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猪传染性胃肠炎病毒免疫过氧化物酶单层细胞试验原位检测方法的建立
被引量：
5
1
作者
朱蕴暖
张鑫
+4 位作者
朱向东
陈建飞
时洪艳
石达
冯力
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期237-239,共3页
为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的原位检测方法,本研究以TGEV N蛋白的单克隆抗体为一抗,羊抗小鼠IgG-HRP为二抗,AEC过氧化物酶底物为显色液,建立了TGEV的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测方法。检测结果显示,一抗的最佳使用浓度为...
为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的原位检测方法,本研究以TGEV N蛋白的单克隆抗体为一抗,羊抗小鼠IgG-HRP为二抗,AEC过氧化物酶底物为显色液,建立了TGEV的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测方法。检测结果显示,一抗的最佳使用浓度为0.5 ng/μL,二抗的最佳稀释倍数为1∶2 000倍,经AEC显色,TGEV感染的阳性细胞呈红棕色;对常见的猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒和猪圆环病毒2型等猪病病原检测均为阴性,具有良好特异性;同时该方法能够在普通显微镜下观察到病毒在细胞中的分布情况。本研究建立的方法为TGEV的实验室鉴定及TGEV在感染细胞中的定位和动态分布提供有效的检测手段。
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关键词
猪传染性胃肠炎病毒
N蛋白
过氧化物酶单层试验
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职称材料
猪细小病毒单克隆抗体的制备和鉴定
被引量：
1
2
作者
张倩
李晓霞
+9 位作者
董昕欣
顾小雪
曹振
邓小雨
胡冬梅
刘奇
周智
遇秀玲
翟新验
田克恭
《中国比较医学杂志》
CAS
2011年第9期54-57,F0004,共5页
目的制备猪细小病毒(PPV)杂交瘤细胞株,并对其分泌的PPV单克隆抗体进行鉴定。方法按常规方法制备并获得2株杂交瘤细胞。用染色体分析对杂交瘤细胞进行鉴定,用间接ELISA、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)对其分泌...
目的制备猪细小病毒(PPV)杂交瘤细胞株,并对其分泌的PPV单克隆抗体进行鉴定。方法按常规方法制备并获得2株杂交瘤细胞。用染色体分析对杂交瘤细胞进行鉴定,用间接ELISA、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)对其分泌的单克隆抗体进行效价测定、亚型鉴定和特异性鉴定。结果得到2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株2H9、1F9,染色体数目介于90～110之间。细胞上清效价均达1∶1×104,腹水效价均达1∶1×107,其亚型分别为IgG1、IgM,均为kappa链。2H9、1F9单抗与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒I型(PCV-1)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、乙脑病毒(JEV)等均无交叉反应。IPMA和IFA检测结果显示2H9、1F9单抗均能与接种于PK-15细胞的PPV发生特异性反应。结论成功制备了2株抗PPV杂交瘤细胞株,证实其产生的单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性。
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关键词
猪细小病毒
单
克隆抗体
免疫
过氧化物酶单层试验
间接免疫荧光
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职称材料
猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备和鉴定
3
作者
曹振
邓小雨
+5 位作者
张倩
倪建强
周智
遇秀玲
赵德明
田克恭
《中国动物检疫》
CAS
2012年第9期39-42,共4页
目的制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以纯化的PRRSV全病毒抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,并测定其免疫球蛋白亚类、效价和特异性。结果成功获得2株能稳定分泌抗PRRSV...
