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应用逆转录酶链反应对我国流行性出血热病毒分型 被引量:1
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作者 王玉梅 郝富勇 +2 位作者 张雪梅 韩亮 盛军 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期26-27,共2页
针对我国流行性出血热病毒的S片段核蛋白 (NP)编码基因保守核苷酸序列 ,合成了一对引物 ,扩增出编码核蛋白的 5 90bp碱基。扩增的II型产物存在限制性内切酶PstI的酶切位点 ,而I型产物不存在。因此 ,用酶切扩增产物的方法达到病毒分型的... 针对我国流行性出血热病毒的S片段核蛋白 (NP)编码基因保守核苷酸序列 ,合成了一对引物 ,扩增出编码核蛋白的 5 90bp碱基。扩增的II型产物存在限制性内切酶PstI的酶切位点 ,而I型产物不存在。因此 ,用酶切扩增产物的方法达到病毒分型的目的。试验提取 8份鼠脑传代毒种 ,1份细胞培养物和 2 5份病人血清中的出血热病毒RNA ,同时做 6份正常人血清对照 ,经逆转录PCR酶切分型。试验结果同间接免疫荧光技术 (IFA)分型结果相一致 ,可特异地对我国流行性出血热病毒进行分型。 展开更多
关键词 逆转录酶链反应 流行性出血热病毒 分型 间接免疫荧光
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表皮生长因子受体配体在星形胶质细胞上的表达 被引量:1
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作者 杜婷 杨晓临 彭亮 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期500-501,504,共3页
目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)配体在星形胶质细胞上的表达。方法:采用RT-PCR技术检测星形胶质细胞上表皮生长因子、转化生长因子α、肝素结合上皮生长因子和双调蛋白的表达。结果:表皮生长因子、转化生长因子α、肝素结合上皮生长... 目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)配体在星形胶质细胞上的表达。方法:采用RT-PCR技术检测星形胶质细胞上表皮生长因子、转化生长因子α、肝素结合上皮生长因子和双调蛋白的表达。结果:表皮生长因子、转化生长因子α、肝素结合上皮生长因子在星形胶质细胞上均有表达。而双调蛋白在星形胶质细胞上无表达。结论:星形胶质细胞在促进神经发生和有丝分裂后期神经元存活和分化中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 表皮生长因子受体 逆转录酶链反应
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中国精神病人外周血博尔纳病病毒P24基因片段检测 被引量:7
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作者 徐平 谢鹏 +1 位作者 邹德智 左联 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第6期471-473,476,共4页
目的 探讨博尔纳病病毒与人类精神疾病的关系。方法 采用套式逆转录酶聚合酶链反应(nested RT-PCR)结合荧光定量(FQ)PCR检测了31例精神分裂症病人,16例情感障碍病人以及50例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中BDV P24基因片段。结果精神分... 目的 探讨博尔纳病病毒与人类精神疾病的关系。方法 采用套式逆转录酶聚合酶链反应(nested RT-PCR)结合荧光定量(FQ)PCR检测了31例精神分裂症病人,16例情感障碍病人以及50例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中BDV P24基因片段。结果精神分裂症组BDV P24基因片段阳性率为9.7%(3/31);情感障碍组(0/16)和健康组(0/50)均为阴性。精神分裂症组阳性率高于健康组,但差异无显著性意义(P>0.05)。结论 中国的精神病人中存在BDV感染,但BDV感染是否与精神分裂症发病相关有待进一步研究。 展开更多
关键词 精神分裂症 情感障碍 博尔纳病病毒 套式逆转录酶聚合酶反应 荧光定量 检测
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EMP-1基因在喉癌中的表达差异分析 被引量:6
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作者 刘业海 唐平章 +5 位作者 徐震纲 祁永发 丁芳 张立勇 王海涛 刘芝华 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期47-51,共5页
目的分析上皮膜蛋白-1(epithelialmembraneprotein-1,EMP-1)基因在喉癌中的表达差异,以进一步探讨喉癌的发病机制。方法用微阵列分析技术分析喉癌基因的差异表达情况,选取其中之一的EMP-1基因,用半定量逆转录酶-聚合酶链反应(reversetra... 目的分析上皮膜蛋白-1(epithelialmembraneprotein-1,EMP-1)基因在喉癌中的表达差异,以进一步探讨喉癌的发病机制。方法用微阵列分析技术分析喉癌基因的差异表达情况,选取其中之一的EMP-1基因,用半定量逆转录酶-聚合酶链反应(reversetranscriptasepolymerasechainreaction,RT-PCR)技术分析EMP-1基因在不同类型喉癌中的表达情况,数据分析采用SPSS软件。结果EMP-1基因在不同类型配对喉癌中皆呈低表达,明显低于相应的正常喉粘膜组织(P<0.05),EMP-1基因表达量与喉癌的分化类型、分期无明显关系(P>0.05)。结论EMP-1基因与喉癌的发病明显相关,揭示这种关系将有助于探讨喉癌的发病机制。 展开更多
关键词 喉癌 上皮膜蛋白-1基因 逆转录酶-聚合酶反应 cDNA微阵列分析
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人脑胶质瘤中Apaf-1基因启动子区甲基化的研究
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作者 吕涛 关俊宏 +2 位作者 陈铎 魏翔泰 刘云会 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期133-135,共3页
