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短蛸(Octopus ocellatus)过氧化物还原酶(OoPrx-4)基因的克隆及其对鳗弧菌胁迫的转录调控分析 被引量:2
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作者 徐洁 韦秀梅 +4 位作者 王卫军 杨建敏 刘相全 杨顶珑 陈建强 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期342-347,共6页
从本研究前期构建的短蛸(Octopus ocellatus)cDNA文库中克隆得到过氧化物还原酶(OoPrx-4)基因的cDNA全长,该基因cDNA全长934bp,包括5′非编码区(UTR)19bp,3′UTR177bp,开放阅读框(ORF)738bp,共编码245个氨基酸,理论等电点为6.65,预测分... 从本研究前期构建的短蛸(Octopus ocellatus)cDNA文库中克隆得到过氧化物还原酶(OoPrx-4)基因的cDNA全长,该基因cDNA全长934bp,包括5′非编码区(UTR)19bp,3′UTR177bp,开放阅读框(ORF)738bp,共编码245个氨基酸,理论等电点为6.65,预测分子量27.1kDa。采用实时荧光定量PCR法分析了OoPrx-4基因在短蛸各组织及鳗弧菌胁迫下的表达规律,结果表明,OoPrx-4在短蛸血细胞、肌肉、系统心脏、鳃、胃、肾囊、性腺、外套膜和肝胰腺等检测组织中都有表达,其中在肝胰腺的表达量最高。经鳗弧菌刺激后,Prx-4在血细胞中的表达量分别在6h和48h出现了两次明显上调。Prx-4作为抗氧化酶可能在减少机体因抵御鳗弧菌胁迫所产生的过氧化物方面发挥重要的作用。 展开更多
关键词 短蛸 过氧化物还原酶-4 实时荧光定量PCR 鳗弧菌
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细菌刺激下克氏原螯虾prx4基因的免疫响应和抗氧化功能研究
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作者 张明达 李倩倩 +3 位作者 张文硕 秦仕宇 沈秀丽 杜志强 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1185-1194,共10页
【目的】克隆克氏原螯虾(Procambarus clarkii)过氧化物还原酶4基因(Pc-prx4),分析Pc-prx4基因的正常组织表达以及细菌刺激后的相对表达情况,分析其抗氧化功能,为Pc-prx4在病原刺激后的先天免疫机制以及抗氧化功能研究提供参考依据。【... 【目的】克隆克氏原螯虾(Procambarus clarkii)过氧化物还原酶4基因(Pc-prx4),分析Pc-prx4基因的正常组织表达以及细菌刺激后的相对表达情况,分析其抗氧化功能,为Pc-prx4在病原刺激后的先天免疫机制以及抗氧化功能研究提供参考依据。【方法】以Pc-prx4为目的基因,通过相关网站和软件(Expasy、Translate tool、SMART、Expasy ProtParam tool、BLASTx、MEGA-X)进行生物信息学分析。通过qRT-PCR检测Pc-prx4在正常组织中的表达量以及金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、鲶爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)刺激下的表达量;通过构建表达菌株、诱导纯化r Pc-PRX4蛋白,对重组蛋白进行抗氧化功能研究。【结果】Pc-prx4开放阅读框744 bp,编码247个氨基酸,含有烷基氢过氧化物还原酶(AhpC)结构域、巯基特异性抗氧化结构域和1-Cys prx过氧铁氧酶的C末端结构域;Pc-PRX4蛋白分子式为C_(1249)H_(1934)N_(330)O_(357)S_(10),分子量为27.61 kDa,理论等电点(pI)为5.88,N端存在信号肽区域,C端存在1-Cys过氧化物还原蛋白结构域。Pc-prx4基因在各组织中均有所表达,其中血淋巴的表达量最高;在金黄色葡萄球菌和鲶爱德华氏菌刺激下,Pc-prx4基因在血细胞、肝胰腺、鳃、肠组织中表达均呈现整体升高的趋势。在保护质粒DNA抗氧化缺刻试验中,rPc-PRX4表现出抗氧化性,并随着重组蛋白浓度的升高,抗氧化效果越明显。【结论】Pc-prx4基因属于1-Cys prx,在血细胞中高表达,参与调节金黄色葡萄球菌、鲶爱德华氏菌刺激下的机体免疫应答过程,r Pc-PRX4蛋白还具有与浓度大小相关的抗氧化功能,该基因参与免疫过程的调节和保护机体进行抗氧化的功能。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 过氧化物还原酶4 金黄色葡萄球菌 鲶爱德华氏菌 表达模式 氧化
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Prdx4蛋白表达改变对HeLa细胞迁移和侵袭的影响 被引量:3
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作者 袁伟燕 张丽 +2 位作者 石红琴 龚小卫 姜勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期637-643,共7页
目的:观察过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达的改变对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法:采用脂质体瞬时转染法将表达质粒pc DNA3.0-HA-Prdx4转染HeLa细胞;LV-Prdx4 RNAi重组病毒感染HeLa细胞,构建Prdx4 shRNA HeL... 目的:观察过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达的改变对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法:采用脂质体瞬时转染法将表达质粒pc DNA3.0-HA-Prdx4转染HeLa细胞;LV-Prdx4 RNAi重组病毒感染HeLa细胞,构建Prdx4 shRNA HeLa细胞系沉默Prdx4的表达;用蛋白质印迹法证实Prdx4蛋白表达水平的变化;应用划痕愈合实验和Transwell迁移及侵袭实验分别检测细胞迁移及侵袭能力的变化。结果:pc DNA3.0-HA-Prdx4质粒转染组He La细胞的Prdx4蛋白表达水平明显上调(P<0.05),而Prdx4 shRNA HeLa稳定干扰细胞系Prdx4表达水平明显下调(P<0.05)。Prdx4过表达组HeLa细胞的迁移和侵袭能力明显增强,与空白对照组及空载体转染组比较,差异显著(P<0.01)。Prdx4表达干扰组HeLa细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制,与空白对照组及阴性对照组比较,差异显著(P<0.01)。结论:上调Prdx4蛋白表达水平可促进HeLa细胞的迁移和侵袭,在宫颈癌的发生和发展过程中可能起重要作用;下调Prdx4蛋白表达水平可以明显抑制HeLa细胞的迁移和侵袭能力,Prdx4有可能成为临床治疗宫颈癌的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 过氧化物还原酶4 细胞迁移 细胞侵袭
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PRDX4在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 王丽梅 李国平 +1 位作者 陈余朋 郑珂 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期461-465,共5页
目的:研究过氧化物还原酶4(PRDX4)在口腔鳞状细胞癌组织(OSCC)中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学检测108例口腔鳞状细胞癌组织中PRDX4及E-cad、Vim的表达情况。分析其与病理特征、预后的关系及可能的致病机制。结果:PRDX4在口... 目的:研究过氧化物还原酶4(PRDX4)在口腔鳞状细胞癌组织(OSCC)中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学检测108例口腔鳞状细胞癌组织中PRDX4及E-cad、Vim的表达情况。分析其与病理特征、预后的关系及可能的致病机制。结果:PRDX4在口腔鳞癌组织中表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.001),其表达与患者生存时间(P=0.002)、淋巴结转移(P=0.003)、神经侵犯(P=0.024)及分化程度(P<0.001)显著相关;PRDX4与E-cad表达成负相关(r=-0.327,P=0.001),与Vim表达成正相关(r=0.313,P=0.001)。结论:PRDX4可能参与OSCC的发生发展,且与不良的预后存在密切关系,其机制可能与上皮间质转化相关。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌(OSCC) 过氧化物还原酶4(PRDX4) 免疫组织化学
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