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重组牛乳铁蛋白肽包含体的复性与纯化被引量：5: 1; 作者林少华罗红霞 +2 位作者郭慧媛任发政罗云波《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2006年第1期9-12,共4页; 通过分析透析液pH值,包含体蛋白浓度,DTT浓度3个参数对复性率的影响,确定了重组牛乳铁蛋白N-末端多肽(pGEX-4T1/rbLF-N)包含体透析复性的最佳条件和复性后蛋白纯化的适宜方法。采用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B柱(Glutathione SapharoseTM 4B)... 展开更多; 关键词重组牛乳铁蛋白肽rbLF—N 包含体透析复性纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

人P53的原核表达及包涵体复性研究被引量：5: 2; 作者刘慧张守涛郭亚楠《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第4期112-117,共6页; 通过检测血清中p53蛋白及其抗体变化诊断肿瘤的ELISA试剂盒的研发需要大量制备p53蛋白.本研究通过构建人野生型p53基因的原核表达质粒pET-32a-p53,在大肠杆菌中诱导表达得到p53包涵体蛋白,经包涵体变性、亲和纯化、复性得到可溶p53蛋白... 展开更多; 关键词 P53 包涵体透析复性稀释复性柱上复性; 在线阅读下载PDF 职称材料

人白细胞介素6的原核表达和纯化及包涵体复性被引量：3: 3; 作者李江峰万惠芳 +1 位作者王继华才蕾《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期228-231,共4页; 1980年,Weissenbach等在研究人成纤维细胞β干扰素（interferonβ,IFN-β）时,首次发现一种相对分子质量（Mr）约为26 000的蛋白,当时将其命名为IFN-β2,直到1989年,在纽约召开的“急性期反应和免疫应答的调控：新的细胞因子”会议中将... 展开更多; 关键词白细胞介素6 原核表达载体包涵体亲和层析透析复性; 在线阅读下载PDF 职称材料

Bacillus sp.肌氨酸氧化酶的脱辅基与重构被引量：1: 4; 作者王庆辛瑜 +2 位作者杨海麟仝艳军王武《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期909-914,共6页; 在肌氨酸氧化酶脱辅基的效果不够理想的情况下,利用不含辅基的重组肌氨酸氧化酶包涵体进行透析复性,以期重现SOX酶与辅酶的复合。研究表明,肌氨酸氧化酶(SOX)包涵体较适合的复性条件为:酶蛋白质量浓度0.3 g/L,透析液pH 8.5,温度4℃,氧... 展开更多; 关键词肌氨酸氧化酶脱辅酶透析复性复性条件重构; 在线阅读下载PDF 职称材料

