期刊文献+
共找到106篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
PdbSPL28基因过量表达提高山新杨对叶斑病的抗性
1
作者 韩峭子 陈文文 +1 位作者 陈赢男 尹佟明 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期56-66,共11页
【目的】SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein-like)是植物特有的一类转录因子,对植物生长发育以及天然免疫反应至关重要。本研究通过在山新杨中过表达PdbSPL28基因,分析比较野生型和转基因山新杨在抗病方面的表型差异,探究PdbSPL28... 【目的】SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein-like)是植物特有的一类转录因子,对植物生长发育以及天然免疫反应至关重要。本研究通过在山新杨中过表达PdbSPL28基因,分析比较野生型和转基因山新杨在抗病方面的表型差异,探究PdbSPL28基因的生物学功能及其对杨树抗病性的影响,为深入解析该基因调控杨树抗病性的分子机制提供基础。【方法】利用同源克隆获得山新杨PdbSPL28基因完整ORF序列,并利用DNA人工合成技术对该基因ORF中的miR156作用位点进行序列改造,采用酶切、连接反应分别将改造前和改造后的PdbSPL28基因序列构建过表达载体;采用Gateway技术构建亚细胞定位载体,利用烟草叶片瞬时转化系统分析PdbSPL28蛋白亚细胞定位;利用农杆菌介导的叶盘转化法获得PdbSPL28基因过量表达的转基因山新杨,基于刺伤接种法和石蜡切片技术,观察野生型和转基因山新杨对2种间座壳属病原菌(Diaporthe nobilis和D.cercidis)的抗性差异及叶片解剖结构变化并测定病情指数;制备病原菌D.nobilis孢子悬浮液,接种野生型和2个过表达株系的离体叶片,在接种后不同时间点采集样品,通过液质联用方法检测茉莉酸含量变化。【结果】山新杨PdbSPL28基因ORF全长1341 bp,序列中含有1个miR156作用位点;PdbSPL28蛋白含有保守的SBP结构域,定位于细胞核。对PdbSPL28基因ORF中miR156作用位点改造后,成功获得6个该基因过量表达的转基因株系。与野生型相比,PdbSPL28过表达山新杨对2种间座壳属病原菌的抗性明显增强。茉莉酸测定结果显示:在接种前,PdbSPL28过表达株系叶片中茉莉酸含量高于WT;但在接种96 h时,过表达株系茉莉酸含量极显著低于WT。【结论】对miR156作用位点进行序列改造,可以提高获得PdbSPL28基因过量表达转基因山新杨的概率;PdbSPL28基因过表达可以提高山新杨对间座壳属真菌引起的叶斑病抗性,茉莉酸信号途径可能在过表达株系响应D.nobilis侵染过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 山新杨 SPL28基因 过量表达 叶斑病 间座壳属
在线阅读 下载PDF
GmHSFA1基因克隆及其过量表达提高转基因大豆的耐热性 被引量:22
2
作者 陈晓军 叶春江 +6 位作者 吕慧颖 徐民新 李葳 张利明 王超 罗淑萍 朱保葛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1411-1420,共10页
热激转录因子在调节植物对逆境胁迫应答和热激蛋白基因表达方面起重要作用。采用生物信息学和比较基因组学方法结合RACE技术从大豆基因组中克隆到一个新的热激转录因子基因GmHsfA1,其cDNA全长1 781 bp,包含1个1 533 bp的开放阅读框,编... 热激转录因子在调节植物对逆境胁迫应答和热激蛋白基因表达方面起重要作用。采用生物信息学和比较基因组学方法结合RACE技术从大豆基因组中克隆到一个新的热激转录因子基因GmHsfA1,其cDNA全长1 781 bp,包含1个1 533 bp的开放阅读框,编码含有510个氨基酸残基的蛋白质(GenBank登录号为AY458843)。与其他转录因子的分子结构相似,GmHSFA1也含有4个典型的结构功能域-DNA结合域、寡聚域、核定位信号和C端激活域。BLAST分析表明,GmHSFA1与其同源性最高的番茄热激转录因子LpHSFA1之间的氨基酸序列相似性为52.46%。RT-PCR、Northern和遗传转化结果显示:1)GmHsfA1在大豆的不同组织中呈现组成型表达模式;2)常温下转基因大豆植株的GmHsfA1表达水平明显高于非转基因对照;3)GmHsfA1的过量表达激活了转基因大豆植株中热激蛋白基因GmHsp22在非诱导条件下的转录,并加强了高温胁迫下另2个热激蛋白基因GmHsp23和GmHsp70的表达;4)转GmHsfA1大豆植株的耐热温度(达52℃)明显高于非转基因植株。上述结果说明,GmHsfA1的过量表达激活或促进其下游3个热激蛋白基因的转录或表达,明显提高了转基因大豆植株的耐热能力。 展开更多
