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Lacticaseibacillus paracasei ZhangΔpglX连续传代过程中的代谢特性
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作者 杨书维 乔嘉祺 张文羿 《食品科学》 北大核心 2025年第14期103-110,共8页
本研究旨在探究DNA甲基转移酶突变体副干酪乳酪杆菌ZhangΔpglX(Lacticaseibacillus paracasei ZhangΔpglX)连续传代后的代谢物变化,探索其在传代过程中可能的代谢调控机制。通过对菌株进行连续传代培养,监测菌株形态特征和碳水化合物... 本研究旨在探究DNA甲基转移酶突变体副干酪乳酪杆菌ZhangΔpglX(Lacticaseibacillus paracasei ZhangΔpglX)连续传代后的代谢物变化,探索其在传代过程中可能的代谢调控机制。通过对菌株进行连续传代培养,监测菌株形态特征和碳水化合物代谢能力变化。利用超高效液相色谱-质谱技术,结合主成分分析和正交偏最小二乘判别分析方法,对不同代时的代谢物进行定性分析。通过京都基因与基因组百科全书数据库注释,识别显著差异代谢物及其所涉及的关键代谢通路,进行差异代谢物的鉴定与分析。在连续传代过程中,L.paracasei ZhangΔpglX的表型展现出稳定遗传的特性,但代谢特征随生长代时的增加而发生变化。分析发现差异代谢物主要富集在有机杂环化合物、核苷、核苷酸及其类似物以及脂质和类脂分子,且核苷酸代谢途径是最主要的富集通路,与差异代谢物的富集状况相符。这些结果表明L.paracasei ZhangΔpglX可能通过调整代谢途径适应环境变化,研究结果可为理解乳杆菌在适应性进化过程中的代谢通路变化提供新见解。 展开更多
关键词 副干酪乳酪杆菌 连续传代 代谢组学 DNA甲基化
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干酪乳酪杆菌Zhang连续传代过程中的遗传稳定性研究
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作者 郑新飞 刘凯龙 +2 位作者 黄天 姚国强 张和平 《食品与生物技术学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期55-63,共9页
【目的】评估干酪乳酪杆菌Zhang(Lactobacillus casei Zhang,LCZ)在连续传代培养过程中的遗传稳定性。【方法】在MRS液体培养基中连续培养LCZ 100代,分别在第0、25、50、75、100代取样,分析其菌体形态、碳水化合物利用情况及基因组变化... 【目的】评估干酪乳酪杆菌Zhang(Lactobacillus casei Zhang,LCZ)在连续传代培养过程中的遗传稳定性。【方法】在MRS液体培养基中连续培养LCZ 100代,分别在第0、25、50、75、100代取样,分析其菌体形态、碳水化合物利用情况及基因组变化。【结果】LCZ在第0、25、50、75、100代的菌体形态及碳水化合物利用情况无显著差异。基因组大小和GC占比在不同代数与原始基因组相比均无显著差异。SNP突变分析显示,不同代数的LCZ基因组高度保守,突变频率较低。平均核苷酸一致性(ANI)和系统发育树结果表明,不同代数的LCZ与原始基因组亲缘关系接近。不同代数的菌株所注释到的碳水化合物活性酶(CAZymes)无显著差异,表明其碳水化合物利用能力一致。【结论】LCZ在连续传代过程中表现出较高的遗传稳定性。 展开更多
关键词 干酪乳酪杆菌Zhang 基因组 连续传代 MRS液体培养基 遗传稳定性
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益生菌Lactobacillus plantarum P-8长期连续传代1000代过程中稳定性的研究 被引量:4
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作者 孔亚楠 张文羿 +3 位作者 白梅 乌云 赵亚荣 张和平 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2013年第4期15-18,共4页
