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逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术同时检测水中多种肠道病毒 被引量：17
1
作者 张崇淼 刘永军 +1 位作者 王晓昌 薛小平 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期137-141,共5页
建立了一种利用通用引物RT-PCR技术检测水中肠道病毒的方法.利用脊髓灰质炎病毒1～3型,柯萨奇病毒B3型作为参考病毒株,根据肠道病毒RNA5′非编码区中具有高度同源性的序列来设计通用引物.比较了M-MLV酶和AMV酶的逆转录效果,AMV酶能够成... 建立了一种利用通用引物RT-PCR技术检测水中肠道病毒的方法.利用脊髓灰质炎病毒1～3型,柯萨奇病毒B3型作为参考病毒株,根据肠道病毒RNA5′非编码区中具有高度同源性的序列来设计通用引物.比较了M-MLV酶和AMV酶的逆转录效果,AMV酶能够成功地从地表水和生活污水中逆转录病毒RNA,更适于实际应用.对比研究了PCR过程中的退火温度,c(Mg2+)等因素对RT-PCR检测结果的影响,选择退火温度55℃,c(Mg2+)为2 mmol/L的反应条件,优化了RT-PCR检测方法.通过检测水样中接种的连续稀释的病毒,确定了该检测方法的灵敏度为38 CCID50.考察人工污染的地表水、污水、二级处理出水样品发现,检测灵敏度基本一致.该方法可应用在实际环境的肠道病毒检测中. 展开更多
关键词 肠道病毒 逆转录-聚合酶链反应(rt-pcr) 通用引物 同时检测 水
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逆转录-聚合酶链反应在乙型脑炎诊断中的建立 被引量：11
2
作者 丁淑军 余光开 +1 位作者 张建军 彭建一 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期86-88,共3页
目的　运用逆转录 -半套式 -聚合酶链反应技术 (RT -semi-nested -PCR) ,建立一种新的早期快速检测乙型脑炎病毒的方法。方法　收集临床诊断的 37例乙脑和 15例非乙脑病人标本 (包括血清、脑脊液 )分别为 6 3份和 30份 ,同时用RT -semi-... 目的　运用逆转录 -半套式 -聚合酶链反应技术 (RT -semi-nested -PCR) ,建立一种新的早期快速检测乙型脑炎病毒的方法。方法　收集临床诊断的 37例乙脑和 15例非乙脑病人标本 (包括血清、脑脊液 )分别为 6 3份和 30份 ,同时用RT -semi-nested -PCR、IgM捕获法ELISA(MacELISA)进行检测。 结果　血清和脑脊液中可成功检测出JEVRNA ,经1 5 %凝胶电泳 ,出现特异性条带 ,符合预计值 4 0 0bp。结论　RT -semi-nested -PCR对检测JEV感染 ,从实验设计到实验条件 ,都是合理的 ,有较高的敏感性和特异性。可用于乙脑的早期诊断。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 逆转录-聚合酶链反应 诊断
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逆转录-多重巢式聚合酶链反应技术在骨髓增殖性疾病PDGFRB基因重排检测中的应用 被引量：1
3
作者 周敏航 姜孟孟 +6 位作者 高丽 徐媛媛 丁一 王莉莉 靖彧 王全顺 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期1443-1446,共4页
本研究旨在探讨逆转录-多重巢式PCR技术在骨髓增殖性疾病(MPD)PDGFRB基因重排检测中的应用价值。利用逆转录-多重巢式PCR技术对146例MPD患者骨髓或外周血标本进行与PDGFRB基因重排相关的融合基因定性检测。结果显示,146例MPD患者骨髓或... 本研究旨在探讨逆转录-多重巢式PCR技术在骨髓增殖性疾病(MPD)PDGFRB基因重排检测中的应用价值。利用逆转录-多重巢式PCR技术对146例MPD患者骨髓或外周血标本进行与PDGFRB基因重排相关的融合基因定性检测。结果显示,146例MPD患者骨髓或外周血标本中有8例出现PDGFRB基因重排,阳性率为5.5%。其中3例为TEL-PDGFRB融合基因,2例为HIP1-PDGFRB融合基因,1例为GIT2-PDGFRB融合基因,1例为TP53BP1-PDGFRB融合基因,1例为WDR48-PDGFRB融合基因。结论:运用逆转录-多重巢式PCR方法进行MPD患者PDGFRB基因重排检测,对于疾病诊断有一定指导意义,且可以为药物靶向治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 逆转录-多重巢式聚合酶链反应 骨髓增殖性疾病 PDGFRB基因重排