关键词 大豆 热激转录因子A1(HSFA1) 转基因 热胁迫 过量表达 耐热性
在线阅读 下载PDF
拟南芥MT-II过量表达提高抗旱性(英文) 被引量:11
3
作者 唐中华 郭晓瑞 +3 位作者 张洋洋 安志刚 于景华 祖元刚 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期415-418,共4页
富含巯基的植物II型金属硫蛋白(MT)对植物抵抗重金属胁迫具有重要作用,其中一个可能机制是金属硫蛋白可能猝灭重金属引起的氧化胁迫。利用转MT-II基因和野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株来对比研究MT在胁迫过程中通过清除氧自由... 富含巯基的植物II型金属硫蛋白(MT)对植物抵抗重金属胁迫具有重要作用,其中一个可能机制是金属硫蛋白可能猝灭重金属引起的氧化胁迫。利用转MT-II基因和野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株来对比研究MT在胁迫过程中通过清除氧自由基,特别是H2O2而对植物抗旱性的影响。研究表明,转基因型拟南芥能有效维持体内氧化—还原势,减少MDA的产生,从而缓解干旱胁迫引起的伤害,提高抗旱性。 展开更多
关键词 拟南芥 植物形状 过量表达 抗旱性 植物II型金属硫蛋白 氧化胁迫
在线阅读 下载PDF
分子伴侣过量表达对蛋白质分泌及可溶性的影响 被引量:10
4
作者 杨运桂 童芹 +4 位作者 郑卫东 钱友存 杨胜利 龚毅 mail.srcb.ac.cn 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第3期382-387,共6页
通过过量表达大肠杆菌分子伴侣 Sec B和 Gro EL,研究了它们对靶蛋白的分泌及可溶性的影响 .在过量表达 Sec B的宿主菌中 ,周质空间分泌蛋白总量较对照组提高了约 71 % ,GL- 7- ACA酰化酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约 1 .5倍 ,碱... 通过过量表达大肠杆菌分子伴侣 Sec B和 Gro EL,研究了它们对靶蛋白的分泌及可溶性的影响 .在过量表达 Sec B的宿主菌中 ,周质空间分泌蛋白总量较对照组提高了约 71 % ,GL- 7- ACA酰化酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约 1 .5倍 ,碱性磷酸酯酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约 54% ;在过量表达 Gro EL的宿主菌中 ,周质分泌蛋白总量较对照组提高了约 52 % ,青霉素 G酰化酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约 76% ,鲑鱼降钙素六聚体的可溶性组分的比例由原来的 45%增加到约 90 % ,而 MS2 -人白介素 - 3融合蛋白的包涵体有约 1 5%转变为可溶性组份 .上述结果表明 ,分子伴侣 Sec B和 Gro EL的过量表达促进了靶蛋白的分泌 ,Gro 展开更多
关键词 分子伴侣 分泌 可溶性表达 蛋白质 过量表达
在线阅读 下载PDF
拟南芥DnaJ蛋白的过量表达对细菌耐盐性的影响 被引量:6
5
作者 赵志常 张建军 +3 位作者 张皖蓉 刘震 李旭锋 杨毅 《广西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2010年第1期54-57,共4页
热激蛋白是植物在各种环境胁迫下产生的一种蛋白,其表达与多种胁迫的抗性有一定关系。从野生型拟南芥cDNA中克隆获得了编码442个氨基酸序列的DnaJ基因,其与大肠杆菌DnaJ基因含有相同的J区和半胱氨酸富集区。将DnaJ基因构建到pET32a的原... 热激蛋白是植物在各种环境胁迫下产生的一种蛋白,其表达与多种胁迫的抗性有一定关系。从野生型拟南芥cDNA中克隆获得了编码442个氨基酸序列的DnaJ基因,其与大肠杆菌DnaJ基因含有相同的J区和半胱氨酸富集区。将DnaJ基因构建到pET32a的原核表达载体,过量表达DnaJ基因的细菌在含有0.5 mol/LNaCl的培养基中仍然可以生长,初步推断DnaJ的表达与耐盐性有关。 展开更多
