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MHCⅠ类基因逆转录病毒表达载体的构建及其在造血细胞中的表达: 1; 作者吴岚晓郭坤元 +2 位作者李江琪李玉华李明《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第12期1076-1078,共3页; 目的构建BALB/c小鼠MHCⅠ类基因的逆转录病毒表达载体并探讨该基因在C57BL/6小鼠造血细胞中的表达。方法由逆转录病毒载体pMSCV介导,将BALB/c小鼠的H-2Dd基因导入C57BL/6小鼠的造血细胞中,并用逆转录聚合酶链反应和流式细胞仪检测转染... 展开更多; 关键词 MHC I类基因逆转录病毒表达载体造血细胞基因表达移植免疫学; 在线阅读下载PDF 职称材料

含野生型p53cDNA重组逆转录病毒的制备: 2; 作者李艳利王若宁 +1 位作者张一鸣陈丙莺《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期299-300,共2页; 目的:制备含野生型p53cDNA重组体的复制缺陷型逆转录病毒。方法:设计引物PCR扩增野生型p53cDNA,用T-A克隆的方法克隆入质粒载体pGEM-T,转化JM109,提取pGEM-T/p53重组体,双酶切得到野生型p53cDNA,然后再克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN,... 展开更多; 关键词野生型P53 CDNA 逆转录病毒表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

嵌合跨膜型人CD55基因的重组逆病毒表达质粒的构建被引量：1: 3; 作者杜瑞琴白云 +1 位作者黎万玲姜曼《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期48-51,共4页; 目的　构建嵌合跨膜型CD5 5基因的重组逆病毒表达质粒。方法　采用PCR技术扩增编码CD5 5信号肽及成熟蛋白胞外区 (-3 4 -3 0 4aa)的DNA片段 ,双侧引入EcoRⅠ、SspⅠ位点 ,与编码CD46分子的跨膜区及膜内区 (2 70～ 3 5 0aa)的DNA片段的5... 展开更多; 关键词嵌合跨膜型分子重组逆转录病毒表达载体 CD55基因质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

异基因MHCⅠ修饰对骨髓细胞的免疫学特性的影响被引量：2: 4; 作者吴岚晓郭坤元 +2 位作者秦煜李玉华李江琪《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期401-403,407,共4页; 目的 :观察异基因MHCⅠ修饰对骨髓细胞的免疫学特性的影响 ,探讨MHCⅠ类分子在诱导免疫耐受中的作用机制。方法 :由逆转录病毒载体pMSCV介导 ,将BALB C小鼠的MHCⅠ类分子H 2Dd 基因导入C5 7BL 6小鼠的骨髓细胞 ,流式细胞仪检测转染后基... 展开更多; 关键词异基因MHCⅠ修饰骨髓细胞免疫学特性逆转录病毒表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

胰腺癌反义K-ras癌基因片段的分离和克隆被引量：1: 5; 作者蒋奎荣刘训良 +5 位作者卢春苗毅戴存才徐泽宽曾怡黄丽《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期554-557,共4页; 目的:分离及克隆胰腺癌基因组中K-ras基因片段,构建重组反义K-ras癌基因逆转录病毒载体,并探讨其意义。方法:设计2对PCR引物,分别在上下游引物中引进BamHⅠ和EcoRⅠ位点,以胰腺癌细胞株BxPC-3基因组DNA为模板扩增K-ras基因外显子1及侧... 展开更多; 关键词胰腺肿瘤逆转录病毒表达载体反义 K—ras癌基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名MHCⅠ类基因逆转录病毒表达载体的构建及其在造血细胞中的表达: 1; 作者吴岚晓郭坤元李江琪李玉华李明; 机构第一军医大学珠江医院血液科第一军医大学热带病研究室; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第12期1076-1078,共3页; 基金广东省自然科学基金(001043); 文摘目的构建BALB/c小鼠MHCⅠ类基因的逆转录病毒表达载体并探讨该基因在C57BL/6小鼠造血细胞中的表达。