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竞争性逆转录-聚合酶链反应对哮喘患者诱导痰白细胞介素-10基因表达的定量分析 被引量：1
4
作者 何梦璋 梁剑辉 徐军 《医学研究生学报》 CAS 2007年第1期49-52,共4页
目的:建立竞争性逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量方法,监测哮喘患者白细胞介素-10(IL-10)基因的表达水平,探讨IL-10在哮喘气道炎症中的作用和临床意义。方法:用酶切法构建IL-10内标分子,用已知量的该内标分子,通过竞争性RT-PCR对哮喘组... 目的:建立竞争性逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量方法,监测哮喘患者白细胞介素-10(IL-10)基因的表达水平,探讨IL-10在哮喘气道炎症中的作用和临床意义。方法:用酶切法构建IL-10内标分子,用已知量的该内标分子,通过竞争性RT-PCR对哮喘组(30例)和对照组(29例)的诱导痰和外周血IL-10 mRNA进行定量分析。结果:哮喘发作期患者的诱导痰和外周血绝大多数未检测到IL-10 mRNA,部分缓解期患者有少量IL-10 mRNA表达。健康对照者外周血和诱导痰均有IL-10 mRNA表达。结论:哮喘患者的气道炎症过程与IL-10基因表达有关,且存在IL-10转录水平的合成障碍。 展开更多
关键词 竞争性逆转录-聚合酶链反应 白细胞介素-10 支气管哮喘
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逆转录-聚合酶链反应检测鼠肝炎病毒方法的建立 被引量：4
5
作者 姚玉霞 丛斌 +2 位作者 彭郁葱 尤红煜 刘福英 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1998年第2期13-17,共5页
建立特异、灵敏的逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术，结合碱性磷酸酶标记的探针杂交检测鼠肝炎病毒（MHV），采用MHV－3，MHV－A59病毒株感染DBT细胞，37℃培养，待细胞出现病变时收集提取病毒RNA。依据MHV基因序列设计一对高度保守... 建立特异、灵敏的逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术，结合碱性磷酸酶标记的探针杂交检测鼠肝炎病毒（MHV），采用MHV－3，MHV－A59病毒株感染DBT细胞，37℃培养，待细胞出现病变时收集提取病毒RNA。依据MHV基因序列设计一对高度保守区特异性引物，进行RT－PCR扩增，结果可见147bp的鼠肝炎病毒产物特异扩增带。敏感性实验检测到10pg的鼠肝炎病毒RNA，同时用ELISA方法对照。结果提示应用RT—PCR技术结合探针杂交检测鼠肝炎病毒。具有简便、快速、灵敏等优势。本研究在国内尚未见报道。 展开更多
关键词 鼠肝 肝炎病毒 探针杂交 逆转录-聚合酶链反应 rt-pcr 扩增 RNA 特异性引物 病毒株 病变
全文增补中
猪流行性腹泻病毒微芯片荧光定量RT-qPCR检测方法的建立 被引量：4
6
作者 曹洪志 王新杰 +6 位作者 高姗姗 孙晓明 邓飞 石艳萍 陈弟诗 陈昌英 李平顺 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期45-48,共4页