目的探讨凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)基因启动子区甲基化在脑胶质瘤中的表达及发生中的作用。方法应用半定量RT-PCR和甲基化特异性PCR分析方法分析37例脑胶质瘤及9例瘤旁非肿瘤脑组织中Apaf-1基因表达及启动子区甲基化情况。结果37例... 目的探讨凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)基因启动子区甲基化在脑胶质瘤中的表达及发生中的作用。方法应用半定量RT-PCR和甲基化特异性PCR分析方法分析37例脑胶质瘤及9例瘤旁非肿瘤脑组织中Apaf-1基因表达及启动子区甲基化情况。结果37例胶质瘤中23例Apaf-1mRNA表达下调,而瘤旁脑组织未发现Apaf-1mRNA表达明显下调或者上调;在Apaf-1基因表达明显下调的23例胶质瘤中15例出现甲基化,表达水平无明显下调的14例胶质瘤中仅4例出现甲基化,而瘤旁非肿瘤的9例脑组织中未检测到Apaf-1基因启动子甲基化。结论Apaf-1基因与脑胶质瘤的发生、发展相关,启动子区甲基化是该基因失活的重要机制。 展开更多
关键词 胶质瘤 凋亡蛋白酶活化因子1基因 逆转录酶-聚合酶反应 甲基化
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上皮性卵巢癌组织中ATF5基因的表达及其临床意义 被引量:2
6
作者 芦进荣 钱冬萌 +4 位作者 齐亚妮 丁朝霞 胡明 王斌 陈爱平 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期205-207,211,共4页
目的:探讨上皮性卵巢癌组织中ATF5(activating transcription faclor 5,ATF5)基因的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学染色法和逆转录酶聚合酶链反应(riverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法从蛋白和mRNA... 目的:探讨上皮性卵巢癌组织中ATF5(activating transcription faclor 5,ATF5)基因的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学染色法和逆转录酶聚合酶链反应(riverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法从蛋白和mRNA水平检测60例上皮性卵巢癌组织、15例良性卵巢肿瘤和9例正常卵巢组织标本中ATF5的表达差异。结果:上皮性卵巢癌组织中ATF5阳性表达率显著高于正常卵巢及卵巢良性肿瘤组织(P<0.05),且ATF5蛋白和mRNA表达强度与上皮性卵巢癌手术病理分期和组织分化程度有关。Ⅲ~Ⅳ期的阳性表达率及表达强度明显高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05);低分化组高于中分化及高分化组(P<0.05),但中分化及高分化组之间ATF5表达无显著性差异(P>0.05)。结论:ATF5在上皮性卵巢癌组织中呈高表达,其表达强度与临床分期和组织分化程度密切相关,为卵巢癌的治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌转录激活因子5逆转录酶聚合酶反应免疫组化
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Magnetic iron oxide nanoparticles carrying PTEN gene to reverse cisplatin-resistance of A549/CDDP cell lines
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作者 闵凌峰 何玲玲 +2 位作者 陈琼 俞巧 谢明萱 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2012年第2期331-339,共9页
To evaluate the feasibility of using magnetic iron oxide nanoparticle as wild PTEN gene carrier for transfection in vitro to reverse cisplatin-resistance of A549/CDDP cells, A549/CDDP cells were transfected with the w... To evaluate the feasibility of using magnetic iron oxide nanoparticle as wild PTEN gene carrier for transfection in vitro to reverse cisplatin-resistance of A549/CDDP cells, A549/CDDP cells were transfected with the wild PTEN gene expression plasmid (pGFP-PTEN) by magnetic iron nanoparticle and lipo2000. The transfection efficiency was detected by fluorescence microscope and flow cytometer. The expression levels of PTEN mRNA and protein were detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunocytochemistry analysis. The effect of PTEN transfection on cell cycle enhances the sensitivity of A549/CDDP to cisplatin and nanoparticle-mediated transfection has a higher efficiency than that of the liposome-mediated group. The apoptosis level was up-regulated in PTEN transfection group. The magnetic iron oxide nanoparticle could be used as one of the ideal gene carriers for PTEN gene delivery in vitro. PTEN can be an effective target for reversing cisplatin-resistance in lung cancer. 展开更多
关键词 magnetic iron oxide nanoparticle liposome transfection lung cancer PTEN cisplatin-resistance
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