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旋转超滤:一种提取细胞外泌体的新方法
被引量：
16
1
作者
胡国文
李青
+5 位作者
牛鑫
胡斌
刘鹃
沈晓黎
汪泱
邓志锋
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期598-602,共5页
目的建立一种利用旋转超滤技术从骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)培养上清液中分离外泌体(exosome)的方法。方法收集BMSCs细胞培养上清,低速离心去除残余细胞,0.22μm滤器过滤除去细胞碎片,采用旋转超滤技...
目的建立一种利用旋转超滤技术从骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)培养上清液中分离外泌体(exosome)的方法。方法收集BMSCs细胞培养上清,低速离心去除残余细胞,0.22μm滤器过滤除去细胞碎片,采用旋转超滤技术提取外泌体。应用透射电子显微镜观察所获外泌体的形态,用蛋白质印迹法检测外泌体标记物CD63、CD9蛋白的表达,用CCK-8试剂盒检测外泌体对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖活性的影响。结果使用旋转超滤技术成功分离出BMSCs分泌的外泌体,透射电镜下外泌体为圆形或椭圆形,直径约100nm,蛋白质免疫印迹法检测结果显示外泌体中有其特异标记物CD63、CD9蛋白的表达。外泌体能够促进HUVECs增殖,并且其促细胞增殖作用随浓度增高而增强。结论旋转超滤技术是一种简单有效的提取外泌体的方法。
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关键词
外泌体
间质干细胞
旋转超滤
透射电子显微镜检查
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职称材料
生物样品电镜超薄切片染色技术的改进
被引量：
8
2
作者
唐凯
叶煦亭
+6 位作者
范晓燕
晋若冰
林方兴
金婵
汤莹
马春旺
杨勇骥
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期559-560,共2页
目的提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率和染色质量。方法在传统染色方法基础上进行改进,采用"插入式滴染法"和连续染色方式。结果在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色。结论与传统方法相比省时省药,减少污...
目的提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率和染色质量。方法在传统染色方法基础上进行改进,采用"插入式滴染法"和连续染色方式。结果在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色。结论与传统方法相比省时省药,减少污染概率,电镜观察结构清晰,反差较好。
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关键词
透射电子显微镜检查
生物样品制备
超薄切片染色
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职称材料
胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段肾脏超微结构改变
被引量：
3
3
作者
孟瑞
王春梅
+5 位作者
黄晓峰
陈军
侯军峰
杨家骥
王爽
亢君君
《科学技术与工程》
2008年第1期26-29,共4页
为观察胰岛素抵抗(IR)大鼠血糖正常阶段的肾脏超微结构改变。以高糖高脂饲料(2H)和高糖高脂高盐(3H)饲料喂养2月龄SD大鼠4个月,复制IR模型,普通饲料喂养的SD大鼠为正常对照,透射和扫描电镜观察肾脏结构。对2H组用透射电镜下观察,肾小球...
为观察胰岛素抵抗(IR)大鼠血糖正常阶段的肾脏超微结构改变。以高糖高脂饲料(2H)和高糖高脂高盐(3H)饲料喂养2月龄SD大鼠4个月,复制IR模型,普通饲料喂养的SD大鼠为正常对照,透射和扫描电镜观察肾脏结构。对2H组用透射电镜下观察,肾小球和肾小管基底膜明显增厚,分别为(2.23±0.88)μm,(0.86±0.25)μm,P<0.01,系膜区增宽,足突明显肿胀,部分融合,部分内皮窗孔消失,滤过屏障结构破坏。肾脏间质水肿,有炎细胞浸润;扫描电镜下观察,足突融合成片、变宽。3H组在透射电镜下观察,肾小球和肾小管基底膜明显增厚,分别为(1.88±0.41)μm,(0.96±0.22)μm,P<0.01,足突明显肿胀,大部分融合,部分内皮窗孔消失,滤过屏障结构破坏严重。间质有炎细胞浸润,肾小管上皮细胞有大量脂滴沉积,肾间质可见浆细胞,部分区域髓样变性;扫描电镜下观察,肾小管刷状缘不整齐,微绒毛倒伏,管腔皱缩,局部细胞变性脱落,管壁空洞,足突大部分融合成片。结果表明高糖高脂和高糖高脂高盐膳食诱发的IR大鼠在血糖正常阶段已存在超微结构的病理改变。
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关键词
胰岛素抵抗
肾脏
电子显微镜
检查
/扫描
电子显微镜
检查
/
透射
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职称材料
题名
旋转超滤:一种提取细胞外泌体的新方法
被引量：
16
1
作者
胡国文
李青
牛鑫
胡斌
刘鹃
沈晓黎
汪泱
邓志锋
机构
南昌大学第二附属医院神经外科
上海交通大学医学院附属第六人民医院四肢显微外科研究所