为了建立简便快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)荧光定量RT-qPCR检测方法,根据GenBank数据库公布的猪流行性腹泻病毒囊膜蛋白E基因,设计特异性引物和探针结合微芯片技术,建立微芯片荧光定量RT-qPCR检测方法。该方法除对PEDV检测为阳性外,对... 为了建立简便快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)荧光定量RT-qPCR检测方法,根据GenBank数据库公布的猪流行性腹泻病毒囊膜蛋白E基因,设计特异性引物和探针结合微芯片技术,建立微芯片荧光定量RT-qPCR检测方法。该方法除对PEDV检测为阳性外,对与其同源性较近的致病病毒的检测均为阴性;最低检测限为1 copies/μL,常规荧光RT-qPCR检测限为10 copies/μL。批内、批间重复性试验表明,Ct值变异系数均在2%以内,可对PEDV临床样本进行检测。建立的检测方法特异性好、敏感性高、检测时间短且重复性好,适用于临床检测。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 微芯片 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应 囊膜蛋白
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半定量RT-PCR检测猪延髓中色氨酸羟化酶2基因表达方法的建立
7
作者 马红娜 邓衔柏 +6 位作者 马勇江 何敏 习欠云 宁章勇 张桂红 卢培成 张曼玉 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第7期1-6,共6页
利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定仔猪延髓组织中色氨酸羟化酶2(TPH-2)基因mRNA表达水平,以β-actin为内标,分析相对表达量及其与驱赶应激的关系。通过探讨和优化PCR体系中退火温度、Mg2+浓度和循环次数等参数,建立了检... 利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定仔猪延髓组织中色氨酸羟化酶2(TPH-2)基因mRNA表达水平,以β-actin为内标,分析相对表达量及其与驱赶应激的关系。通过探讨和优化PCR体系中退火温度、Mg2+浓度和循环次数等参数,建立了检测延髓组织中色氨酸羟化酶-2基因mRNA表达的半定量RT-PCR体系。通过分析色氨酸羟化酶-2 PCR产物与β-actin PCR产物电泳后的灰度比值,可知驱赶应激对TPH-2基因mRNA表达量的影响。 展开更多
关键词 色氨酸羟化酶2 逆转录-聚合酶链反应 应激
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR检测方法的建立 被引量：15
8
作者 何世成 邹敏 +6 位作者 刘道新 范仲鑫 谈志祥 邱立新 鲁杏华 唐小明 黄建龙 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第7期10-13,共4页
根据GenBank上猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株的核苷酸序列与古典美洲株的核苷酸序列,设计一对高致病性PRRSV特异性引物,结合快速的RNA抽提试剂和一步法RT-PCR,建立高致病性PRRSV快速RT-PCR检测体系。通过测序和同类试剂盒检测效... 根据GenBank上猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株的核苷酸序列与古典美洲株的核苷酸序列,设计一对高致病性PRRSV特异性引物,结合快速的RNA抽提试剂和一步法RT-PCR,建立高致病性PRRSV快速RT-PCR检测体系。通过测序和同类试剂盒检测效果比对,证实该体系检测结果准确,体系特异性和灵敏度试验结果显示,该体系对猪瘟病毒、普通PRRSV、禽流感病毒无扩增产物,至少能检测经10万倍稀释后的临床阳性样品。该方法可直接对可疑组织样品进行检测,操作简单、快速、价廉、受环境因素污染概率小,适合临床样品的检测。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 逆转录-聚合酶链反应 检测
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无假基因干扰的CK19 RT-PCR方法检测乳腺癌外周血微转移 被引量：6
9
作者 冯玉梅 李树玲 +3 位作者 李希 王立梅 刘红 郝希山 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期393-396,400,共5页