长期连续传代是衡量微生物稳定性的经典方法之一。将益生菌Lacobacillus plantarum P-8(L.plantarum P-8)在普通和碳源限制性MRS培养基中连续传代1 000代,结合其在传代过程中细胞形态、活菌数、浊度和菌株活力的变化对该菌表型特征的稳... 长期连续传代是衡量微生物稳定性的经典方法之一。将益生菌Lacobacillus plantarum P-8(L.plantarum P-8)在普通和碳源限制性MRS培养基中连续传代1 000代,结合其在传代过程中细胞形态、活菌数、浊度和菌株活力的变化对该菌表型特征的稳定性进行了综合评价。实验结果表明,连续传1 000代后,L.plantarum P-8在两种培养基中的细胞形态与原始菌株相比没有发生变化;活菌数与浊度随培养代数的增加均呈波动性变化,但总数基本维持不变;菌株活力在传代过程中呈波动性变化,但差异不显著(P>0.05)。以上研究数据揭示益生菌L.plantarum P-8具有良好的稳定性。 展开更多
关键词 益生菌Lactobacillus PLANTARUM P-8 连续传代 表型特征 稳定性
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斑玉蕈菌种连续传代对其生产性能的影响 被引量:4
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作者 林辉 詹森然 +3 位作者 李佳欢 金文松 孙淑静 胡开辉 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第5期89-93,共5页
为了研究连续传代对斑玉蕈菌种生产性能的影响,确定斑玉蕈生产菌种用种代数,通过模仿工厂制备固体菌种的方法,将亲本菌种(0代)进行连续传代培养制备10代菌种,以0代为对照,测定不同传代次数菌种的生理生化参数(菌丝生长速度、可溶性蛋白... 为了研究连续传代对斑玉蕈菌种生产性能的影响,确定斑玉蕈生产菌种用种代数,通过模仿工厂制备固体菌种的方法,将亲本菌种(0代)进行连续传代培养制备10代菌种,以0代为对照,测定不同传代次数菌种的生理生化参数(菌丝生长速度、可溶性蛋白质含量、还原糖含量、基质降解酶活力)与出菇产量的变化。结果表明,0~4代菌种的生长速度基本一致,5~10代菌种的菌丝生长速度逐渐降低,第10代菌种生长速度相对亲本菌株降低27%。同时还原糖与可溶性蛋白分泌量逐渐减少,中性蛋白酶、漆酶、木聚糖酶活力也大幅度降低;与0~4代菌种的纤维素酶活力相比,5~10代菌种的酶活力逐渐增加。在农艺性状表现上,0~4代菌种的产量高,均在55 g/瓶以上,菇蕾数、菇数多,整齐度好;5~10代菌种产量逐渐降低,第10代产量仅为28.7 g/瓶,出菇蕾数、菇数、成品菇比例随传代次数逐渐降低。研究表明,斑玉蕈菌种继代培养4代以内的菌种生产特性良好,5代以后生产性能逐渐退化。 展开更多
关键词 斑玉蕈 连续传代 生理生化参数 子实体 生产性能
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人肝癌裸鼠连续传代的病理变化特征 被引量:3
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作者 陶文照 徐冰 +1 位作者 龚志锦 倪灿荣 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第2期163-168,共6页
目的:探讨裸鼠人肝癌20年连续传代的病理变化特征。方法:裸鼠人肝癌组织模型(SMMU-LTNM)连续观察20年(1987-2007年),皮下移植瘤传至228代,建立腹腔移植瘤、肝原位移植瘤及NOD-SCID小鼠肝原位移植瘤的病理资料,经光镜、电镜、图像分析、... 目的:探讨裸鼠人肝癌20年连续传代的病理变化特征。方法:裸鼠人肝癌组织模型(SMMU-LTNM)连续观察20年(1987-2007年),皮下移植瘤传至228代,建立腹腔移植瘤、肝原位移植瘤及NOD-SCID小鼠肝原位移植瘤的病理资料,经光镜、电镜、图像分析、染色体分析、周围血液AFP检测等方法分析病理变化特征。结果:(1)上述4种肿瘤模型的局部侵袭和转移均长期存在:皮下移植瘤的局部侵袭率为59.70%(40/67),肺内转移率为37.10%(23/62);腹腔移植瘤的肺内转移率为59.02%(36/61);肝原位移植瘤的肝内转移率为18.18%(4/22),肺内转移率为31.82%(7/22);NOD-SCID小鼠肝原位移植瘤的肺内转移率为53.85%。(2)皮下移植瘤的组织学变化:第10代前的瘤细胞分化和组织结构与原人肝癌近似,以Ⅱ级分化、粗梁型为主;第11代至225代瘤细胞以分化Ⅲ级、团块型为主,电镜下亦证实瘤细胞分化更差。