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猴泡沫病毒(SFV)RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用
1
作者
栗景蕊
付瑞
+1 位作者
李晓波
贺争鸣
《中国比较医学杂志》
CAS
2010年第1期46-51,I0003,共7页
目的建立实验猴群及相关生物制品猴泡沫病毒(SFV)的PCR检测方法。方法选择SFV-1、SFV-3、SFVCPZ前病毒序列的pol基因同源性较高的区域设计嵌套引物对SFV-1毒种进行RT-nestedPCR扩增并克隆测序,以确定其准确性,通过验证方法的特异性和敏...
目的建立实验猴群及相关生物制品猴泡沫病毒(SFV)的PCR检测方法。方法选择SFV-1、SFV-3、SFVCPZ前病毒序列的pol基因同源性较高的区域设计嵌套引物对SFV-1毒种进行RT-nestedPCR扩增并克隆测序,以确定其准确性,通过验证方法的特异性和敏感性,初步应用该方法对恒河猴外周血淋巴细胞(PBLs),常用猴肾传代细胞及猴源性生物制品进行检测。结果经RT-nestedPCR扩增出的片断与SFV-1 cDNA序列同源性达到99%,对10只恒河猴的检测结果为5只阳性,5只阴性,对常用猴肾传代细胞及脊髓灰质炎疫苗的检测结果均为阴性。结论所建立的SFV RT-nestedPCR检测方法能准确的检测出恒河猴SFV的感染情况,对控制实验猴群的质量具有重要意义。该方法可用于检测猴源性生物制品中SFV的污染情况,为保证生物制品应用的安全性提供一定依据。
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关键词
猴泡沫病毒
逆转录-巢式pcr
外周血淋巴细胞
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职称材料
儿童急性淋巴细胞白血病常见融合基因的检测及意义
被引量：
5
2
作者
朱晓华
高怡瑾
+1 位作者
杨毅
吴玥
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第8期644-647,659,共5页
目的建立逆转录-巢式PCR检测融合基因的方法,检测4种常见融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病中阳性率,并对阳性患儿进行初步临床资料分析。方法对收治的92例初发的急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿,于化疗开始前抽取骨髓标本1.5～2.0 ml,采...
目的建立逆转录-巢式PCR检测融合基因的方法,检测4种常见融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病中阳性率,并对阳性患儿进行初步临床资料分析。方法对收治的92例初发的急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿,于化疗开始前抽取骨髓标本1.5～2.0 ml,采用巢式RT-PCR方法检测最常见的4种融合基因:TEL/AML1、E2A/PBX1、m-BCR/ABL和AF4/MLL。结果92例ALL患儿中TEL/AML1阳性21例,阳性率22.8%,占B细胞性ALL的24.7%(20/81例);6例E2A/PBX1阳性(6.5%),在前B细胞性ALL中占20.0%(3/15例);2例AF4/MLL阳性(2.2%),在婴儿ALL中占33.3%(2/6例);仅检测到1例m-BCR/ABL阳性(1.1%)。结论巢式RT-PCR方法是检测融合基因有效、敏感的方法。TEL/AML1在儿童ALL中阳性率最高,尤其是在B细胞性ALL中,该融合基因阳性的患儿病情较轻。
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关键词
急性淋巴细胞白血病
融合基因
逆转录-巢式pcr
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职称材料
题名
猴泡沫病毒(SFV)RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用
1
作者
栗景蕊
付瑞
李晓波
贺争鸣
机构
中国药品生物制品检定所
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2010年第1期46-51,I0003,共7页
文摘
目的建立实验猴群及相关生物制品猴泡沫病毒(SFV)的PCR检测方法。方法选择SFV-1、SFV-3、SFVCPZ前病毒序列的pol基因同源性较高的区域设计嵌套引物对SFV-1毒种进行RT-nestedPCR扩增并克隆测序,以确定其准确性,通过验证方法的特异性和敏感性,初步应用该方法对恒河猴外周血淋巴细胞(PBLs),常用猴肾传代细胞及猴源性生物制品进行检测。结果经RT-nestedPCR扩增出的片断与SFV-1 cDNA序列同源性达到99%,对10只恒河猴的检测结果为5只阳性,5只阴性,对常用猴肾传代细胞及脊髓灰质炎疫苗的检测结果均为阴性。结论所建立的SFV RT-nestedPCR检测方法能准确的检测出恒河猴SFV的感染情况,对控制实验猴群的质量具有重要意义。该方法可用于检测猴源性生物制品中SFV的污染情况,为保证生物制品应用的安全性提供一定依据。
关键词
猴泡沫病毒
逆转录-巢式pcr
外周血淋巴细胞
Keywords
Simian foamy virus RT
-
nested
pcr
Peripheral blood lymphocytes
分类号
Q939.47 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
儿童急性淋巴细胞白血病常见融合基因的检测及意义
被引量：
5
2
作者
朱晓华
高怡瑾
杨毅
吴玥
机构
复旦大学附属儿科医院
出处
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第8期644-647,659,共5页
文摘
目的建立逆转录-巢式PCR检测融合基因的方法,检测4种常见融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病中阳性率,并对阳性患儿进行初步临床资料分析。方法对收治的92例初发的急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿,于化疗开始前抽取骨髓标本1.5～2.0 ml,采用巢式RT-PCR方法检测最常见的4种融合基因:TEL/AML1、E2A/PBX1、m-BCR/ABL和AF4/MLL。结果92例ALL患儿中TEL/AML1阳性21例,阳性率22.8%,占B细胞性ALL的24.7%(20/81例);6例E2A/PBX1阳性(6.5%),在前B细胞性ALL中占20.0%(3/15例);2例AF4/MLL阳性(2.2%),在婴儿ALL中占33.3%(2/6例);仅检测到1例m-BCR/ABL阳性(1.1%)。结论巢式RT-PCR方法是检测融合基因有效、敏感的方法。TEL/AML1在儿童ALL中阳性率最高,尤其是在B细胞性ALL中,该融合基因阳性的患儿病情较轻。
关键词
急性淋巴细胞白血病
融合基因
逆转录-巢式pcr
Keywords
acute lymphoblastic leukemia
fusion gene
nested reverse transcriptase polymerase chain reaction
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猴泡沫病毒(SFV)RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用
栗景蕊
付瑞
李晓波
贺争鸣
《中国比较医学杂志》
CAS
2010
0
在线阅读
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职称材料
2
儿童急性淋巴细胞白血病常见融合基因的检测及意义
朱晓华
高怡瑾
杨毅
吴玥
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
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