目的:以CK19为基因标志检测乳腺癌患者外周血中播散的肿瘤细胞,并对其临床意义进行评价。方法:采用优化的无假基因干扰的RT-PCR方法检测乳腺癌患者外周血有核细胞的CK19mRNA表达。结果:1)方法可靠性验证:检测30例正常人外周血CK19mRNA表... 目的:以CK19为基因标志检测乳腺癌患者外周血中播散的肿瘤细胞,并对其临床意义进行评价。方法:采用优化的无假基因干扰的RT-PCR方法检测乳腺癌患者外周血有核细胞的CK19mRNA表达。结果:1)方法可靠性验证:检测30例正常人外周血CK19mRNA表达,结果无假阳性;将乳腺癌细胞系MCF-7以1∶107与正常外周血有核细胞混合,检测CK19mRNA表达,结果无假阴性。2)检测乳腺癌41例,外周血肿瘤细胞阳性检出率26.8%(11/41);乳腺癌患者外周血肿瘤细胞阳性率在患者不同年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、ER和PR状态的各组间差异无显著性(P>0.05);淋巴结转移阳性病例外周血肿瘤细胞检出率(38.1%)明显高于淋巴结转移阴性组(15.0%),虽然统计学差异不具有显著性(P=0.10),但提示淋巴结转移阳性的患者肿瘤细胞血行播散的危险性有增加的趋势。结论:以CK19为基因标志采用RT-PCR方法检测乳腺癌患者外周血中的肿瘤细胞可能是乳腺癌有意义的预后指标,可以为治疗方案的选择、治疗疗效的评价及外周血干细胞移植联合大剂量化疗适应证筛选提供重要依据。 展开更多
关键词 乳腺癌 微转移 外周血 细胞角蛋白19 逆转录-聚合酶链反应
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兔出血症病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：7
10
作者 肖跃强 谢金文 +2 位作者 徐二丹 沈志强 丁壮 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期69-73,共5页
为建立一种敏感、特异、简便的兔出血症病毒(RHDV)检测方法,根据GenBank中公布的RHDV全基因组序列保守区域设计了2对引物,筛选了其中1对建立并优化了PCR条件,扩增产物为331bp,并基于此建立了SYBR GreenⅠ荧光染料real-time RT-PCR检测... 为建立一种敏感、特异、简便的兔出血症病毒(RHDV)检测方法,根据GenBank中公布的RHDV全基因组序列保守区域设计了2对引物,筛选了其中1对建立并优化了PCR条件,扩增产物为331bp,并基于此建立了SYBR GreenⅠ荧光染料real-time RT-PCR检测方法。通过敏感性、特异性、标准曲线建立等表明,该方法可检出101以上拷贝数的模板,只在RHDV有特异性扩增,标准曲线线性相关性好。实际应用结果显示,该方法对疑似RHDV病料检测的阳性率为74.8%,而普通RT-PCR方法检测的阳性率为65.5%。该方法的建立为开展该病的诊断、疫苗制备质控等提供了有效的技术保障。 展开更多
关键词 兔出血症病毒 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应 建立
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RT-PCR快速诊断禽流感 被引量：9
11
作者 王贵华 金梅林 陈焕春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期67-70,共4页
目前,禽流感检测方法较多,但均费时费力,且灵敏度不高。本研究立足于临床实际,选择A型流感病毒核蛋白(NP)基因序列保守区,设计了一对特异性引物,从临床病料中提取RNA,建立了一步法单管逆转录＿聚合酶链反应(RT＿PCR)快速诊断方法,该方... 目前,禽流感检测方法较多,但均费时费力,且灵敏度不高。本研究立足于临床实际,选择A型流感病毒核蛋白(NP)基因序列保守区,设计了一对特异性引物,从临床病料中提取RNA,建立了一步法单管逆转录＿聚合酶链反应(RT＿PCR)快速诊断方法,该方法快速、灵敏,为RT＿PCR用于禽流感的临床早期确诊和分子流行病学调查奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感 NP基因 rt-pcr A型流感病毒核蛋白 分子流行病学调查 逆转录-聚合酶链反应
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欧洲型PRRSV RT-PCR检测方法的建立及ORF7基因序列比较 被引量：15
12
作者 张战峰 李肖梁 +2 位作者 张莹 查云侠 方维焕 《动物医学进展》 CSCD 2007年第5期26-29,共4页