目的制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以纯化的PRRSV全病毒抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,并测定其免疫球蛋白亚类、效价和特异性。结果成功获得2株能稳定分泌抗PRRSVM蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞,命名为3C3、3D2,经鉴定亚类均为IgG2a、kappa链。2株单克隆抗体腹水ELISA效价达105～107,IPMA效价达1:2560～1:10240,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒等无交叉反应。结论获得特异性针对猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体,为研究该病的快速诊断技术奠定基础。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
单
克隆抗体
酶
联免疫吸附
试验
免疫
过氧化物酶单层试验
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职称材料
题名
猪传染性胃肠炎病毒免疫过氧化物酶单层细胞试验原位检测方法的建立
被引量：
5
1
作者
朱蕴暖
张鑫
朱向东
陈建飞
时洪艳
石达
冯力
机构
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪消化道团队
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期237-239,共3页
基金
国家自然科学基金项目(31172350
31572541
+1 种基金
31502092)
国家重点实验室资助项目(SKLVBP2015005)
文摘
为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的原位检测方法,本研究以TGEV N蛋白的单克隆抗体为一抗,羊抗小鼠IgG-HRP为二抗,AEC过氧化物酶底物为显色液,建立了TGEV的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测方法。检测结果显示,一抗的最佳使用浓度为0.5 ng/μL,二抗的最佳稀释倍数为1∶2 000倍,经AEC显色,TGEV感染的阳性细胞呈红棕色;对常见的猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒和猪圆环病毒2型等猪病病原检测均为阴性,具有良好特异性;同时该方法能够在普通显微镜下观察到病毒在细胞中的分布情况。本研究建立的方法为TGEV的实验室鉴定及TGEV在感染细胞中的定位和动态分布提供有效的检测手段。
关键词
猪传染性胃肠炎病毒
N蛋白
过氧化物酶单层试验
Keywords
transmissible gastroenteritis virus
N protein
immunoperoxidase monolayer assay
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪细小病毒单克隆抗体的制备和鉴定
被引量：
1
2
作者
张倩
李晓霞
董昕欣
顾小雪
曹振
邓小雨
胡冬梅
刘奇
周智
遇秀玲
翟新验
田克恭
机构
中国动物疫病预防控制中心
北京市朝阳区动物疫病预防控制中心
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2011年第9期54-57,F0004,共5页
基金
"十一五"国家科技支撑计划动物源性生物材料病毒检测技术研究(2008BAI54B06)
文摘
目的制备猪细小病毒(PPV)杂交瘤细胞株,并对其分泌的PPV单克隆抗体进行鉴定。方法按常规方法制备并获得2株杂交瘤细胞。用染色体分析对杂交瘤细胞进行鉴定,用间接ELISA、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)对其分泌的单克隆抗体进行效价测定、亚型鉴定和特异性鉴定。结果得到2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株2H9、1F9,染色体数目介于90～110之间。细胞上清效价均达1∶1×104,腹水效价均达1∶1×107,其亚型分别为IgG1、IgM,均为kappa链。2H9、1F9单抗与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒I型(PCV-1)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、乙脑病毒(JEV)等均无交叉反应。IPMA和IFA检测结果显示2H9、1F9单抗均能与接种于PK-15细胞的PPV发生特异性反应。结论成功制备了2株抗PPV杂交瘤细胞株,证实其产生的单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性。
关键词
猪细小病毒
单
克隆抗体
免疫
过氧化物酶单层试验
间接免疫荧光
Keywords
Porcine parvovirus
Monoclonal antibodies
IPMA
IFA
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
R332 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备和鉴定
3
作者
曹振
邓小雨
张倩
倪建强
周智
遇秀玲
赵德明
田克恭
机构
中国农业大学动物医学院
中国动物疫病预防控制中心
出处
《中国动物检疫》
CAS
2012年第9期39-42,共4页
基金
"北京市生猪产业技术体系创新团队"课题(GWZJ-2009-05)
文摘
目的制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以纯化的PRRSV全病毒抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,并测定其免疫球蛋白亚类、效价和特异性。结果成功获得2株能稳定分泌抗PRRSVM蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞,命名为3C3、3D2,经鉴定亚类均为IgG2a、kappa链。2株单克隆抗体腹水ELISA效价达105～107,IPMA效价达1:2560～1:10240,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒等无交叉反应。结论获得特异性针对猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体,为研究该病的快速诊断技术奠定基础。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
单
克隆抗体
酶
联免疫吸附
试验
免疫
过氧化物酶单层试验
Keywords
PRRSV, MonoclonalAntibodies, ELISA, IPMA
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪传染性胃肠炎病毒免疫过氧化物酶单层细胞试验原位检测方法的建立
朱蕴暖
张鑫
朱向东
陈建飞
时洪艳
石达
冯力
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪细小病毒单克隆抗体的制备和鉴定
张倩
李晓霞
董昕欣
顾小雪
曹振
邓小雨
胡冬梅
刘奇
周智
遇秀玲
翟新验
田克恭
《中国比较医学杂志》
CAS
2011
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备和鉴定
曹振
邓小雨
张倩
倪建强
周智
遇秀玲
赵德明
田克恭
《中国动物检疫》
CAS
2012
0
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