食品、化妆品、农业等方面具有广泛的应用。以大豆为实验材料,对其中的SOD酶提取流程进行了优化,然后利用改... 指出了超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内防御氧化损伤的一种十分重要的金属酶,作为超氧阴离子自由基的专一清除剂,在疾病的治疗、食品、化妆品、农业等方面具有广泛的应用。以大豆为实验材料,对其中的SOD酶提取流程进行了优化,然后利用改良的邻苯三酚自氧化法测定了所提取的SOD酶的活性,建立了最适合大豆的SOD酶提取流程。最后对九个不同产地大豆SOD酶活性进行了比较,结果显示:来自黑龙江的大豆酶活力最高,适合大规模生产。 展开更多
关键词 氧化物歧化酶 改良的邻苯三酚自氧化法 大豆
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影响泡菜发酵过程中SOD酶活性的因素研究 被引量:4
18
作者 罗潇 吕嘉栃 于鑫 《中国调味品》 CAS 北大核心 2018年第9期30-35,共6页
以保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)以及乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)为发酵菌种,以7种常见... 以保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)以及乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)为发酵菌种,以7种常见蔬菜为原料,研究了在泡菜发酵过程中影响SOD酶活的因素。并对SOD酶性质、邻苯三酚自氧化法检测SOD酶活力的最佳条件进行了初步研究。结果表明:不同发酵条件下,泡菜中SOD酶活性达到最大值的时间各不相同。25℃下,接种量、装料量改变时,在发酵时间内SOD酶活性总体呈先升高后降低的趋势,接种量为20%时,泡菜在发酵第4天SOD酶活性达到最大值95.75U/mL;装料量为60%时,在发酵第5天达到最大值101.52 U/mL;pH为5.0、温度为25℃时SOD酶活性较稳定,在检测时间内波动较小,不同浓度的Zn2+、Cu2+和Mn2+对SOD酶活性影响较小,Fe2+对SOD酶活性有较强的抑制作用;邻苯三酚自氧化法检测SOD酶活性的最佳条件为波长320nm,邻苯三酚浓度4.5mmol/L。 展开更多
关键词 益生菌 泡菜 SOD酶 邻苯三酚自氧化法 发酵
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副猪嗜血杆菌sodA基因的表达及其理化性质
19
作者 胡基雄 王席 +1 位作者 李国攀 荣俊 《湖北农业科学》 2021年第10期142-147,共6页
为探究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)sodA基因编码的超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的活性及理化性质,设计特异性引物从HPS中扩增得到目的基因sodA,利用原核表达系统对HPS SOD蛋白进行表达,通过硫酸铵分级沉淀、Sephac... 为探究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)sodA基因编码的超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的活性及理化性质,设计特异性引物从HPS中扩增得到目的基因sodA,利用原核表达系统对HPS SOD蛋白进行表达,通过硫酸铵分级沉淀、Sephacryl S-300凝胶过滤层析以及DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析等方法对表达蛋白进行了分离纯化,利用邻苯三酚自氧化法对纯化产物进行SOD酶活性检测,通过HPSEC法、火焰原子吸收分光光度法对其理化性质进行了初步探究。结果表明,表达的重组HPS SOD蛋白质为可溶性蛋白质,单亚基分子质量为26 ku,纯化后目的蛋白质纯度为95%,纯化后的重组HPS SOD蛋白质比活性为215.9 U/mg,经HPSEC法检测分析,重组HPS SOD呈多聚体,通过火焰原子吸收分光光度法检测纯化的重组HPS SOD中锰元素含量为0.71 mg/L。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis) 氧化物歧化酶 邻苯三酚自氧化法
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