(3)AFP检测第32代前为92500μg/L,第33代至130代AFP下降为6729μg/L,220代AFP检测为1000~5000μg/L。(4)腹腔移植瘤的瘤细胞群体与肺转移瘤的瘤细胞群体DNA含量分布范围明显增宽,2C~6C不等,峰值明显右移,前者的分布范围比后者更宽;DNA含量分别为2.60±0.20和2.10±0.26。(5)染色体检测,第55~206代(相隔12年)部分瘤细胞染色体变为裸鼠染色体。结论:裸鼠皮下移植瘤可连续传代20年,局部侵袭及转移的恶性生物学行为不变;瘤细胞分化更差,AFP下降,部分瘤细胞染色体变为裸鼠染色体。这些病理变化可能与裸鼠内环境影响和瘤细胞的多潜能分化有关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 裸鼠 连续传代 病理变化
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连续传代时感染斜纹夜蛾核多角体病毒不同分离株的毒力变化 被引量:2
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作者 郭慧芳 方继朝 +2 位作者 王节萍 刘宝生 钟万芳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2007年第1期71-73,共3页
关键词 感染斜纹夜蛾核多角体病毒 分离株 连续传代 毒力
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益生菌Lactobacillus casei Zhang在常规培养条件下连续传代1000代过程中稳定性研究 被引量:2
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作者 张文羿 白梅 张和平 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2013年第11期16-18,共3页
以益生菌Lactobacillus casei Zhang为研究对象,通过观察该菌株在普通MRS培养基中连续传代1 000代期间细胞形态、菌落形态、活菌数、浊度和菌株活力的变化对其稳定性进行了初步评价。结果表明,L.casei Zhang在1000代期间细胞形态与菌落... 以益生菌Lactobacillus casei Zhang为研究对象,通过观察该菌株在普通MRS培养基中连续传代1 000代期间细胞形态、菌落形态、活菌数、浊度和菌株活力的变化对其稳定性进行了初步评价。结果表明,L.casei Zhang在1000代期间细胞形态与菌落形态没有发生变化;活菌数、浊度均和菌株活力随培养代数的增加呈现波动性变化,但波动幅度较小,总数基本维持不变。上述研究结果初步表明L.casei Zhang具有良好的稳定性,暗示其可用于产业化生产。 展开更多
关键词 益生菌 LACTOBACILLUS CASEI ZHANG 连续传代 稳定性
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人脐静脉内皮细胞的培养和连续传代 被引量:2
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作者 江丽芳 刘乐和 郭辉玉 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1993年第4期288-291,共4页
本实验用新生小牛视网膜提取物作血管内皮细胞生长促进剂,成功地使人脐静脉内皮细胞在体外连续培养23代以上。细胞倍增时间平均为16.6h,细胞传代时间平均为5 d,传代比率为1:2~1:3。用ABC法证明细胞内存在Ⅷ因子相关抗原(FⅧr-Ag),透射... 本实验用新生小牛视网膜提取物作血管内皮细胞生长促进剂,成功地使人脐静脉内皮细胞在体外连续培养23代以上。细胞倍增时间平均为16.6h,细胞传代时间平均为5 d,传代比率为1:2~1:3。用ABC法证明细胞内存在Ⅷ因子相关抗原(FⅧr-Ag),透射电镜下可见胞浆内含WP(Weibe1-Palade)小体,证实所培养的细胞为血管内皮细胞。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 血管内皮细胞 Ⅷ因子相关抗原 胞浆 培养的细胞 体外 细胞内 连续传代 连续培养 透射电镜
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甲型肝炎病毒在3株细胞中的增殖和连续传代 被引量:1
