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小麦miR395a前体克隆、遗传转化及组织表达模式分析
1
作者
丁超杰
关园园
李成伟
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2020年第4期52-56,共5页
miRNA是一类在调控植物发育和生物及非生物逆境胁迫响应过程中发挥重要功能的非编码小RNA,为了探究miR395a在小麦抗病中的功能和作用机制,比较了不同物种中的miR395a成熟序列,分析发现miR395a在不同物种中具有较高的保守性,其中小麦与...
miRNA是一类在调控植物发育和生物及非生物逆境胁迫响应过程中发挥重要功能的非编码小RNA,为了探究miR395a在小麦抗病中的功能和作用机制,比较了不同物种中的miR395a成熟序列,分析发现miR395a在不同物种中具有较高的保守性,其中小麦与拟南芥、番茄以及大豆中的miR395a成熟序列具有高度一致性。并从小麦叶片中克隆了miR395a的前体序列,并将其连接到植物表达载体pCambia1301上,构建了miR395a前体的过量表达载体,之后通过农杆菌介导的遗传转化法,转化至小麦栽培品种(百农207)中,获得56株转基因植株,并通过PCR鉴定出11株阳性转基因植株。用RT-qPCR技术对不同组织中miR395a的表达量进行分析,结果显示,miR395a为组成型表达,但在不同组织中的表达量有差异,其中在三叶期和抽穗期叶片中的表达量较高,叶鞘中次之,旗叶中表达量最低。综上,获得了过量表达miR395a前体的小麦转基因植株,为进一步研究miR395a在小麦抗病中的功能及作用机制提供了材料来源。
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关键词
小麦
miR395a前体
过量表达载体构建
遗传转化
组织
表达
模式分析
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题名
小麦miR395a前体克隆、遗传转化及组织表达模式分析
1
作者
丁超杰
关园园
李成伟
机构
河南省粮食作物基因组编辑工程技术研究中心
河南科技学院生命科技学院
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2020年第4期52-56,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(31872129)
河南省高等学校重点科研项目(20B210005)
+1 种基金
河南省农业科技攻关项目(182102110259,202102110013)
河南科技学院百农英才项目(BNYC2018-2-16)。
文摘
miRNA是一类在调控植物发育和生物及非生物逆境胁迫响应过程中发挥重要功能的非编码小RNA,为了探究miR395a在小麦抗病中的功能和作用机制,比较了不同物种中的miR395a成熟序列,分析发现miR395a在不同物种中具有较高的保守性,其中小麦与拟南芥、番茄以及大豆中的miR395a成熟序列具有高度一致性。并从小麦叶片中克隆了miR395a的前体序列,并将其连接到植物表达载体pCambia1301上,构建了miR395a前体的过量表达载体,之后通过农杆菌介导的遗传转化法,转化至小麦栽培品种(百农207)中,获得56株转基因植株,并通过PCR鉴定出11株阳性转基因植株。用RT-qPCR技术对不同组织中miR395a的表达量进行分析,结果显示,miR395a为组成型表达,但在不同组织中的表达量有差异,其中在三叶期和抽穗期叶片中的表达量较高,叶鞘中次之,旗叶中表达量最低。综上,获得了过量表达miR395a前体的小麦转基因植株,为进一步研究miR395a在小麦抗病中的功能及作用机制提供了材料来源。
关键词
小麦
miR395a前体
过量表达载体构建
遗传转化
组织
表达
模式分析
Keywords
Wheat
Pre-miR395a
Construction of over-expression vector
Genetic transformation
Tissue expression profile analysis
分类号
S512.03 [农业科学—作物学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
小麦miR395a前体克隆、遗传转化及组织表达模式分析
丁超杰
关园园
李成伟
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2020
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