罗氏沼虾Doublesex基因的原核表达与蛋白纯化被引量：1: 5; 作者王瑞睿马克异《广东农业科学》 CAS 2023年第7期156-163,共8页; 【目的】Doublesex属于DMRT基因家族成员之一,在控制性别特异性分化中起关键作用。克隆罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)Doublesex基因(MrDsx)的开放阅读框序列,构建重组质粒并诱导其表达,纯化获取罗氏沼虾重组蛋白MrDsx,可为后续... 展开更多; 关键词罗氏沼虾 DOUBLESEX 原核表达蛋白免疫印迹重组蛋白透析复性质谱分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组牛乳铁蛋白肽包含体的复性与纯化被引量：5: 1; 作者林少华罗红霞郭慧媛任发政罗云波; 机构中国农业大学食品科学与营养工程学院; 出处《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2006年第1期9-12,共4页; 基金国家科技部资助项目(2002BA501A07) 北京市教委资助项目(GJSY10090401); 文摘通过分析透析液pH值,包含体蛋白浓度,DTT浓度3个参数对复性率的影响,确定了重组牛乳铁蛋白N-末端多肽(pGEX-4T1/rbLF-N)包含体透析复性的最佳条件和复性后蛋白纯化的适宜方法。采用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B柱(Glutathione SapharoseTM 4B)对复性后的蛋白溶液进行纯化,纯化后的融和蛋白经胃蛋白酶酶解并检测其酶解产物的抗菌活性。试验表明包涵体蛋白可以部分复性。当pH值为8.5,包含体蛋白质量浓度为100mg/L,DTT浓度为24 mmol/L时,包含体的复性率最高。纯化后的融合蛋白酶解产物具有抗菌作用。; 关键词重组牛乳铁蛋白肽rbLF—N 包含体透析复性纯化; Keywords recombinant bovine rbLF-N inclusion body dialysis renaturation purification; 分类号 TQ936.16 [化学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人P53的原核表达及包涵体复性研究被引量：5: 2; 作者刘慧张守涛郭亚楠; 机构郑州大学生命科学学院; 出处《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第4期112-117,共6页; 基金国家自然科学基金青年科学基金(31501094) 河南省基础与前沿技术研究项目(152300410032); 文摘通过检测血清中p53蛋白及其抗体变化诊断肿瘤的ELISA试剂盒的研发需要大量制备p53蛋白.本研究通过构建人野生型p53基因的原核表达质粒pET-32a-p53,在大肠杆菌中诱导表达得到p53包涵体蛋白,经包涵体变性、亲和纯化、复性得到可溶p53蛋白.发现利用8M尿素对包涵体进行变性溶解,经镍柱亲和纯化得到纯度超过95%的变性蛋白.尝试透析复性、稀释复性和柱上复性3种方法分别对p53变性蛋白进行复性.结果表明透析复性的复性率最高,这为原核表达制备p53提供了一种参考.本研究为ELISA法检测血清中p53蛋白及其抗体诊断肿瘤相关试剂盒研发奠定了基础.; 关键词 P53 包涵体透析复性稀释复性柱上复性; Keywords p53 inclusion body dialysis renaturation dilution renaturation Ni-NTA affinity renaturation; 分类号 Q816 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人白细胞介素6的原核表达和纯化及包涵体复性被引量：3: 3; 作者李江峰万惠芳王继华才蕾; 机构广州万孚生物技术股份有限公司; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期228-231,共4页; 文摘 1980年,Weissenbach等在研究人成纤维细胞β干扰素（interferonβ,IFN-β）时,首次发现一种相对分子质量（Mr）约为26 000的蛋白,当时将其命名为IFN-β2,直到1989年,在纽约召开的“急性期反应和免疫应答的调控：新的细胞因子”会议中将其命名为白细胞介素6（interleukin 6,IL-6）,并一直沿用至今。; 关键词白细胞介素6 原核表达载体包涵体亲和层析透析复性; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学] R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Bacillus sp.肌氨酸氧化酶的脱辅基与重构被引量：1: 4; 作者王庆辛瑜杨海麟仝艳军王武; 机构江南大学工业生物技术教育部重点实验室; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期909-914,共6页; 基金国家自然科学基金项目(21306064); 文摘在肌氨酸氧化酶脱辅基的效果不够理想的情况下,利用不含辅基的重组肌氨酸氧化酶包涵体进行透析复性,以期重现SOX酶与辅酶的复合。研究表明,肌氨酸氧化酶(SOX)包涵体较适合的复性条件为:酶蛋白质量浓度0.3 g/L,透析液pH 8.5,温度4℃,氧化还原值(GSH/GSSG)为2,复性时间为24 h。作者还比较了不同天然辅基与SOX蛋白的复合效果,通过圆二色性、红外光谱以及DSC热差分析,探究了天然辅基与肌氨酸氧化酶复合后对酶蛋白二级结构、比酶活及稳定性的影响。; 关键词肌氨酸氧化酶脱辅酶透析复性复性条件重构; Keywords sarcosine oxidase deflavination dialysis refolding condition reconstitution; 分类号 Q71 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名罗氏沼虾Doublesex基因的原核表达与蛋白纯化被引量：1: 5; 作者王瑞睿马克异; 机构上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心中国水产科学研究院东海水产研究所; 出处《广东农业科学》 CAS 2023年第7期156-163,共8页; 基金国家自然科学基金青年基金项目(31902348)。; 文摘【目的】Doublesex属于DMRT基因家族成员之一,在控制性别特异性分化中起关键作用。克隆罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)Doublesex基因(MrDsx)的开放阅读框序列,构建重组质粒并诱导其表达,纯化获取罗氏沼虾重组蛋白MrDsx,可为后续开展罗氏沼虾MrDsx基因的功能研究提供基础数据。【方法】基于罗氏沼虾MrDsx的开放阅读框序列,通过特异PCR产物与表达载体pET-32a(+)连接,获得重组质粒pET-32a-MrDsx,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,构建罗氏沼虾MrDsx基因的原核表达细胞。利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对阳性转化细胞进行诱导表达,并以SDS-PAGE电泳,Western blot和质谱分析检测诱导表达的重组蛋白。【结果】以罗氏沼虾性腺cDNA为模板,利用MrDsx基因的特异引物,PCR扩增获得了约660 bp大小的单一DNA条带。经测序确认为MrDsx基因的ORF序列。重组质粒pET-32a-MrDsx转化后的感受态细胞经IPTG在37℃条件下诱导4 h后获得罗氏沼虾重组蛋白MrDsx。当IPTG终浓度为0.1~0.5 mmol/L时,重组蛋白MrDsx的表达量可达到峰值。可溶性分析显示,重组蛋白MrDsx主要以包涵体形式表达,经8 mol/L尿素溶解、Ni柱纯化及透析复性后,SDS-PAGE电泳和Western blot检测发现重组蛋白的相对分子量约55 kD,且条带单一,表明重组蛋白MrDsx能被鼠抗His-tag单克隆抗体特异性识别。质谱分析结果显示,片段化肽段与理论的氨基酸序列相符,匹配度达到100%。【结论】成功获得了MrDsx基因原核表达的重组质粒pET-32a-MrDsx。诱导表达的重组蛋白经溶解、纯化及复性后,可形成高纯度的活性罗氏沼虾MrDsx重组蛋白,为后续开展罗氏沼虾MrDsx基因的功能研究、互作蛋白的筛选和性别调控机制的解析提供初步依据。; 关键词罗氏沼虾 DOUBLESEX 原核表达蛋白免疫印迹重组蛋白透析复性质谱分析; Keywords Macrobrachium rosenbergii Doublesex prokaryotic expression Western blot recombinant protein dialysis renaturation mass spectrometry; 分类号 S917.4 [农业科学—水产科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	重组牛乳铁蛋白肽包含体的复性与纯化	林少华罗红霞郭慧媛任发政罗云波	《中国乳品工业》 CAS 北大核心	2006	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人P53的原核表达及包涵体复性研究	刘慧张守涛郭亚楠	《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2016	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人白细胞介素6的原核表达和纯化及包涵体复性	李江峰万惠芳王继华才蕾	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	Bacillus sp.肌氨酸氧化酶的脱辅基与重构	王庆辛瑜杨海麟仝艳军王武	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	罗氏沼虾Doublesex基因的原核表达与蛋白纯化	王瑞睿马克异	《广东农业科学》 CAS	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料