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作者 郑纪山 何亮 +3 位作者 王宏 周宗安 邓小昭 乔仁良 《医学研究生学报》 CAS 2001年第4期294-296,299,共4页
目的 :观察甲型肝炎病毒 (HAV )在 3个不同的细胞株中连续传代时的增殖特点。 方法 :将 HAV NJ- 3株先以常规传代方式适应不同的细胞株 :FRh K4细胞、PL C/ PRF/ 5细胞、2 BS,然后将适应病毒接种于细胞 ,并随细胞传代。用 EIA、IFA和... 目的 :观察甲型肝炎病毒 (HAV )在 3个不同的细胞株中连续传代时的增殖特点。 方法 :将 HAV NJ- 3株先以常规传代方式适应不同的细胞株 :FRh K4细胞、PL C/ PRF/ 5细胞、2 BS,然后将适应病毒接种于细胞 ,并随细胞传代。用 EIA、IFA和激光扫描共聚焦显微镜观察带毒细胞连续传代中的病毒增殖。 结果 :1NJ- 3株 / K4细胞于第 5代 HAAg出现阳性 ,第 17、18代时达到高峰 ,2 4代直至 35代均为阴性。 2 NJ- 3株 / 2 BS细胞仅在第 6代出现一次弱阳性 ,传至 35代均呈阴性。 3NJ- 3株 / PL C则在第 3代即可测得 HAAg,第 7代 A值达 0 .80 2 ,P/ N值13.9,并保持此水平至少 70代以上。病毒产量稳定 ,细胞形态良好。冻存 10年的 HAV/ PL C株复苏后 ,仍保持良好的产毒性能。HAV/ PL C传代或收获的最佳周期为 5天。 结论 :HAV NJ- 3株能适应三种不同的传代细胞株 ,但只能在 PL C/ PRF/ 5细胞中长期随细胞传代 。 展开更多
关键词 甲型肝炎病毒 细胞培养 连续传代 激光扫描共聚焦显微术
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猪瘟病毒石门株在ST细胞连续传代后E0基因变异分析
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作者 孙永科 胡超英 +2 位作者 林明星 陆欣然 杨玉艾 《动物医学进展》 北大核心 2016年第6期13-17,共5页
为了解猪瘟病毒(CSFV)石门(Shimen)株连续传代后变异情况,根据已发表的CSFV E0基因序列(AF092448.2),设计合成引物,以在ST细胞中连续传代培养的CSFV石门株细胞毒总RNA为模板,每5代通过RT-PCR方法扩增病毒的E0基因,测定其核苷酸序列和氨... 为了解猪瘟病毒(CSFV)石门(Shimen)株连续传代后变异情况,根据已发表的CSFV E0基因序列(AF092448.2),设计合成引物,以在ST细胞中连续传代培养的CSFV石门株细胞毒总RNA为模板,每5代通过RT-PCR方法扩增病毒的E0基因,测定其核苷酸序列和氨基酸序列,用DNA Star软件分析比较原代、5代、10代、15代、20代、25代接毒细胞中CSFV E0基因的变异性。结果显示,接种病毒第10代的病毒E0基因在630核苷酸位点出现变异,第15代病毒在632核苷酸位点出现变异。本研究通过分子生物学方法发现CSFV Shimen株在ST细胞连续传代过程中E0基因能保持遗传的稳定性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 连续传代 ST细胞 E0基因 变异
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CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响
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作者 夭建华 管莹 +4 位作者 高茜 米其利 朱洲海 李雪梅 缪明明 《化学与生物工程》 CAS 2012年第12期72-74,79,共4页
研究了CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响。对不同代次CHO细胞形态进行观察,并利用中性红比色法、MTT比色法检测同种受试物对不同代次CHO细胞的抑制率是否有显著差异。结果表明:随着细胞代次的升高,细胞的形态、胞浆折光性... 研究了CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响。对不同代次CHO细胞形态进行观察,并利用中性红比色法、MTT比色法检测同种受试物对不同代次CHO细胞的抑制率是否有显著差异。结果表明:随着细胞代次的升高,细胞的形态、胞浆折光性、边界、排列均发生了改变;同种受试物对CHO细胞的抑制率随细胞代次的升高呈上升趋势;中性红比色法较MTT比色法对细胞的衰老更灵敏。为了提高细胞毒性试验结果的可重复性以及可比性,细胞代次是需要控制的重要因素。 展开更多