上海交通大学医学院附属第六人民医院神经外科
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期598-602,共5页
基金
国家自然科学基金(81272170)
江西省创新团队计划(20113BCB24018)~~
文摘
目的建立一种利用旋转超滤技术从骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)培养上清液中分离外泌体(exosome)的方法。方法收集BMSCs细胞培养上清,低速离心去除残余细胞,0.22μm滤器过滤除去细胞碎片,采用旋转超滤技术提取外泌体。应用透射电子显微镜观察所获外泌体的形态,用蛋白质印迹法检测外泌体标记物CD63、CD9蛋白的表达,用CCK-8试剂盒检测外泌体对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖活性的影响。结果使用旋转超滤技术成功分离出BMSCs分泌的外泌体,透射电镜下外泌体为圆形或椭圆形,直径约100nm,蛋白质免疫印迹法检测结果显示外泌体中有其特异标记物CD63、CD9蛋白的表达。外泌体能够促进HUVECs增殖,并且其促细胞增殖作用随浓度增高而增强。结论旋转超滤技术是一种简单有效的提取外泌体的方法。
关键词
外泌体
间质干细胞
旋转超滤
透射电子显微镜检查
Keywords
exosome
mesenchymal stem cells
stirring ultrafiltration
transmission electron microscopy
分类号
R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
生物样品电镜超薄切片染色技术的改进
被引量：
8
2
作者
唐凯
叶煦亭
范晓燕
晋若冰
林方兴
金婵
汤莹
马春旺
杨勇骥
机构
河南师范大学物理与信息工程学院物理学系
第二军医大学基础部生物物理研究所
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期559-560,共2页
基金
国家重点基础研究发展计划(2006CB932505)
上海市科委纳米专项基金(0752nm020)
河南师范大学青年基金(2009qk07)~~
文摘
目的提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率和染色质量。方法在传统染色方法基础上进行改进,采用"插入式滴染法"和连续染色方式。结果在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色。结论与传统方法相比省时省药,减少污染概率,电镜观察结构清晰,反差较好。
关键词
透射电子显微镜检查
生物样品制备
超薄切片染色
Keywords
transmission electron microscopy
specimen preparation
ultra-thin section＇s staining
分类号
R35-33 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段肾脏超微结构改变
被引量：
3
3
作者
孟瑞
王春梅
黄晓峰
陈军
侯军峰
杨家骥
王爽
亢君君
机构
第四军医大学基础部电子显微镜中心
第四军医大学唐都医院疼痛研究所
出处
《科学技术与工程》
2008年第1期26-29,共4页
文摘
为观察胰岛素抵抗(IR)大鼠血糖正常阶段的肾脏超微结构改变。以高糖高脂饲料(2H)和高糖高脂高盐(3H)饲料喂养2月龄SD大鼠4个月,复制IR模型,普通饲料喂养的SD大鼠为正常对照,透射和扫描电镜观察肾脏结构。对2H组用透射电镜下观察,肾小球和肾小管基底膜明显增厚,分别为(2.23±0.88)μm,(0.86±0.25)μm,P<0.01,系膜区增宽,足突明显肿胀,部分融合,部分内皮窗孔消失,滤过屏障结构破坏。肾脏间质水肿,有炎细胞浸润;扫描电镜下观察,足突融合成片、变宽。3H组在透射电镜下观察,肾小球和肾小管基底膜明显增厚,分别为(1.88±0.41)μm,(0.96±0.22)μm,P<0.01,足突明显肿胀,大部分融合,部分内皮窗孔消失,滤过屏障结构破坏严重。间质有炎细胞浸润,肾小管上皮细胞有大量脂滴沉积,肾间质可见浆细胞,部分区域髓样变性;扫描电镜下观察,肾小管刷状缘不整齐,微绒毛倒伏,管腔皱缩,局部细胞变性脱落,管壁空洞,足突大部分融合成片。结果表明高糖高脂和高糖高脂高盐膳食诱发的IR大鼠在血糖正常阶段已存在超微结构的病理改变。
关键词
胰岛素抵抗
肾脏
电子显微镜
检查
/扫描
电子显微镜
检查
/
透射
Keywords
insulin resistance
kidney
electron microscopy/scanning
electron microscopy/transnfission
分类号
R977.15 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
旋转超滤:一种提取细胞外泌体的新方法
胡国文
李青
牛鑫
胡斌
刘鹃
沈晓黎
汪泱
邓志锋
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
16
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下载PDF
职称材料
2
生物样品电镜超薄切片染色技术的改进
唐凯
叶煦亭
范晓燕
晋若冰
林方兴
金婵
汤莹
马春旺
杨勇骥
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段肾脏超微结构改变
孟瑞
王春梅
黄晓峰
陈军
侯军峰
杨家骥
王爽
亢君君
《科学技术与工程》
2008
3
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