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紫花苜蓿组织培养体系的建立及其遗传转化
被引量：
7
1
作者
周晓馥
吕杰
+2 位作者
苗璐
高峰
徐洪伟
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期63-68,共6页
为建立高效的农杆菌介导的紫花苜蓿的遗传转化体系,以紫花苜蓿无菌苗叶片作为外植体,用8种含有不同激素浓度梯度的培养基对其进行愈伤组织及不定芽的诱导,结果表明,M7培养基(MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L CH+0.25 mg/L KT+2mg/L琼脂)的愈伤...
为建立高效的农杆菌介导的紫花苜蓿的遗传转化体系,以紫花苜蓿无菌苗叶片作为外植体,用8种含有不同激素浓度梯度的培养基对其进行愈伤组织及不定芽的诱导,结果表明,M7培养基(MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L CH+0.25 mg/L KT+2mg/L琼脂)的愈伤组织诱导率最高,可达100%;继代表现最好,为胚性愈伤组织;同时,继续培养后可直接分化出不定芽,分化率达100%。结果表明,最适宜条件分别为卡那霉素(Kan)筛选浓度为75 mg/L;农杆菌菌液OD_(600)值为0.45-0.6之间。
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关键词
紫花苜蓿
组织培养
高频
再生
遗传
转化
农杆菌
卡那霉素OD600值
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职称材料
CRISPR/Cas9介导的高效四倍体马铃薯试管薯基因编辑体系的建立
被引量：
2
2
作者
宋倩娜
段永红
冯瑞云
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期33-41,共9页
【目的】基因编辑技术的发展使得马铃薯实现精准分子育种成为了可能,试管薯作为遗传转化的理想材料,但其诱导和转化具有基因型依赖性,建立高效且普遍适用的试管薯基因编辑技术体系可为其精准分子育种提供技术支撑。【方法】以四倍体栽...
【目的】基因编辑技术的发展使得马铃薯实现精准分子育种成为了可能,试管薯作为遗传转化的理想材料,但其诱导和转化具有基因型依赖性,建立高效且普遍适用的试管薯基因编辑技术体系可为其精准分子育种提供技术支撑。【方法】以四倍体栽培马铃薯品种青薯9号和并薯6号为材料,对试管薯诱导及其遗传转化体系进行摸索;同时,转化CRISPR/Cas9基因编辑载体进行基因组编辑。另外,利用筛选的条件对其他3个马铃薯品种进行测试。【结果】全黑暗条件下,采用2叶/段的扩繁方式,在含有10%蔗糖和5 mg/L激动素的培养基上,5个马铃薯品种均可成功诱导出试管薯,但诱导效果存在差异。青薯9号的最佳分化激素配方为0.5 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、0.2 mg/L吲哚-3-乙酸、0.2 mg/L赤霉素、2 mg/L玉米素,再生效率、转化频率和基因编辑效率分别为41.5%、51.9%和82.1%。利用上述筛选的激素配方,在其他4个四倍体马铃薯品种中均可高效地实现试管薯的遗传转化再生,其中并薯6号、Desiree和晋薯16号的编辑效率分别为63.2%、33.3%和10%。【结论】建立了5个不同基因型四倍体马铃薯高效的试管薯遗传转化再生体系,其中的4份材料成功地实现了基因组编辑。
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关键词
马铃薯
试管薯诱导
遗传转化再生
GFP
基因组编辑
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职称材料
题名
紫花苜蓿组织培养体系的建立及其遗传转化
被引量：
7
1
作者
周晓馥
吕杰
苗璐
高峰
徐洪伟
机构
吉林师范大学植物资源科学与绿色生产吉林省重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期63-68,共6页
基金
国家科技部农业科技成果转化资金项目(2010GB2B100118)
吉林省科技发展计划项目(20100803)
+1 种基金
吉林省高技术产业发展项目[吉发改高技(2009)633号]
吉林师范大学研究生创新科研计划资助项目[研创新(学)(201116号)]
文摘
为建立高效的农杆菌介导的紫花苜蓿的遗传转化体系,以紫花苜蓿无菌苗叶片作为外植体,用8种含有不同激素浓度梯度的培养基对其进行愈伤组织及不定芽的诱导,结果表明,M7培养基(MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L CH+0.25 mg/L KT+2mg/L琼脂)的愈伤组织诱导率最高,可达100%;继代表现最好,为胚性愈伤组织;同时,继续培养后可直接分化出不定芽,分化率达100%。结果表明,最适宜条件分别为卡那霉素(Kan)筛选浓度为75 mg/L;农杆菌菌液OD_(600)值为0.45-0.6之间。
关键词
紫花苜蓿
组织培养
高频
再生
遗传
转化
农杆菌
卡那霉素OD600值
Keywords
Alfalfa
Tissue culture
High frequency regeneration
Genetic transformation
Agrobacterium
Kanamycin
OD600
分类号
S541.9 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
CRISPR/Cas9介导的高效四倍体马铃薯试管薯基因编辑体系的建立
被引量：
2
2
作者
宋倩娜
段永红
冯瑞云
机构
山西农业大学农学院
山西省农业科学院作物科学研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期33-41,共9页
基金
山西省农业科学院作物科学研究所博士基金项目(ZB1102)
山西农业大学博士科研启动项目(2021BQ44)
+1 种基金
山西省博士毕业生来晋工作奖励资金科研项目(SXBYKY2021084)
山西省基础研究计划项目(202203021211272)。
文摘
【目的】基因编辑技术的发展使得马铃薯实现精准分子育种成为了可能,试管薯作为遗传转化的理想材料,但其诱导和转化具有基因型依赖性,建立高效且普遍适用的试管薯基因编辑技术体系可为其精准分子育种提供技术支撑。【方法】以四倍体栽培马铃薯品种青薯9号和并薯6号为材料,对试管薯诱导及其遗传转化体系进行摸索;同时,转化CRISPR/Cas9基因编辑载体进行基因组编辑。另外,利用筛选的条件对其他3个马铃薯品种进行测试。【结果】全黑暗条件下,采用2叶/段的扩繁方式,在含有10%蔗糖和5 mg/L激动素的培养基上,5个马铃薯品种均可成功诱导出试管薯,但诱导效果存在差异。青薯9号的最佳分化激素配方为0.5 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、0.2 mg/L吲哚-3-乙酸、0.2 mg/L赤霉素、2 mg/L玉米素,再生效率、转化频率和基因编辑效率分别为41.5%、51.9%和82.1%。利用上述筛选的激素配方,在其他4个四倍体马铃薯品种中均可高效地实现试管薯的遗传转化再生,其中并薯6号、Desiree和晋薯16号的编辑效率分别为63.2%、33.3%和10%。【结论】建立了5个不同基因型四倍体马铃薯高效的试管薯遗传转化再生体系,其中的4份材料成功地实现了基因组编辑。
关键词
马铃薯
试管薯诱导
遗传转化再生
GFP
基因组编辑
Keywords
potato
microtubers inducing
genetic transformation and regeneration
GFP
genome editing
分类号
S532 [农业科学—作物学]
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
紫花苜蓿组织培养体系的建立及其遗传转化
周晓馥
吕杰
苗璐
高峰
徐洪伟
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
CRISPR/Cas9介导的高效四倍体马铃薯试管薯基因编辑体系的建立
宋倩娜
段永红
冯瑞云
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
2
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