关键词 CHO细胞 连续传代 细胞毒性 中性红比色法 MTT比色法
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以大蜡螟与人工培养基连续传代的两种斯氏线虫生物学特性比较
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作者 徐洁莲 谢汝创 《昆虫天敌》 CSCD 1992年第2期76-82,共7页
本文比较了 Steinernema carpocaprae 和 Steinernema anomali 两个种(品系)的斯氏昆虫病原线虫,分别在大蜡螟和鸡什海绵人工培养基下连续传代培养的两个种群的形态、带菌率、发育、繁殖、毒力和寻找寄主能力的差异。试验表明:同一种(品... 本文比较了 Steinernema carpocaprae 和 Steinernema anomali 两个种(品系)的斯氏昆虫病原线虫,分别在大蜡螟和鸡什海绵人工培养基下连续传代培养的两个种群的形态、带菌率、发育、繁殖、毒力和寻找寄主能力的差异。试验表明:同一种(品系)长期在蜡螟传代的线虫种群比人工培养基传代的种群的线虫体较大,在寄主昆虫内发育怏、繁殖量大。但细菌保留率、感染率、感染指数、在沙里寻找寄主并使其致死的能力稍低。上述的差异在 S.anomali 这个种尤为明显,S.car pocapsae 则差异不大。 展开更多
关键词 昆虫病原线虫 连续传代培养 大蜡螟
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基于高通量测序的连续传代富集土壤可培养菌菌群变化规律研究 被引量:6
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作者 文昌丽 曹伟伟 +3 位作者 唐雪莲 赵雯淑 贾仲君 孟磊 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期123-135,共13页
利用高通量测序技术研究连续传代富集过程中,固体和液体牛肉膏蛋白胨可培养土壤细菌多样性的变化规律,量化可培养菌占水稻土本底微生物群落的比例。通过设置常规营养和1/10低营养处理,包括常规牛肉膏蛋白胨固体培养(NA)、液体培养(NB),... 利用高通量测序技术研究连续传代富集过程中,固体和液体牛肉膏蛋白胨可培养土壤细菌多样性的变化规律,量化可培养菌占水稻土本底微生物群落的比例。通过设置常规营养和1/10低营养处理,包括常规牛肉膏蛋白胨固体培养(NA)、液体培养(NB),低营养固体培养(1/10 NA)和低营养液体培养(1/10 NB),开展连续传代富集10次,获得第1、3、5、7、10代细菌培养物并提取DNA,同时直接提取水稻土中所有微生物基因组DNA并对16S rRNA基因进行高通量测序,分析水稻土可培养菌群落变化规律及其占本底土著微生物的比例。结果表明,水稻土本底微生物多样性Chao指数为4806,在连续传代培养10次过程中,降幅最高为98.9%,其中,固体和液体可培养微生物Chao指数以第1代为最低,分别为49.7和142.0,低营养1/10固体和液体培养下,Chao指数分别为75.1和531.0。高通量测序16S rRNA基因后发现水稻土本底土著微生物共713属,连续10次传代富集培养过程中,固体和液体常规培养基中分别检测到52属和600属,低营养1/10固体和液体培养下,分别为62属和597属,可培养菌占比最高分别为8.7%和83.7%。连续第1、3、5、7和10次传代培养过程中,固体培养基每代独有微生物属分别为7、2、3、4和3属,液体培养基独有属则分别为5、1、102、44和24属,低营养1/10培养也得到了类似结果。假单胞菌属(Pseudomonas)是水稻土连续10次传代过程中绝对的优势类群,特别在固体培养基中相对丰度变幅范围为97.70%~99.47%,与水稻土本底土壤中相对丰度相比,增幅最高为74倍。低营养1/10固体条件下,随着传代次数的增加,杆菌属(Bacillus)和代尔夫特菌属(Delftia)成为优势类群,在第10代的相对丰度最高分别为18.07%和13.82%。