根据PRRSV（LV株）ORF7基因设计一对引物，建立了欧洲型PRRSV的RT-PCR检测方法。通过对50份组织病料检测及其ORF7基因序列分析，结果表明，有4份组织病料扩增出欧洲型PRRSV576bp特异性片段，阳性率为8％，其ORF7基因序列和氨基酸推导序... 根据PRRSV（LV株）ORF7基因设计一对引物，建立了欧洲型PRRSV的RT-PCR检测方法。通过对50份组织病料检测及其ORF7基因序列分析，结果表明，有4份组织病料扩增出欧洲型PRRSV576bp特异性片段，阳性率为8％，其ORF7基因序列和氨基酸推导序列与欧洲型PRRSV弱毒疫苗株（AMER-VAC-PRRS）的同源性分别在99．0％～99．7％和98．5％～100％之间，而与标准毒株（LV）的同源性分别在95．9％～96．6％和96．99，6～97．7%之间。表明该PT-PCR体系适合组织病料中欧洲型PRRSV的直接检测，同时也证实了欧洲型PRRSV在我国的存在，并且与疫苗株之间具有较高的同源性。 展开更多
关键词 欧洲型猪繁殖与呼吸综合征 逆转录-聚合酶链反应 ORF7基因
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猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测方法的建立 被引量：5
13
作者 王劭 陈少莺 +5 位作者 林锋强 程晓霞 江斌 陈仕龙 林琳 朱小丽 《动物医学进展》 CSCD 2007年第11期12-16,共5页
根据GenBank上发表的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)基因序列,针对TGEVN基因全序列设计合成了一对引物,以TGEV疫苗株为模板,建立了检测TGEV的RT-PCR方法。应用该方法对TGEV疫苗株RNA进行扩增,获得与预期大小相符,长度为1168bp的特异性目的片... 根据GenBank上发表的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)基因序列,针对TGEVN基因全序列设计合成了一对引物,以TGEV疫苗株为模板,建立了检测TGEV的RT-PCR方法。应用该方法对TGEV疫苗株RNA进行扩增,获得与预期大小相符,长度为1168bp的特异性目的片段;测序结果与已报道的TGEV不同毒株序列的同源性为95%～97%;敏感性测定结果为可扩增到18pg的TGEVN基因cDNA。结果表明,建立的RT-PCR方法对TGEV的检测敏感性高、特异性强,可用于TGEV感染的诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 传染性胃肠炎病毒 逆转录-聚合酶链反应 检测 猪
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RT-PCR法检测外周原始神经外胚叶瘤石蜡包埋组织中EWS-FLI1融合基因 被引量：7
14
作者 贡其星 范钦和 +1 位作者 张智弘 张炜明 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期151-154,共4页
目的　研究嵌套式逆转录-聚合酶链反应(nestedRT- PCR)方法检测外周原始神经外胚叶瘤石蜡包埋组织中EWS -FLI1融合基因的可行性和临床意义。方法　收集12例外周原始神经外胚叶瘤及8例对照肿瘤标本,均为福尔马林固定石蜡包埋组织。EWS -F... 目的　研究嵌套式逆转录-聚合酶链反应(nestedRT- PCR)方法检测外周原始神经外胚叶瘤石蜡包埋组织中EWS -FLI1融合基因的可行性和临床意义。方法　收集12例外周原始神经外胚叶瘤及8例对照肿瘤标本,均为福尔马林固定石蜡包埋组织。EWS -FLI1融合基因检测方法采用嵌套式RT- PCR法。看家基因β-actin为内参照。结果　9例标本检测到β-actin片断, 6例检测到EWS FLI1融合基因表达,其中,“1型”4例,“2型”2例。8例对照肿瘤中未检测到EWS- FLI1基因。结论　在外周原始神经外胚叶瘤石蜡包埋组织中,用嵌套式RT- PCR检测EWS- FLI1融合基因是可行的方法,检测结果对肿瘤鉴别诊断和预后判断有意义。 展开更多
关键词 外周康始神经外胚叶瘤 EWS-FLI1融合基因 嵌套式逆转录-聚合酶链反应
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RT-PCR检测外周血K-ras基因突变和CA-199、CA-50联合检测在胰腺癌诊断中的作用 被引量：3
15