关键词 热激蛋白 DNAJ 过量表达 细菌耐盐性
在线阅读 下载PDF
过量表达盐芥TsIPK2基因增强转基因水稻耐盐性 被引量:4
6
作者 潘晓雪 胡明瑜 +4 位作者 蒋晓英 白文钦 官玲 吴红 雷开荣 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期741-747,共7页
【目的】本试验以野生型(WT)和转盐芥TsIPK2基因的水稻为材料,研究NaCl胁迫条件下过量表达TsIPK2基因对水稻植株抗盐胁迫能力的影响。【方法】取水稻材料种子和其3叶龄幼苗,分别在不同NaCl浓度(0、50、100、150、200mmol/L)下进行处理... 【目的】本试验以野生型(WT)和转盐芥TsIPK2基因的水稻为材料,研究NaCl胁迫条件下过量表达TsIPK2基因对水稻植株抗盐胁迫能力的影响。【方法】取水稻材料种子和其3叶龄幼苗,分别在不同NaCl浓度(0、50、100、150、200mmol/L)下进行处理。检测WT与过量表达TsIPK2基因水稻种子的发芽率、主根长和芽长、幼苗的丙二醛(MDA)和脯氨酸的含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,以及与胁迫相关的5个基因的表达。【结果】在盐胁迫下,与野生型相比,转基因水稻具有更好的发芽率、主根长和芽长。野生型和转基因水稻两者的脯氨酸含量增加,转基因水稻的积累量显著高于野生型,但是转基因水稻MDA含量增加幅度小于野生型。野生型和转基因水稻幼苗SOD酶活性均增加,但转基因植株的酶活性显著高于野生型;二者POD酶活性呈现先升高后下降的趋势,但是二者活性没有显著的差别;转基因水稻的CAT活性也呈现先升高后下降的趋势,然而野生型水稻的CAT活性在盐胁迫下没有显著的变化。高盐处理后,野生型和转基因水稻的5个与胁迫相关的基因表达倍数都增加,与野生型相比,转基因水稻的OsP5CS1、OsSOD、OsCATB和OsLEA3的表达量显著升高,而OsPOX1基因的表达量变化不显著。【结论】过量表达TsIPK2基因能够通过增强水稻的渗透调节能力、抗氧化胁迫能力并调节胁迫相关基因的表达,以提高水稻的耐盐性。 展开更多
关键词 盐芥 TsIPK2基因 过量表达 盐胁迫 转基因水稻
在线阅读 下载PDF
新疆小拟南芥ApCBF1基因的克隆及其过量表达转基因的研究 被引量:8
7
作者 黄先忠 张鹏 +2 位作者 吕新华 刘彤 崔百明 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第3期265-268,共4页
利用同源克隆法,克隆了小拟南芥的CBF1基因的cDNA(FJ491244),比对分析结果表明,ApCBF1的cDNA序列的A252,在拟南芥的AtCBF1的cDNA是T252,但翻译的氨基酸均是Ala,表明ApCBF1和AtCBF1翻译的氨基酸序列完全一致。构建了过量表达载体:p35S:Ap... 利用同源克隆法,克隆了小拟南芥的CBF1基因的cDNA(FJ491244),比对分析结果表明,ApCBF1的cDNA序列的A252,在拟南芥的AtCBF1的cDNA是T252,但翻译的氨基酸均是Ala,表明ApCBF1和AtCBF1翻译的氨基酸序列完全一致。构建了过量表达载体:p35S:ApCBF1,通过花滴法转入小拟南芥中。RT-PCR检测结果表明,转基因T0代AtCBF1基因过量表达。 展开更多
关键词 小拟南芥 ApCBF1 过量表达
在线阅读 下载PDF
过量表达pAPX基因提高水稻对镉胁迫的耐性 被引量:12
8
作者 段苏然 施卫明 王俊儒 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期111-116,共6页
研究了编码大麦pAPX的基因HvAPX1导入水稻并过量表达后,转pAPX水稻在镉胁迫下的生长状况、生理指标及镉含量。结果发现,由于pAPX基因的过量表达,转基因植株的根系伸长量、生物量、叶绿素含量以及APX活性都明显高于野生型植株。与野生型... 研究了编码大麦pAPX的基因HvAPX1导入水稻并过量表达后,转pAPX水稻在镉胁迫下的生长状况、生理指标及镉含量。结果发现,由于pAPX基因的过量表达,转基因植株的根系伸长量、生物量、叶绿素含量以及APX活性都明显高于野生型植株。与野生型植株相比,转基因水稻对镉胁迫具有明显的耐性。伴随对镉胁迫耐性的提高,转pAPX水稻对镉的累积量也同时提高。 展开更多
关键词 镉胁迫 抗坏血酸过氧化物酶 环境胁迫 基因过量表达 转基因水稻
在线阅读 下载PDF
过量表达甘菊CBF1基因提高拟南芥抗旱耐盐能力 被引量:5
9