液体连续传代10次过程中,假单胞菌属也是绝对优势类群,但与固体可培养菌相比略下降为45.48%~55.99%,梭菌属(Clostridium)则是第2大优势类群,其相对丰度范围为23.58%~42.40%,而赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)则保持相对稳定的增长趋势,其相对丰度范围为1.46%~6.74%。相反,低营养1/10液体培养下,梭菌属和赖氨酸芽孢杆菌属随着培养代数增加而急剧降低,假单胞菌属则成为绝对优势菌,而类芽孢杆菌属(Paenibacillus)则呈现随着传代次数增加而增加的趋势。上述结果表明,水稻土本底微生物多样性最多达可培养菌的96.7倍,连续传代富集培养过程中,水稻土可培养微生物Chao指数先增加后降低,固体和液体培养分别获得74和662属,可培养菌占水稻土所有微生物比例分别为10.4%和92.8%。在固体和液体传代培养过程中,假单胞菌属均占据绝对优势地位,液体可培养微生物多样性明显高于固体。低营养1/10固体和液体培养条件下,可培养微生物类群显著增加,第1代出现的部分微生物类群逐渐被某些优势菌替代,表明连续传代富集培养过程中,在不同代际均富集了生理代谢特征具有明显差异的类群,连续传代富集并不会导致种群结构同质化和单一化。 展开更多
关键词 微生物可培养法 连续传代 固液体培养基 氮素营养 高通量测序
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副干酪乳杆菌ET-22连续传代1000代的稳定性研究 被引量:1
14
作者 刘福东 桑跃 +2 位作者 洪维鍊 赵雯 张红星 《中国奶牛》 2022年第9期59-64,共6页
本研究以自主优良益生菌副干酪乳杆菌ET-22为研究对象,研究以MRS培养基进行长期连续传代过程中其表型特征和遗传信息的稳定性,跟踪检测该菌株连续传代1000代期间细胞形态、菌落形态、生长性能、发酵活力和基因序列变异情况。结果显示,... 本研究以自主优良益生菌副干酪乳杆菌ET-22为研究对象,研究以MRS培养基进行长期连续传代过程中其表型特征和遗传信息的稳定性,跟踪检测该菌株连续传代1000代期间细胞形态、菌落形态、生长性能、发酵活力和基因序列变异情况。结果显示,副干酪乳杆菌ET-22在连续传代1000代期间细胞和菌落形态没有发生变化,活菌数、浊度和菌株活力呈上下小幅度波动,变化不显著;基因组重测序分析显示,0~600代内无变异位点,800和1000代分别监测到2个和4个SNP位点,未达到菌株变异水平。研究结果表明副干酪乳杆菌ET-22在连续传代1000代期间表型特征和遗传信息维持稳定。 展开更多
关键词 副干酪乳杆菌ET-22 连续传代 表型特征 遗传信息 稳定性
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SHIV病毒在猴体内的复制与传代 被引量:6
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作者 涂新明 丛喆 +6 位作者 蒋虹 佟巍 魏强 杨贵波 孙敏 于浩 秦川 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第2期79-83,共5页
目的为建立SHIV艾滋病动物模型提供毒力较强的病毒株,将新合成的SHIV XJ02170病毒适应猴体,并增强其毒力。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查和PCR检测。选出13只无SIV,STLV1,SRV D和B病毒感染的猴。第一批实验,将SHIV前病毒DNA质... 目的为建立SHIV艾滋病动物模型提供毒力较强的病毒株,将新合成的SHIV XJ02170病毒适应猴体,并增强其毒力。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查和PCR检测。选出13只无SIV,STLV1,SRV D和B病毒感染的猴。第一批实验,将SHIV前病毒DNA质粒经肌肉注射到猴体内,每只500μg;SHIV病毒液,经静脉注射到猴体内,每只2ml。病毒质粒和病毒液各接种2只猴。当第一批猴体检出病毒后,10ml感染猴的全血,抗凝后静脉注射到第二批猴体内,当第二批猴检出病毒后再将10ml感染猴的全血静脉注射到第三批猴体内,连续传代4次。每批实验均定期采集血液标本,分别用肝素和EDTA抗凝,进行病毒分离;病毒基因PCR检测;CD4,CD8测定;病毒抗体检测。结果SHIV XJ02170病毒和SHIV XJ02170前病毒DNA质粒在猴体内的传代中均能分离出病毒;从传代猴的血浆和外周血单核细胞(PBMC)中检出了病毒DNA和RNA基因;CD4,CD8测定结果显示有暂时性倒置现象,后变为正常倒置与正常交替出现;在传代的猴血清中检测出特异性HIV病毒抗体。结论SHIV XJ02170病毒与SHIV XJ02170前病毒DNA质粒,均能在恒河猴体内复制。 展开更多
