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伪狂犬病病毒gG基因缺失通用转移载体的构建被引量：8: 1; 作者方六荣陈焕春 +2 位作者肖少波王革非马相如《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期306-309,共4页; 对克隆有伪狂犬病病毒Ea株基因组DNASphI 15kb片段的质粒pBSA用SphI和KpnI消化 ,将含gG全基因及其上游PK基因、下游gD基因部分编码区约 2 .6kb的片段亚克隆到消除了EcoRI位点的载体pUC19中 ,获得重组质粒pUSK(E)。以pEGFP N1为模板 ,通... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 gG基因 gG启动子通用转移载体克隆序列分析真核表达系统多价基因工程疫苗疱疹病毒科分子生物学; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒通用转移载体的构建及应用被引量：3: 2; 作者钱平李祥敏 +3 位作者陈焕春肖少波仇华吉童光志《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期16-20,共5页; 将来自质粒pFSV40的 3 0 0bpBamHI/PstI片段〔其中含有SV40poly(A)和部分多克隆位点〕插入到质粒pUSK相应的酶切位点中 ,获得重组质粒pUSKSV40 ,该重组质粒中gG基因 5’端编码区缺失了 42 8bp。将来自质粒pcDNA3 .1( +)的 946bpBglIIEc... 展开更多; 关键词伪狂犬病伪狂犬病病毒通用转移载体重组伪狂犬病病毒基因工程疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病毒TK基因缺失通用转移载体的构建及初步应用被引量：1: 3; 作者韩静芳陈瑞爱 +2 位作者邵定勇唐满华梁桂益《现代农业科技》 2009年第15期308-310,共3页; 以伪狂犬病毒为载体表达其他病原体抗原蛋白是伪狂犬病疫苗研究的一个重要方向。根据已发表的伪狂犬病毒(PRV)Ra株TK基因序列设计2对引物,用PCR方法得到同源左右臂,克隆入PUC19载体中。利用平末端连接的方法将绿色荧光蛋白(EGFP)的基因... 展开更多; 关键词伪狂犬病毒 TK基因通用转移载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组马立克病毒通用转移载体的构建及初步应用被引量：3: 4; 作者刘召明张丽萍 +3 位作者王秀丽赵冬凤刘新文李明义《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第1期26-28,共3页; 本实验以独立启动子控制的增强型绿色荧光基因(GFP)作为报告基因,同时将CMV启动子及其多克隆位点与之连接,构成外源基因表达盒,插入到马立克病毒(MDV)复制非必需区基因(短独特区US2等)构成的同源臂中,构建成重组马立克病毒的通用载体。... 展开更多; 关键词马立克病毒通用转移载体绿色荧光蛋白重组马立克病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒gD、gE基因的克隆及转移载体的构建被引量：6: 5; 作者胡涛崔保安 +3 位作者杨明凡王学斌张素梅王岩《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期149-151,共3页; 利用PCR扩增了伪狂犬病病毒Min＿A株gD、gE基因,扩增产物克隆于pGEM＿TEasy载体。将gD、gE基因连接于质粒pUC18获得pUgDgE,缺失质粒pUgDgE的BamHI和BstEII位点间391bp的片段。在此缺失位置插入来自质粒pcD NA3.1＿的一段含hCMV启动子、... 展开更多; 关键词伪狂犬病毒 GD gE 克隆通用转移载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒gG基因缺失通用转移载体的构建被引量：8: 1; 作者方六荣陈焕春肖少波王革非马相如; 机构华中农业大学畜牧兽医学院; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期306-309,共4页; 基金国家重点科技项目 (攻关计划 ) ( 96 C0 1 0 4 0 3) 国家自然科学基金 ( 39970 5 5 9)资助项目; 文摘对克隆有伪狂犬病病毒Ea株基因组DNASphI 15kb片段的质粒pBSA用SphI和KpnI消化 ,将含gG全基因及其上游PK基因、下游gD基因部分编码区约 2 .6kb的片段亚克隆到消除了EcoRI位点的载体pUC19中 ,获得重组质粒pUSK(E)。以pEGFP N1为模板 ,通过PCR扩增约 0 .3kb的SV40Poly(A)片段 ,并将其克隆到杆状病毒转座载体pFastBac1的NotI和PstI位点 ,利用pFastBac1的BamHI和PstI将含有 9个酶切位点以及SV40Poly(A)的片段亚克隆到pUSK(E)的相应位点 ,在插入的同时导致gG基因 5’端编码区约 40 0bp的缺失 ,构建了由gG启动子驱动gG部分编码区缺失的通用转移载体pgG Uni。序列分析进一步证实 :有 7个单一酶切位点可供外源基因直接插入。; 关键词伪狂犬病病毒 gG基因 gG启动子通用转移载体克隆序列分析真核表达系统多价基因工程疫苗疱疹病毒科分子生物学; Keywords pseudorabies virus(PRV), gG gene, gG promoter,universal transfer vector; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒通用转移载体的构建及应用被引量：3: 2; 作者钱平李祥敏陈焕春肖少波仇华吉童光志; 机构华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期16-20,共5页; 文摘将来自质粒pFSV40的 3 0 0bpBamHI/PstI片段〔其中含有SV40poly(A)和部分多克隆位点〕插入到质粒pUSK相应的酶切位点中 ,获得重组质粒pUSKSV40 ,该重组质粒中gG基因 5’端编码区缺失了 42 8bp。