作者 练乐尧 徐泽宽 +2 位作者 蒋奎荣 卢春 苗毅 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期228-230,248,共4页
目的:研究外周血K鄄ras基因突变和CA鄄199、CA鄄50联合检测在胰腺癌诊断中的作用。方法:选择同一时期住院的14例胰腺癌患者和16例非胰腺癌患者,同时应用反转录PCR检测外周血K鄄ras基因突变和CA鄄199、CA鄄50检测,统计分析检测结果。结果... 目的:研究外周血K鄄ras基因突变和CA鄄199、CA鄄50联合检测在胰腺癌诊断中的作用。方法:选择同一时期住院的14例胰腺癌患者和16例非胰腺癌患者,同时应用反转录PCR检测外周血K鄄ras基因突变和CA鄄199、CA鄄50检测,统计分析检测结果。结果:外周血K鄄ras基因突变检测对胰腺癌诊断的敏感度和特异度分别为42.9%和93.8%,胰腺癌患者CA鄄199、CA鄄50二者检测结果差异无显著性,K鄄ras基因突变和CA鄄199联合检测系列试验诊断胰腺癌的敏感度和特异度分别为35.7%和93.8%,平行试验的敏感度和特异度分别为78.6%和62.5%。部分胰腺癌患者外周血K鄄ras基因的检测结果和CA鄄199、CA鄄50值与胰腺癌病期呈一定的相关性。结论:RT鄄PCR检测外周血K鄄ras基因突变和CA鄄199联合检测可以弥补单一检测的不足,部分结果与临床病期有一定相关,有助于胰腺癌的辅助诊断,但敏感度偏低,应用临床还需进一步研究。 展开更多
关键词 胰腺癌 K-RAS基因 逆转录-聚合酶链反应 CA-199 CA-50
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仙台病毒RT-PCR检测方法的建立及灰仓鼠中流行情况调查 被引量：5
16
作者 李晓波 付瑞 +5 位作者 王吉 卫礼 邢进 冯育芳 岳秉飞 贺争鸣 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第12期18-22,共5页
目的建立仙台病毒(SV)RT-PCR检测方法,并对灰仓鼠仙台病毒感染情况进行调查。方法根据NCBI发表的SV(gi:9627219)基因组序列设计引物,建立RT-PCR方法,对方法的特异性和灵敏性进行验证,并用该方法检测60份灰仓鼠的肺脏样本。结果建立的SV ... 目的建立仙台病毒(SV)RT-PCR检测方法,并对灰仓鼠仙台病毒感染情况进行调查。方法根据NCBI发表的SV(gi:9627219)基因组序列设计引物,建立RT-PCR方法,对方法的特异性和灵敏性进行验证,并用该方法检测60份灰仓鼠的肺脏样本。结果建立的SV RT-PCR方法显示有较好的敏感性和特异性:以仙台病毒为模板扩增产生197 bp的单一目的条带,经测序比对与NCBI数据库中SV相关序列的一致率为98%,而以猴副流感病毒(SV5)、犬瘟热病毒、小鼠肺炎病毒、呼肠孤病毒III型及腮腺炎病毒为对照无任何条带产生;能检出的SVcDNA最低浓度是96.8 ng/mL;用该方法检测60份灰仓鼠,SV的感染率为3.33%(2/60)。结论建立的SV RT-PCR方法可用于实验类啮齿动物动物SV的常规检测,自然条件下灰仓鼠感染SV的问题不容忽视。 展开更多
关键词 仙台病毒 感染 检测 逆转录-聚合酶链反应 灰仓鼠
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RT-PCR在鸡传染性法氏囊病诊断中的应用 被引量：3
17
作者 荣俊 刘晓娜 +2 位作者 程太平 熊符 杨待建 《湖北农业科学》 北大核心 2001年第6期68-69,共2页
为探讨本实验室建立的RT -PCR法对目前流行的鸡传染性法氏囊病的诊断效果 ,采用该法对 7个养鸡场的 12个病死鸡法氏囊标本进行了检测 ,诊断为传染性法氏囊病毒感染。检出率达 10 0 % ,无假阳性现象发生。结果表明 ,本检验方法对目前流... 为探讨本实验室建立的RT -PCR法对目前流行的鸡传染性法氏囊病的诊断效果 ,采用该法对 7个养鸡场的 12个病死鸡法氏囊标本进行了检测 ,诊断为传染性法氏囊病毒感染。检出率达 10 0 % ,无假阳性现象发生。结果表明 ,本检验方法对目前流行的超强毒株和变异株均有很高的灵敏度和特异性 ,可以在兽医临床工作中推广使用。 展开更多
关键词 逆转录-聚合酶链反应 鸡 传染性法氏囊病 诊断
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不典型慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因的RT-PCR研究 被引量：2