关键词 体内 复制 病毒DNA 外周血单核细胞 PCR检测 静脉注射 血清学检查 RNA基因 动物模型 病毒感染 肌肉注射 连续传代 血液标本 EDTA 病毒分离 病毒基因 抗体检测 测定结果 病毒抗体 批实验 CD8 质粒 病毒株 艾滋病 SIV SRV
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卵巢移植技术应用于胰腺癌转基因小鼠模型繁殖传代研究 被引量:2
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作者 刘英 孙强 +6 位作者 王光凤 刘进 郑逸梅 董娟 曹慧 刘全海 李厚达 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2006年第1期25-26,T0004,共3页
目的研究卵巢移植在胰腺癌转基因小鼠模型保种传代中的应用。方法通过显微手术将SV40T阳性转基因小鼠的卵巢原位移植给相同背景品系去除卵巢的正常FVB雌鼠体内。移植后与正常FVB雄鼠配种,后代以PCR检测确定阳性,统计后代发病情况。并对... 目的研究卵巢移植在胰腺癌转基因小鼠模型保种传代中的应用。方法通过显微手术将SV40T阳性转基因小鼠的卵巢原位移植给相同背景品系去除卵巢的正常FVB雌鼠体内。移植后与正常FVB雄鼠配种,后代以PCR检测确定阳性,统计后代发病情况。并对移植受体鼠进行卵巢的组织切片观察。结果实验中移植用供体鼠19只。成功移植给32只受体。其中有21只移植受体怀孕产子,得到后代159只,存活96只,PCR检测阳性34只,阳性率约为25.4%。结论卵巢移植可被用于转基因小鼠的传代繁殖保种。 展开更多
关键词 小鼠 转基因 卵巢 移植 繁殖 连续传代
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禽流感A病毒传代后致病性增强
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作者 李凯年 《畜牧兽医科技信息》 1998年第22期8-8,共1页
日本研究人员检查了连续传代对禽流感A/Whistling swan/Shimanc/499/83(H5N3)病毒致病力的影响。用该病毒经气囊给3日龄SPF鸡接种,所用的4种禽流感分离物为4e(原始分离物,低致病性,经鸡胚传代4次)、18a(经鸡气囊传代18次)、24a(18a的连续)
关键词 禽流感A病毒 致病性 分离物 器官发生 致病力 连续传代 SPF鸡 基因变异 免疫组织学 坏死性脑炎
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培养基和代次影响土壤可培养解磷菌多样性评估
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作者 夏围围 张泽霖 +5 位作者 邹萌萌 次仁拉姆 陈晓芬 孙祥鑫 王玉芳 贾仲君 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1680-1693,共14页
利用高通量测序技术,研究连续传代微生物培养过程中土壤可培养解磷菌的群落变化。采用固体和液体无机磷(IPM)和有机磷培养基(OPM)分别对供试水稻土中解磷菌进行传代富集培养,获得第一代(1st-En)、第二代(2nd-En)和第三代(3rd-En)可培养... 利用高通量测序技术,研究连续传代微生物培养过程中土壤可培养解磷菌的群落变化。采用固体和液体无机磷(IPM)和有机磷培养基(OPM)分别对供试水稻土中解磷菌进行传代富集培养,获得第一代(1st-En)、第二代(2nd-En)和第三代(3rd-En)可培养微生物集合,通过高通量测序技术分析富集物和土壤DNA中细菌16S rRNA基因,评估土壤可培养“潜在”解磷菌群落富集规律及其占本底土著细菌群落的比例。结果表明:供试土壤共检测到本底细菌群落58门、160纲、373目、575科和979属,而利用四种培养基连续传代三次共富集20门、35纲、80目、121科和223属“潜在”解磷菌。OPM富集“潜在”解磷菌分类单元数普遍高于IPM。