作者 刘晨旭 刘彧 +2 位作者 刘杰 高越瑶 周蕴薇 《草业科学》 CAS CSCD 2018年第6期1400-1408,共9页
CBF是一类植物特异性、具有多种功能的转录因子。本研究将从甘菊(Chrysanthemum lavandulifolium)中分离的ClCBF1基因构建到植物表达载体pBI121上,并采用农杆菌介导的花序浸染法对拟南芥(Arabidopsis thaliana)进行遗传转化,共获得4个... CBF是一类植物特异性、具有多种功能的转录因子。本研究将从甘菊(Chrysanthemum lavandulifolium)中分离的ClCBF1基因构建到植物表达载体pBI121上,并采用农杆菌介导的花序浸染法对拟南芥(Arabidopsis thaliana)进行遗传转化,共获得4个转基因株系经过抗性筛选和RT-PCR验证,对其中表达量较高的3个转基因株系进行研究,结果表明:在150mmol·L^(-1)甘露醇培养基中转基因拟南芥的种子萌发率和根长平均为野生型的2.0倍和1.2倍,在150mmol·L^(-1) NaCl培养基中转基因拟南芥种子萌发率和根长平均为野生型的1.1倍和1.4倍;在干旱和盐胁迫条件下,转基因拟南芥幼苗的成活率高于野生型,并且超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性显著高于野生型(P<0.05),丙二醛(MDA)含量及相对电导率显著低于野生型植株(P<0.05)。说明ClCBF1基因在拟南芥受到干旱和盐胁迫过程中发挥一定作用。 展开更多
关键词 转基因 ClCBF1基因 干旱胁迫 盐胁迫 生理指标 过量表达
在线阅读 下载PDF
阳春砂HMGR和DXR在烟草中单独及共同过量表达调控萜类化合物的生物合成 被引量:5
10
作者 王焕 魏洁书 +3 位作者 杨锦芬 詹若挺 陈蔚文 叶圆 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第7期1513-1527,共15页
目的:HMGR和DXR分别是萜类生物合成途径——MVA和MEP途径的关键酶,本研究探讨阳春砂AvHMGR和AvDXR在转基因烟草中的过量表达对不同萜类化合物生物合成的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析AvHMGR和AvDXR的表达水平,应用... 目的:HMGR和DXR分别是萜类生物合成途径——MVA和MEP途径的关键酶,本研究探讨阳春砂AvHMGR和AvDXR在转基因烟草中的过量表达对不同萜类化合物生物合成的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析AvHMGR和AvDXR的表达水平,应用专一底物法测定HMGR和DXR的酶活性,利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术检测不同萜类化合物的变化。结果:AvHMGR或AvDXR单独过量表达抑制了HMGR和DXR的活性,提高了五针松烯、新植二烯、薄荷烯和甾醇的含量;而AvHMGR和AvDXR共同过量表达对不同植株中酶活性的影响有差异,提高了甾醇和植醇的含量,但抑制了新植二烯的积累。结论:AvHMGR和AvDXR单独或共同过量表达对烟草中不同萜类化合物的合成调控存在差异,同时也证明了MVA和MEP途径并不完全独立,而是有着相互交流,本研究为利用阳春砂AvHMGR和AvDXR进行萜类化合物的代谢调控提供了依据。 展开更多
关键词 阳春砂 HMGR DXR 过量表达 萜类化合物 生物合成 转基因烟草
在线阅读 下载PDF
Hira基因的过量表达对果蝇早期胚胎发育的影响 被引量:5
11
作者 王玉凤 徐艳菊 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2005年第4期530-533,共4页
H ir/H ira基因产物是组蛋白基因表达的一种负调节因子,其在果蝇发育过程中的作用还没有得到确认.本研究将果蝇H ira基因(dH ira)的cDNA克隆到载体UA SP中,运用UA S-G a l4系统使其在果蝇早期胚胎中大量表达.结果发现在胚胎发育早期,无... H ir/H ira基因产物是组蛋白基因表达的一种负调节因子,其在果蝇发育过程中的作用还没有得到确认.本研究将果蝇H ira基因(dH ira)的cDNA克隆到载体UA SP中,运用UA S-G a l4系统使其在果蝇早期胚胎中大量表达.结果发现在胚胎发育早期,无论是在头部还是在全胚胎过量表达H ira,都引起果蝇胚胎大量死亡,而且随着转基因拷贝数的增加,胚胎的死亡率也显著增加,说明H ira过量表达对果蝇胚胎发育产生严重影响.由于H ira基因产物与核小体的组装、染色质结构等的调节有关,因此推测H ira过量表达可能是通过对组蛋白的抑制对果蝇胚胎发育造成影响的. 展开更多