将来自质粒pcDNA3 .1( +)的 946bpBglIIEcoRI片段 (其中含CMV启动子及部分多克隆位点 )插入到质粒pUSKSV40的BamHIEcoRI位点 ,构建了通用载体pPRVCMV_uni,其中含有CMV启动子、SV40poly(A)以及NheI、Pmel、BamHI、BstXI、EcoRI、StuI、XbaI等 7个单一克隆位点。将eGFP基因插入到该通用载体的BamHI和EcoRI之间 ,用所获得的转移载体与TK_/gG_/LacZ+ PRV基因组共转染PK_1 5细胞 ,经检测eGFP基因在重组伪狂犬病病毒中获得表达 ,从而证实该通用载体的构建是可行的。本研究研制以伪狂犬病病毒为载体的二价或多价基因工程疫苗奠定了物质基础。; 关键词伪狂犬病伪狂犬病病毒通用转移载体重组伪狂犬病病毒基因工程疫苗; Keywords Pseudoriabies virus Universal vector eGFP Recombinant pseudoriabies virus; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病毒TK基因缺失通用转移载体的构建及初步应用被引量：1: 3; 作者韩静芳陈瑞爱邵定勇唐满华梁桂益; 机构广东大华农动物保健品股份有限公司; 出处《现代农业科技》 2009年第15期308-310,共3页; 文摘以伪狂犬病毒为载体表达其他病原体抗原蛋白是伪狂犬病疫苗研究的一个重要方向。根据已发表的伪狂犬病毒(PRV)Ra株TK基因序列设计2对引物,用PCR方法得到同源左右臂,克隆入PUC19载体中。利用平末端连接的方法将绿色荧光蛋白(EGFP)的基因表达盒插入到缺失位点,并在下游引入1个多克隆位点,构建缺失通用转移载体PUC19TK-EGFP。用脂质体转染试剂盒将PUC19TK-EGFP和PRV-Ra株的基因组共转染BHK细胞,以EGFP为标记基因,用噬斑法得到纯化的重组病毒,命名为TK/EGFP,为研制以伪狂犬病毒为载体的二价或多价基因工程疫苗奠定了物质基础。; 关键词伪狂犬病毒 TK基因通用转移载体; Keywords Pseudorabies virus TK gene universal transfer vector; 分类号 S858.292 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组马立克病毒通用转移载体的构建及初步应用被引量：3: 4; 作者刘召明张丽萍王秀丽赵冬凤刘新文李明义; 机构青岛易邦生物工程有限公司高密市畜牧局河北农业大学动物医学院; 出处《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第1期26-28,共3页; 基金国家十一五攻关项目; 文摘本实验以独立启动子控制的增强型绿色荧光基因(GFP)作为报告基因,同时将CMV启动子及其多克隆位点与之连接,构成外源基因表达盒,插入到马立克病毒(MDV)复制非必需区基因(短独特区US2等)构成的同源臂中,构建成重组马立克病毒的通用载体。鉴定正确后,将转移载体与提取的MDV基因组共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),同源重组获得具有感染性的重组病毒,待病毒蚀斑出现后,荧光显微镜下观察,可见到明显的绿色荧光病毒蚀斑,经三次筛选,初步分离到重组病毒。结果表明,转移载体与MDV基因组共转染可获得感染性病毒,US2基因可作为重组病毒构建中的外源基因插入位点,证实通用转移载体的构建是可行的,为重组马立克病毒新型疫苗的研究奠定物质基础。; 关键词马立克病毒通用转移载体绿色荧光蛋白重组马立克病毒; Keywords Marek＇s disease virus, Universal transferring vector, GFP, Recombinant t virus; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒gD、gE基因的克隆及转移载体的构建被引量：6: 5; 作者胡涛崔保安杨明凡王学斌张素梅王岩; 机构河南农业大学牧医工程学院郑州牧业高等专科学校; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期149-151,共3页; 文摘利用PCR扩增了伪狂犬病病毒Min＿A株gD、gE基因,扩增产物克隆于pGEM＿TEasy载体。将gD、gE基因连接于质粒pUC18获得pUgDgE,缺失质粒pUgDgE的BamHI和BstEII位点间391bp的片段。在此缺失位置插入来自质粒pcD NA3.1＿的一段含hCMV启动子、多克隆位点和Neo报告基因的片段,构建了通用转移载体pgD＿M＿gE。该转移载体缺失了伪狂犬病病毒gI基因和gE基因ORF5'端363bp的碱基,有11个酶切位点可供外源基因的插入,上下游侧翼分别为1.25bp和1.42bp。这为开发以伪狂犬病病毒为载体的多价基因工程疫苗提供了有力工具。; 关键词伪狂犬病毒 GD gE 克隆通用转移载体; Keywords pseudorabies virus gD gE cloning universal transfer vector; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	伪狂犬病病毒gG基因缺失通用转移载体的构建	方六荣陈焕春肖少波王革非马相如	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	伪狂犬病病毒通用转移载体的构建及应用	钱平李祥敏陈焕春肖少波仇华吉童光志	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	伪狂犬病毒TK基因缺失通用转移载体的构建及初步应用	韩静芳陈瑞爱邵定勇唐满华梁桂益	《现代农业科技》	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组马立克病毒通用转移载体的构建及初步应用	刘召明张丽萍王秀丽赵冬凤刘新文李明义	《中国动物检疫》 CAS 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	伪狂犬病病毒gD、gE基因的克隆及转移载体的构建	胡涛崔保安杨明凡王学斌张素梅王岩	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	6	在线阅读下载PDF 职称材料