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通管方含药血清抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症机制探讨
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作者 李萍 徐佳 +2 位作者 黄紫纯 王淑婷 匡继林 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第8期1840-1846,1852,共8页
目的:探究通管方含药血清对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症的影响,从而明确通管方治疗输卵管炎性不孕的细胞机制。方法:选用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞建立体外模型,检测细胞氧化应激ROS水平、细胞凋亡水平和PI3K/Akt信号通路蛋白表达... 目的:探究通管方含药血清对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症的影响,从而明确通管方治疗输卵管炎性不孕的细胞机制。方法:选用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞建立体外模型,检测细胞氧化应激ROS水平、细胞凋亡水平和PI3K/Akt信号通路蛋白表达。CCK-8检测通管方含药血清对细胞炎症的影响。将细胞分为对照组、LPS炎症细胞模型组和不同浓度的通管方含药血清处理LPS炎症细胞模型组。qPCR检测各组细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平。免疫荧光和Western blot检测PI3K/Akt信号通路的磷酸化水平,同时检测细胞凋亡基因Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白水平。利用Hoechst 33342/PI染色和流式细胞术检测通管方含药血清对细胞凋亡的影响。利用DCFH-DA探针检测通管方含药血清对细胞ROS含量的影响。结果:①通管方含药血清减轻LPS对细胞的损伤,具有剂量依赖性;②通管方含药血清降低LPS诱导的促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α的产生;③通管方含药血清减少了LPS诱导的细胞内ROS产生;④通管方含药血清预处理激活了PI3K/Akt信号通路;⑤通管方含药血清促进了细胞凋亡。结论:通管方含药血清处理可以减轻细胞损伤和炎症反应,并通过激活PI3K/Akt信号通路和促进细胞凋亡来保护细胞免受LPS的损伤,进一步降低细胞炎症水平。 展开更多
关键词 输卵管炎性不孕 通管方 细胞凋亡 PI3K/Akt ROS
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