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615小鼠MHC Ⅰ cDNA重组逆转录病毒基因治疗载体的构建和包装
被引量：
2
1
作者
龚浩
李龙江
+3 位作者
温玉明
王昌美
陈俊杰
彭文珍
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第6期404-407,共4页
目的:制备615小鼠MHCⅠ目的基因(H-2Kk)载体,获得高表达MHCⅠ分子功能的单克隆细胞株。方法:将615小鼠MHCⅠ(H-2Kk)cDNA定向连接至PLXSN逆转录病毒质粒,转染E.coli JM109,限制性酶切分析法筛选出重组质粒PLXSN-H-2Kk,继而转染PA317细胞,...
目的:制备615小鼠MHCⅠ目的基因(H-2Kk)载体,获得高表达MHCⅠ分子功能的单克隆细胞株。方法:将615小鼠MHCⅠ(H-2Kk)cDNA定向连接至PLXSN逆转录病毒质粒,转染E.coli JM109,限制性酶切分析法筛选出重组质粒PLXSN-H-2Kk,继而转染PA317细胞,经G418筛选获得抗性PA317单克隆细胞株,并转染NIH3T3细胞,依抗性NIH3T3细胞克隆数目,鉴定病毒液的滴度和PA317单克隆细胞株。结果:转染成功的病毒液滴度位于1.6×104～1.1×105 CFU/ml之间,PA317单克隆细胞株成片生长良好,并高表达H-2Kk产物。结论:H-2Kk cDNA重组逆转录病毒质粒的成功构建、包装和滴度鉴定为在615小鼠上进行恶性肿瘤的MHC Ⅰ转基因治疗奠定了物质基础。
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关键词
基因治疗
MHCⅠ目的基因
PA317细胞
基因载体
重组
逆转录病毒质粒
肿瘤治疗
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职称材料
胸苷激酶重组逆转录病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的抑制效应
2
作者
周中军
毕万里
+3 位作者
董薇
周爱儒
曹宇清
李岱宗
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
1994年第S1期83-84,共2页
胸苷激酶重组逆转录病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的抑制效应北京医科大学心血管基础研究所周中军，毕万里，董薇，周爱儒，曹宇清，李岱宗单纯疱疹胸苷激酶（ＨＳＶ－ＴＫ）可将胸苷的类似物Ｇａｎｃｉｃｌｏｖ...
胸苷激酶重组逆转录病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的抑制效应北京医科大学心血管基础研究所周中军，毕万里，董薇，周爱儒，曹宇清，李岱宗单纯疱疹胸苷激酶（ＨＳＶ－ＴＫ）可将胸苷的类似物Ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ入至细胞复制的ＤＮＡ序列中，从...
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关键词
胸苷激酶
VSMC
抑制效应
血管平滑肌细胞
逆转录病毒质粒
细胞生长
自杀基因
基础研究所
大鼠
毕万
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职称材料
题名
615小鼠MHC Ⅰ cDNA重组逆转录病毒基因治疗载体的构建和包装
被引量：
2
1
作者
龚浩
李龙江
温玉明
王昌美
陈俊杰
彭文珍
机构
四川大学华西口腔医学院
四川大学华西基础医学与法医学院分子生物学开放实验室
出处
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第6期404-407,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号 39700162)
文摘
目的:制备615小鼠MHCⅠ目的基因(H-2Kk)载体,获得高表达MHCⅠ分子功能的单克隆细胞株。方法:将615小鼠MHCⅠ(H-2Kk)cDNA定向连接至PLXSN逆转录病毒质粒,转染E.coli JM109,限制性酶切分析法筛选出重组质粒PLXSN-H-2Kk,继而转染PA317细胞,经G418筛选获得抗性PA317单克隆细胞株,并转染NIH3T3细胞,依抗性NIH3T3细胞克隆数目,鉴定病毒液的滴度和PA317单克隆细胞株。结果:转染成功的病毒液滴度位于1.6×104～1.1×105 CFU/ml之间,PA317单克隆细胞株成片生长良好,并高表达H-2Kk产物。结论:H-2Kk cDNA重组逆转录病毒质粒的成功构建、包装和滴度鉴定为在615小鼠上进行恶性肿瘤的MHC Ⅰ转基因治疗奠定了物质基础。
关键词
基因治疗
MHCⅠ目的基因
PA317细胞
基因载体
重组
逆转录病毒质粒
肿瘤治疗
Keywords
mouse MHCI transfection PA317 cell
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
胸苷激酶重组逆转录病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的抑制效应
2
作者
周中军
毕万里
董薇
周爱儒
曹宇清
李岱宗
机构
北京医科大学心血管基础研究所
出处
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
1994年第S1期83-84,共2页
文摘
胸苷激酶重组逆转录病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的抑制效应北京医科大学心血管基础研究所周中军，毕万里，董薇，周爱儒，曹宇清，李岱宗单纯疱疹胸苷激酶（ＨＳＶ－ＴＫ）可将胸苷的类似物Ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ入至细胞复制的ＤＮＡ序列中，从...
关键词
胸苷激酶
VSMC
抑制效应
血管平滑肌细胞
逆转录病毒质粒
细胞生长
自杀基因
基础研究所
大鼠
毕万
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
615小鼠MHC Ⅰ cDNA重组逆转录病毒基因治疗载体的构建和包装
龚浩
李龙江
温玉明
王昌美
陈俊杰
彭文珍
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
2
在线阅读
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职称材料
2
胸苷激酶重组逆转录病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的抑制效应
周中军
毕万里
董薇
周爱儒
曹宇清
李岱宗
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
1994
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
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导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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