关键词 Hira 过量表达 果蝇 胚胎发育
在线阅读 下载PDF
AtNUDT8过量表达的拟南芥转基因植株 被引量:9
12
作者 张秀春 李文彬 +1 位作者 夏亦荠 彭明 《热带生物学报》 2010年第1期8-11,共4页
从拟南芥基因组中克隆AtNUDT8,并与pCHF3相连构建了植物表达载体pCHFN8,采用农杆菌GV3101介导的渗透法转化野生型拟南芥,通过卡那霉素筛选获得了一批经Northern blot检测证实的过量表达AtNUDT8的转基因拟南芥植株。
关键词 AtNUDT8 过量表达 拟南芥 遗传转化
在线阅读 下载PDF
CYP9A17v2组成型过量表达参与棉铃虫对拟除虫菊酯的抗性 被引量:1
13
作者 杨亦桦 张爽 +2 位作者 周颖君 岳丽娜 吴益东 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期852-859,共8页
微粒体细胞色素P450氧化酶介导的解毒代谢增强是棉铃虫Helicoverpa armigera对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的主要原因。作者前期的研究表明,CYP9A12和CYP9A14组成型过量表达与棉铃虫YGF品系对拟除虫菊酯的高水平抗性相关,CYP9A12和CYP9... 微粒体细胞色素P450氧化酶介导的解毒代谢增强是棉铃虫Helicoverpa armigera对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的主要原因。作者前期的研究表明,CYP9A12和CYP9A14组成型过量表达与棉铃虫YGF品系对拟除虫菊酯的高水平抗性相关,CYP9A12和CYP9A14的功能表达研究结果为其参与对拟除虫菊酯抗性提供了直接证据。本研究通过对棉铃虫CYP9A17v2的克隆、mRNA表达水平和功能表达的研究,以期明确该基因是否参与棉铃虫对拟除虫菊酯的抗性。结果表明:CYP9A17v2与CYP9A12的氨基酸序列具有很高的相似性(94%)。与棉铃虫对照品系(YG)相比,CYP9A17v2在YGF抗性品系末龄幼虫脂肪体中具有10.9倍的组成型过量表达,而在中肠中未发现过量表达。用酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae异源表达的CYP9A17v2能够代谢多种拟除虫菊酯(顺式氰戊菊酯、溴氰菊酯和氟氯氰菊酯)。据此认为CYP9A17v2组成型过量表达参与了棉铃虫对拟除虫菊酯的抗性。至此,CYP9A亚家族中已有3个P450基因(CYP9A12,CYP9A14和CYP9A17v2)被证实参与了棉铃虫对拟除虫菊酯的氧化解毒代谢。 展开更多
关键词 棉铃虫 细胞色素P450 CYP9A17v2基因 组成型过量表达 拟除虫菊酯 抗药性
在线阅读 下载PDF
乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在重组大肠杆菌JH12中的过量表达 被引量:1
14
作者 罗璇 许丽媛 +3 位作者 王永泽 赵锦芳 赵筱 王金华 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期121-126,共6页
以工程菌Escherichia coli SZ85基因组为模板,克隆得到乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)的L-乳酸脱氢酶基因(ldhL),连接到pUcm-T载体后,双酶切然后将其连接到表达载体pET-28a上,重组质粒经筛选后转入染色体上含有ldhL基因(来源P.ac... 以工程菌Escherichia coli SZ85基因组为模板,克隆得到乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)的L-乳酸脱氢酶基因(ldhL),连接到pUcm-T载体后,双酶切然后将其连接到表达载体pET-28a上,重组质粒经筛选后转入染色体上含有ldhL基因(来源P.acidilactici)的工程菌Escherichia coli JH12。P.acidilactici的ldhL基因过量表达体系E.coli JH12(pET-28a-ldhL)能利用浓度7%的木糖为碳源进行厌氧发酵,过量表达ldhL使L-乳酸产量提高了10 g/L,达64.86 g/L,糖酸转化率高达96%。 展开更多
关键词 重组大肠杆菌 过量表达 L-乳酸
