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Peroxiredoxin 2基因慢病毒载体的构建及对结直肠癌SW480细胞增殖的影响
1
作者
冯继红
傅仲学
+4 位作者
文坤明
张寿儒
卢伟东
王昊
吴星烨
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第8期1078-1082,共5页
目的:构建Peroxiredoxin 2(Prdx2)基因慢病毒表达载体,建立能够稳定高表达Prdx2的结直肠癌SW480细胞株,研究Prdx2的高表达对SW480细胞生长增殖的影响。方法:利用PCR扩增Prdx2编码区片段,克隆插入载体Ubi-MCS-EGFP-IRES-Puromycin(GV218)...
目的:构建Peroxiredoxin 2(Prdx2)基因慢病毒表达载体,建立能够稳定高表达Prdx2的结直肠癌SW480细胞株,研究Prdx2的高表达对SW480细胞生长增殖的影响。方法:利用PCR扩增Prdx2编码区片段,克隆插入载体Ubi-MCS-EGFP-IRES-Puromycin(GV218)中,构建Ubi-Prdx2-EGFP-Puromycin(LV-Prdx2)慢病毒表达载体,包装产生慢病毒颗粒,鉴定后将其转染SW480细胞,荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白表达;应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot方法检测SW480细胞中Prdx2的mRNA和蛋白水平表达情况;MTT法检测细胞生长情况;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。结果:构建的重组慢病毒表达载体Ubi-Prdx2-EGFP-Puromycin(LV-Prdx2)经鉴定正确;慢病毒转染SW480细胞后,细胞中Prdx2在mRNA和蛋白水平高表达。MTT法及平板克隆形成实验结果显示Prdx2高表达的SW480细胞增殖能力显著增强(P<0.05)。结论:成功构建Prdx2基因慢病毒表达载体Ubi-Prdx2-EGFP-Puromycin,筛选出稳定高表达Prdx2的SW480细胞株;高表达的Prdx2分子可显著促进结直肠癌SW480细胞增殖。
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关键词
结直肠癌
SW480
过氧化还原蛋白酶2
慢病毒表达载体
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职称材料
题名
Peroxiredoxin 2基因慢病毒载体的构建及对结直肠癌SW480细胞增殖的影响
1
作者
冯继红
傅仲学
文坤明
张寿儒
卢伟东
王昊
吴星烨
机构
重庆医科大学附属第一医院胃肠外科
遵义医学院附属医院普外科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第8期1078-1082,共5页
基金
国家自然科学基金资助(No.81172295)
文摘
目的:构建Peroxiredoxin 2(Prdx2)基因慢病毒表达载体,建立能够稳定高表达Prdx2的结直肠癌SW480细胞株,研究Prdx2的高表达对SW480细胞生长增殖的影响。方法:利用PCR扩增Prdx2编码区片段,克隆插入载体Ubi-MCS-EGFP-IRES-Puromycin(GV218)中,构建Ubi-Prdx2-EGFP-Puromycin(LV-Prdx2)慢病毒表达载体,包装产生慢病毒颗粒,鉴定后将其转染SW480细胞,荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白表达;应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot方法检测SW480细胞中Prdx2的mRNA和蛋白水平表达情况;MTT法检测细胞生长情况;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。结果:构建的重组慢病毒表达载体Ubi-Prdx2-EGFP-Puromycin(LV-Prdx2)经鉴定正确;慢病毒转染SW480细胞后,细胞中Prdx2在mRNA和蛋白水平高表达。MTT法及平板克隆形成实验结果显示Prdx2高表达的SW480细胞增殖能力显著增强(P<0.05)。结论:成功构建Prdx2基因慢病毒表达载体Ubi-Prdx2-EGFP-Puromycin,筛选出稳定高表达Prdx2的SW480细胞株;高表达的Prdx2分子可显著促进结直肠癌SW480细胞增殖。
关键词
结直肠癌
SW480
过氧化还原蛋白酶2
慢病毒表达载体
Keywords
Colorectal cancer （CRC）
SW480
Peroxiredoxin
2
（ Prdx
2
）
Lentiviral vector
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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1
Peroxiredoxin 2基因慢病毒载体的构建及对结直肠癌SW480细胞增殖的影响
冯继红
傅仲学
文坤明
张寿儒
卢伟东
王昊
吴星烨
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
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