可培养“潜在”解磷菌在土壤本底土著细菌群落中的比例在门水平最高(8.62%~25.9%),而在其他分类水平上仅为3.22%~12.5%。与本研究构建的已知解磷菌数据库进行比较,土壤本底包括已知解磷菌110属,而四种培养基连续传代三次共富集已知解磷菌83属,对土壤已知解磷菌属的培养比例为75.5%,亦表明土壤中至少约24.5%已知解磷菌属未被富集或遗漏。不同培养基和代次富集了优势解磷菌门,主要包括Proteobacteria、Actinobacteriota和Firmicutes,三者之和为97.20%~99.97%;而在属水平下,不同培养基和代次富集了具有明显生理代谢特征差异的解磷菌属。此外,培养基还富集到大量尚未被证实具有解磷功能或特征基因的细菌属140个,占可培养“潜在”解磷菌群落62.8%,其中绝大部分为数量弱势的稀有属,少数具生长富集优势,如Chelatococcus等。通过将传统微生物培养技术与高通量测序技术相结合,本研究揭示了培养基成分、培养基形态和传代次数均能强烈影响土壤可培养解磷菌多样性评估,为环境解磷菌资源的定向发掘和研究提供了参考。 展开更多
关键词 解磷菌 无机磷 有机磷 连续传代培养 高通量测序
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裸鼠体内高转移人肺癌模型的筛选 被引量:4
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作者 魏泓 吴丰春 +2 位作者 牛荣 史景泉 陈意生 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1997年第2期114-119,共6页
将人肺巨细胞癌PLA-801D裸鼠皮下移植瘤作为瘤源,建立了PLA-801D-AS裸鼠腹水鼠模型,其转移率及转移程度明显增高;以PLA-801D-AS腹水瘤模型的肺转移灶细胞进行裸鼠皮下连续传代,建立了肺转移率及程度... 将人肺巨细胞癌PLA-801D裸鼠皮下移植瘤作为瘤源,建立了PLA-801D-AS裸鼠腹水鼠模型,其转移率及转移程度明显增高;以PLA-801D-AS腹水瘤模型的肺转移灶细胞进行裸鼠皮下连续传代,建立了肺转移率及程度高于PLA-801D的PLA-801DL皮下移植瘤株。本文从肿瘤的异质性以及肿瘤与宿主相互作用的角度讨论了其肺转移提高的原因。 展开更多
关键词 肺转移 裸鼠 人肺癌 肿瘤 体内 皮下 肺巨细胞癌 筛选 连续传代 转移率
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两种方法纯化胎鼠脑室管膜下区神经干细胞的结果比较 被引量:3
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作者 周雪美 原慧萍 +3 位作者 周欣荣 曲巍 李鸿翼 邵正波 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第2期90-93,共4页
目的利用有限稀释法和连续传代法纯化体外培养的神经干细胞(neural stem cells,NSCs),并对2种方法纯化后的细胞纯度及增生能力进行比较。方法机械分离孕龄14.5d的胎鼠脑室管膜下区细胞,利用有限稀释法和连续传代法纯化NSCs,通过免疫细... 目的利用有限稀释法和连续传代法纯化体外培养的神经干细胞(neural stem cells,NSCs),并对2种方法纯化后的细胞纯度及增生能力进行比较。方法机械分离孕龄14.5d的胎鼠脑室管膜下区细胞,利用有限稀释法和连续传代法纯化NSCs,通过免疫细胞化学法鉴定纯度(Nestin阳性率)及分化细胞的类型。将2种方法纯化后的第3代NSCs以相同的密度接种后连续培养6周,每周进行细胞计数,绘制生长曲线。结果有限稀释法和连续传代法纯化NSCs的Nestin阳性率均高于原代NSCs(31.00%±0.02%),有限稀释法的Nestin阳性率(91.00%±0.03%)高于连续传代法(58.80%±0.02%,P<0.05)。有限稀释法纯化NSCs的生长曲线一直处于增生趋势,而连续传代法的细胞前3周是上升趋势,以后趋于平缓(P<0.05)。结论有限稀释法能有效纯化体外培养的NSCs,并保持细胞良好增生能力及多向分化潜能,为基因治疗视神经损伤疾病提供大量种子细胞。 展开更多
关键词 脑室管膜下区 神经干细胞 有限稀释法 连续传代 纯化
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