在线阅读 下载PDF
谷氨酰胺合成酶基因的过量表达有效提高谷氨酸棒杆菌中L-谷氨酰胺产量 被引量:1
15
作者 郑强 阮红 +1 位作者 徐志南 杨卫军 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期678-683,共6页
以谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum ATCC13032基因组为模板,通过PCR扩增,得到大小为1434bp的谷氨酰胺合成酶基因glnA.以大肠杆菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pXMJ19为载体,将扩增得到的目的基因片段克隆至C.glutamicum Res167,获得重... 以谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum ATCC13032基因组为模板,通过PCR扩增,得到大小为1434bp的谷氨酰胺合成酶基因glnA.以大肠杆菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pXMJ19为载体,将扩增得到的目的基因片段克隆至C.glutamicum Res167,获得重组菌株C.glutamicum Res167/pXMJ19-glnA.在摇瓶发酵水平上,通过IPTG诱导glnA基因的表达,并采用反相高效液相色谱方法测定了发酵液中的L-谷氨酰胺含量.结果显示,与未经诱导的对照菌相比,诱导后的重组菌发酵液中的L-谷氨酰胺产量提高了1.8倍,最高产量达1.54g·L-1. 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 谷氨酰胺合成酶基因 过量表达 L-谷氨酰胺
在线阅读 下载PDF
谷氨酸棒杆菌3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶基因的克隆与过量表达 被引量:1
16
作者 王玉华 于含松 +2 位作者 刘加欢 刘回民 胡耀辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第5期162-165,共4页
本实验对谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)AS10111及其亚硝基胍诱变获得的丙氨酸和酪氨酸双营养缺陷型、抗3-甲基色氨酸突变菌株JLC1中3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶(DS)基因进行克隆和序列分析,将突变体来源DS基因构... 本实验对谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)AS10111及其亚硝基胍诱变获得的丙氨酸和酪氨酸双营养缺陷型、抗3-甲基色氨酸突变菌株JLC1中3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶(DS)基因进行克隆和序列分析,将突变体来源DS基因构建pZ8-1-DSM重组质粒,在谷氨酸棒杆菌突变株JLC1中进行表达,重组菌株JLC1(pZ8-1-DSM)DS酶活力分别是宿主菌和野生型菌株DS酶活力的5.9和7.3倍,色氨酸产量达到14.90g/L,较宿主菌提高了65%。这表明通过在谷氨酸棒杆菌中过量表达3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶基因可以有效提高该酶活力和色氨酸的产量。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 L-色氨酸3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶 过量表达
在线阅读 下载PDF
谷氨酸棒杆菌aroⅡ、trpEGD基因的过量表达及其对色氨酸合成的影响 被引量:1
17
作者 李智涛 伍展红 郑穗平 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期151-156,171,共7页