方法由逆转录病毒载体pMSCV介导,将BALB/c小鼠的H-2Dd基因导入C57BL/6小鼠的造血细胞中,并用逆转录聚合酶链反应和流式细胞仪检测转染后基因的表达。结果用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定证实,H2Dd基因正确插入载体pMSCV。重组逆转录病毒感染的C57BL/6小鼠造血细胞整合了BALB/c小鼠的H2Dd基因,且能转录为mRNA,在其细胞膜上有H2Dd分子的表达。结论成功构建小鼠H-2Dd编码基因的逆转录病毒载体,该基因已稳定地整合进C57BL/6小鼠造血细胞的基因组内,且在细胞中得到表达。; 关键词 MHC I类基因逆转录病毒表达载体造血细胞基因表达移植免疫学; Keywords MHC-Ⅰgene, mice clone, molecular retroviral expression vector/genetics hematopoietic cells; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名含野生型p53cDNA重组逆转录病毒的制备: 2; 作者李艳利王若宁张一鸣陈丙莺; 机构南京医科大学生物化学教研室; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期299-300,共2页; 基金江苏省教委自然科学基金资助项目(5206707); 文摘目的:制备含野生型p53cDNA重组体的复制缺陷型逆转录病毒。方法:设计引物PCR扩增野生型p53cDNA,用T-A克隆的方法克隆入质粒载体pGEM-T,转化JM109,提取pGEM-T/p53重组体,双酶切得到野生型p53cDNA,然后再克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN,转化感受态大肠杆菌JM109,筛选pL(p53cDNA)SN重组体,脂质体法转染包装细胞AM12,G-418(geneticin)筛选,收集病毒液。结果:通过PCR和重组质粒酶切筛选出重组阳性克隆,收集含pL(p53cDNA)SN重组体的逆转录病毒。结论:含pL(p53cDNA)SN重组体的复制缺陷逆转录病毒可用于转染真核细胞等进一步研究。; 关键词野生型P53 CDNA 逆转录病毒表达载体; Keywords wild type p53cDNA the retroviral expression vector; 分类号 R730.5 [医药卫生—肿瘤] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嵌合跨膜型人CD55基因的重组逆病毒表达质粒的构建被引量：1: 3; 作者杜瑞琴白云黎万玲姜曼; 机构第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期48-51,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目! (3 963 0 2 96); 文摘目的　构建嵌合跨膜型CD5 5基因的重组逆病毒表达质粒。方法　采用PCR技术扩增编码CD5 5信号肽及成熟蛋白胞外区 (-3 4 -3 0 4aa)的DNA片段 ,双侧引入EcoRⅠ、SspⅠ位点 ,与编码CD46分子的跨膜区及膜内区 (2 70～ 3 5 0aa)的DNA片段的5’末端自身的StuI位点连接 ,构建嵌合跨膜型CD5 5DNA片段 ,序列测定后将此嵌合CD5 5片段与pLXSN逆病毒载体连接构建重组表达质粒 ,酶切鉴定插入片段的方向。结果　DNA序列测定证实所构建的嵌合跨膜型CD5DNA阅读框完整、连接部位序列正确 ;HindⅢ酶切鉴定得到了正向插入的CD5 5TM pLXSN重组表达质粒。结论　我们成功构建了嵌合跨膜型CD5 5DNA片段及含此片段的重组逆病毒表达载体CD5 5TM pLXSN ,为进一步在真核细胞中表达嵌合分子 ,比较研究GPI锚固型CD5 5分子与细胞活化信号转导的关系建立良好对照并为应用跨膜型的CD5 5分子对PNH进行基因治疗奠定了分子生物学基础。