18
作者 李戈 宋玉华 +5 位作者 马小彤 钱林生 薛艳萍 韩明哲 孔建 吴克复 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1996年第3期290-293,共4页
应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对30例慢性粒细胞白血病(CML)患者的bcr-abl融合基因进行了检测,并结合临床、血液学、细胞化学和细胞遗传学等指标对4例Ph^-CML进行了分析,其中的1例t(7;22)(q22,q24)易位为国内外首次报道。结果表明,Ph... 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对30例慢性粒细胞白血病(CML)患者的bcr-abl融合基因进行了检测,并结合临床、血液学、细胞化学和细胞遗传学等指标对4例Ph^-CML进行了分析,其中的1例t(7;22)(q22,q24)易位为国内外首次报道。结果表明,Ph^-/bcr^+CML和具有变异型Ph染色体的CML与Ph^+CML之间有较多相近之处,如白细胞与血小板数较多,N-ALP较低,脾肿大明显,发病年龄较轻,易发生急变;Ph^-/bcr^-CML与Ph^+CML之间差异显著,如发病年龄较高,脾中度肿大,白细胞数多者较少,急变较少见。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 PH染色体 BCR-ABL融合基因 逆转录-聚合 酶链反应
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猪内源性逆转录病毒在家猪细胞中的检测 被引量：1
19
作者 冯瑞兵 王健 +2 位作者 段钟平 赵军 刘青 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期470-473,共4页
目的研究家猪(大白猪×杜洛克猪)体内猪内源性逆转录病毒(PERV)的存在和表达。方法采用PCR方法检测猪外周血单个核细胞、肝细胞中PERV前病毒序列;用RT-PCR方法检测家猪血清中PERVRNA序列。结果PCR方法测定猪外周血单个核细胞、肝细... 目的研究家猪(大白猪×杜洛克猪)体内猪内源性逆转录病毒(PERV)的存在和表达。方法采用PCR方法检测猪外周血单个核细胞、肝细胞中PERV前病毒序列;用RT-PCR方法检测家猪血清中PERVRNA序列。结果PCR方法测定猪外周血单个核细胞、肝细胞阳性率分别为40%、100%,RT-PCR方法测定家猪血清阳性率为33.3%。结论家猪体内有PERV的存在和表达,但其外周血单个核细胞、血清PERV的阳性率分别较中国实验用小型猪、大白猪为低,说明不同猪种之间PERV的存在和表达存在较大差异,筛选PERV基因拷贝数低甚至无PERV存在和表达的猪种是今后猪器官细胞医学应用的一个方向。 展开更多
关键词 家猪 猪内源性逆转录病毒 聚合酶链反应 逆转录-聚合酶链反应
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应用RT-PCR分析真性红细胞增多症病人TCR Vβ亚家族T细胞的表达 被引量：1
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作者 杨力建 李扬秋 +4 位作者 许敏华 祁明芳 郁志 陈少华 廖继东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期76-78,共3页
近几年,国外相继报道对T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族基因的分析,从而了解肿瘤或自身免疫性疾病病人的细胞免疫功能状态,并为临床上进一步开展特异性免疫治疗提供新的实验依据。本文利用RT-PCR方法分析3例真性红细胞增多症病人Vβ亚家族... 近几年,国外相继报道对T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族基因的分析,从而了解肿瘤或自身免疫性疾病病人的细胞免疫功能状态,并为临床上进一步开展特异性免疫治疗提供新的实验依据。本文利用RT-PCR方法分析3例真性红细胞增多症病人Vβ亚家族T细胞的表达情况。 展开更多
关键词 T细胞受体VΒ基因 T细胞 真性红细胞增多症 逆转录-聚合酶链反应
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