以谷氨酸棒杆菌SPT9(Phe-、Tyr-、4-FPr、6-FTr)为出发菌株,采用PCR方法扩增色氨酸合成途径中解除了反馈抑制的关键酶aroⅡ和trpEGD基因,应用大肠杆菌-谷氨酸棒杆菌穿梭表达载体pEC-XK99E在谷氨酸棒杆菌SPT9中对其进行了分别过量表达和... 以谷氨酸棒杆菌SPT9(Phe-、Tyr-、4-FPr、6-FTr)为出发菌株,采用PCR方法扩增色氨酸合成途径中解除了反馈抑制的关键酶aroⅡ和trpEGD基因,应用大肠杆菌-谷氨酸棒杆菌穿梭表达载体pEC-XK99E在谷氨酸棒杆菌SPT9中对其进行了分别过量表达和串联过量表达。首先对aroⅡ和trpEGD基因分别进行过量表达,得到菌株SPT9-aroⅡ、SPT9-trpEGD,摇瓶发酵试验表明,菌株SPT9-aroⅡ、SPT9-trpEGD的色氨酸产量相对于出发菌株SPT9分别提高了30%、23%;进一步对aroⅡ和trpEGD进行了串联过量表达,得到菌株SPT9-trpEGD-TP-aroⅡ,摇瓶发酵试验表明,该菌株色氨酸产量相对于出发菌株SPT9提高了84%。荧光定量PCR检测表明,菌株SPT9-trpEGD-TP-aroⅡ中aroⅡ、trpEGD基因的表达量分别为出发菌株SPT9的4.0倍和1.3倍。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 L-色氨酸 关键酶 过量表达 串联表达
在线阅读 下载PDF
番茄LeABI3基因的克隆与植物过量表达载体的构建 被引量:1
18
作者 范晶 刘永胜 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第5期33-35,共3页
从番茄成熟种子中提取总RNA,反转录得到cDNA。根据GenBank中番茄LeABI3基因序列设计引物,通过PCR方法获得了番茄LeABI3基因的2个转录本,其中转录本1序列比GenBank中LeABI3基因编码区序列多出30 bp,含1个1 740 bp的开放阅读框,编码579个... 从番茄成熟种子中提取总RNA,反转录得到cDNA。根据GenBank中番茄LeABI3基因序列设计引物,通过PCR方法获得了番茄LeABI3基因的2个转录本,其中转录本1序列比GenBank中LeABI3基因编码区序列多出30 bp,含1个1 740 bp的开放阅读框,编码579个氨基酸;转录本2比GenBank中LeABI3基因编码区序列也多出30 bp,同时在编码区内另一个位置因剪接而缺失了122 bp的核苷酸序列。通过替换掉植物过量表达载体PB I121上的GUS编码区序列,将序列无缺失的转录本1连接到PB I121上,对所获得的重组质粒进行双酶切,结果表明植物过量表达载体PB I121-LeABI3构建成功。 展开更多
关键词 番茄 LeABI3基因 序列 植物过量表达载体
在线阅读 下载PDF
OsTZF9基因过量表达调控水稻多种生长发育表型 被引量:1
19
作者 周淑芬 刘宝 张迪 《福建农业科技》 CAS 2021年第11期1-6,共6页
RRTZF基因在植物的生长发育和逆境胁迫中起着重要作用。OsTZF9基因是水稻RRTZF基因家族的一员,为分析OsTZF9基因的生物学功能,构建了由Ubiqutin启动子驱动的植物过表达载体pCXUN-TZF9,通过农杆菌介导法获得了转基因再生植株6个克隆。进... RRTZF基因在植物的生长发育和逆境胁迫中起着重要作用。OsTZF9基因是水稻RRTZF基因家族的一员,为分析OsTZF9基因的生物学功能,构建了由Ubiqutin启动子驱动的植物过表达载体pCXUN-TZF9,通过农杆菌介导法获得了转基因再生植株6个克隆。进一步分析转基因植株后代的表型发现,与野生型日本晴相比,OsTZF9基因过表达植株的株高、分糵数、有效穗数、穗长和千粒重均下降;与转基因阴性分离株相比,OsTZF9基因过表达植株抽穗期推迟。 展开更多
关键词 水稻 OsTZF9基因 过量表达 表型分析
在线阅读 下载PDF
番茄LeNHX3基因的克隆与植物过量表达载体的构建 被引量:1
20
作者 范晶 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第6期47-49,共3页
从番茄幼苗中提取RNA,根据TIGR基因索引数据库中番茄LeNHX3基因序列设计引物,通过RT-PCR获得了番茄LeNHX3基因的cDNA序列,包含一个1 614 bp的开放阅读框,编码537个氨基酸。将cDNA序列连接到植物过量表达载体PBI121上,对所获得的重组质... 从番茄幼苗中提取RNA,根据TIGR基因索引数据库中番茄LeNHX3基因序列设计引物,通过RT-PCR获得了番茄LeNHX3基因的cDNA序列,包含一个1 614 bp的开放阅读框,编码537个氨基酸。将cDNA序列连接到植物过量表达载体PBI121上,对所获得的重组质粒进行双酶切鉴定,结果表明植物过量表达载体PBI121-LeNHX3已构建成功。 展开更多
关键词 番茄 LeNHX3基因 植物过量表达载体
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部