; 关键词嵌合跨膜型分子重组逆转录病毒表达载体 CD55基因质粒; Keywords human CD55 transmembrane form chimeric molecule recombinant retrovirus vector; 分类号 R394 [医药卫生—医学遗传学] Q75 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名异基因MHCⅠ修饰对骨髓细胞的免疫学特性的影响被引量：2: 4; 作者吴岚晓郭坤元秦煜李玉华李江琪; 机构第一军医大学珠江医院血液科第一军医大学南方医院创伤骨科; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期401-403,407,共4页; 基金广东省自然科学基金资助项目 (批准号 0 0 10 43 ); 文摘目的 :观察异基因MHCⅠ修饰对骨髓细胞的免疫学特性的影响 ,探讨MHCⅠ类分子在诱导免疫耐受中的作用机制。方法 :由逆转录病毒载体pMSCV介导 ,将BALB C小鼠的MHCⅠ类分子H 2Dd 基因导入C5 7BL 6小鼠的骨髓细胞 ,流式细胞仪检测转染后基因的表达。MTT法检测混合淋巴细胞反应 ,乳酸脱氢酶释放法测定BALB C小鼠NK细胞对H 2Dd 修饰后C5 7BL 6小鼠骨髓细胞的杀伤活性。结果 :重组逆转录病毒感染的C5 7BL 6小鼠骨髓细胞对BALB C小鼠脾细胞的刺激强度或应答程度 ,与未转染和空载体病毒感染的C5 7BL 6小鼠骨髓细胞相比都显著减弱。BALB C小鼠NK细胞对转染H 2Dd 基因后的C5 7BL 6小鼠骨髓细胞的杀伤显著降低。结论 :在骨髓移植中用受者MHCⅠ分子修饰供者骨髓细胞可能诱导免疫耐受。; 关键词异基因MHCⅠ修饰骨髓细胞免疫学特性逆转录病毒表达载体; Keywords Mice MHC Ⅰ gene Retroviral expression vector Bone marrow cells; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名胰腺癌反义K-ras癌基因片段的分离和克隆被引量：1: 5; 作者蒋奎荣刘训良卢春苗毅戴存才徐泽宽曾怡黄丽; 机构南京医科大学第一附属医院普外科南京医科大学微生物与免疫学学系; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期554-557,共4页; 文摘目的:分离及克隆胰腺癌基因组中K-ras基因片段,构建重组反义K-ras癌基因逆转录病毒载体,并探讨其意义。方法:设计2对PCR引物,分别在上下游引物中引进BamHⅠ和EcoRⅠ位点,以胰腺癌细胞株BxPC-3基因组DNA为模板扩增K-ras基因外显子1及侧翼序列,并采用重组DNA技术将目的基因插入逆转录病毒载体LZRSpBMN-Z中,并经菌液PCR和限制性内切酸酶切鉴定。结果:K-ras基因外显子1及侧翼序列已成功地克隆入LZRSpBMN-Z中。结论:LZRSpBMN-Z是胰腺癌反义基因治疗中新型候选载体之一。应用PCR方法获取反义K-ras目的基因外显子1方便可行,可用于重组反义K-ras癌基因逆转录病毒载体的构建。; 关键词胰腺肿瘤逆转录病毒表达载体反义 K—ras癌基因克隆; Keywords pancreatic carcinoma retroviral vector antisense K-ras gene cloning; 分类号 R735.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	MHCⅠ类基因逆转录病毒表达载体的构建及其在造血细胞中的表达	吴岚晓郭坤元李江琪李玉华李明	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	含野生型p53cDNA重组逆转录病毒的制备	李艳利王若宁张一鸣陈丙莺	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	嵌合跨膜型人CD55基因的重组逆病毒表达质粒的构建	杜瑞琴白云黎万玲姜曼	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	异基因MHCⅠ修饰对骨髓细胞的免疫学特性的影响	吴岚晓郭坤元秦煜李玉华李江琪	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	胰腺癌反义K-ras癌基因片段的分离和克隆	蒋奎荣刘训良卢春苗毅戴存才徐泽宽曾怡黄丽	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料