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沙棘果油对过氧化氢诱导氧化损伤的保护作用 被引量:5
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作者 郑鹏 王波 王前 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1349-1356,共8页
沙棘(Hippophae rhamnoides)是一种具有药用价值的植物,沙棘果油具有抗氧化、抗炎症及抗肿瘤等多种药理作用。为了探讨沙棘果油对H 2 O 2造成氧化性损伤的细胞生长的影响及其抗氧化性,该研究选择H 2 O 2对RAW264.7细胞氧化损伤模型,通过... 沙棘(Hippophae rhamnoides)是一种具有药用价值的植物,沙棘果油具有抗氧化、抗炎症及抗肿瘤等多种药理作用。为了探讨沙棘果油对H 2 O 2造成氧化性损伤的细胞生长的影响及其抗氧化性,该研究选择H 2 O 2对RAW264.7细胞氧化损伤模型,通过DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除实验检测沙棘果油体外抗氧化能力,用[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]MTT法和流式细胞仪检测超氧化物阴离子荧光探针(DHE)信号,分别检测不同浓度沙棘果油对H 2 O 2损伤细胞的存活率和超氧化物阴离子水平。结果表明:(1)在DPPH自由基清除实验中,当沙棘果油浓度小于4.9%时,沙棘果油的抗氧化能力大于维生素C。(2)通过MTT法发现,浓度为3.125%的沙棘果油对H 2 O 2损伤细胞的存活率显著升高(P<0.01)。(3)从DHE检测发现,在同一检测时间点,随着沙棘果油浓度增加,DHE阳性细胞比例显著下降(P<0.01);在不同检测时间点,随着沙棘果油浓度增加,DHE阳性细胞比例显著升高(P<0.01)。沙棘果油对过氧化氢诱导的RAW264.7细胞氧化损伤模型有一定修复作用,可能与细胞内超氧化物阴离子水平受到抑制有关,它具有抗氧化性损伤的潜能。 展开更多
关键词 沙棘果油 氧化 MTT法 DHE 过氧化氢损伤模型
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五味子醇甲对过氧化氢诱导损伤的HK-2细胞的保护作用
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作者 赵子平 王依 +3 位作者 张楠淇 李婉莹 宋明杰 王英平 《医药导报》 北大核心 2025年第7期1021-1027,共7页
目的研究五味子醇甲(SA)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导氧化应激损伤肾小管上皮细胞(HK-2)的保护作用及其机制。方法体外培养HK-2细胞,分为空白对照组,模型对照组(以600μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)作用2 h造模)和SA小、中、大剂量组(分别... 目的研究五味子醇甲(SA)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导氧化应激损伤肾小管上皮细胞(HK-2)的保护作用及其机制。方法体外培养HK-2细胞,分为空白对照组,模型对照组(以600μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)作用2 h造模)和SA小、中、大剂量组(分别以0.125、0.50和0.75μmol·L^(-1)SA孵育24 h,600μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)作用2 h)。CCK-8法检测细胞存活率,抗凝血蛋白膜粘连蛋白-荧光素(Annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞凋亡率,碘化丙啶(PI)染色法检测细胞周期,试剂盒检测活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,Western Blot测定凋亡通路相关蛋白活性。结果与空白对照组比较,模型对照组细胞存活率显著降低、凋亡率显著上升(P<0.01),G_(0)/G_(1)期染色细胞数量显著升高、S期比例降低(P<0.05),SOD水平与GSH含量显著下降(P<0.01),ROS含量、LDH水平和MDA含量显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,SA小、中、大剂量组细胞凋亡率显著降低(P<0.01);SA中、大剂量组G_(0)/G_(1)期细胞比例明显下降(P<0.05),SA大剂量组S期细胞比例显著升高(P<0.05);SA中、大剂量组ROS水平明显下降(P<0.01),且呈现剂量依赖性;SA小、中、大剂量组SOD活性均上升,但差异无统计学意义;SA中、大剂量组LDH活力下降明显(P<0.01),且与SA浓度呈正相关;SA小、中、大剂量组GSH含量显著上升(P<0.01),且呈现浓度依赖性;SA小、中、大剂量组MDA含量显著下降(P<0.01),且呈现剂量依赖性;SA小、中、大剂量组Bax/Bcl-2比值明显下降(P<0.05),SA中、大剂量组Caspase 3和SA小、中、大剂量组Cytochrome C蛋白活性降低(P<0.05)。结论SA能够调节细胞氧化因子水平,减少细胞凋亡,调控细胞周期进程,对H_(2)O_(2)诱导损伤的HK-2细胞起保护作用。 展开更多
关键词 五味子醇甲 过氧化氢 急性肾损伤
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肌肽对叔丁基过氧化氢诱导肝细胞损伤的修复作用 被引量:1
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作者 陈铭 罗静 +2 位作者 宋文奎 苏伟明 吉宏武 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期25-32,共8页
肌肽是一种新型的食品补充剂,具有多种生物活性功能,已广泛应用于保健品、功能饮料、美容等领域,但肌肽对肝损伤修复的研究与应用鲜有报道。该文旨在研究肌肽对肝损伤的修复作用并探究其作用机制。肌肽预处理正常人肝细胞(normal human ... 肌肽是一种新型的食品补充剂,具有多种生物活性功能,已广泛应用于保健品、功能饮料、美容等领域,但肌肽对肝损伤修复的研究与应用鲜有报道。该文旨在研究肌肽对肝损伤的修复作用并探究其作用机制。肌肽预处理正常人肝细胞(normal human hepatocyte,L-02)12 h,400 mmol/mL叔丁基过氧化氢(tert butyl hydrogen peroxide,TBHP)处理L-02细胞4 h,细胞计数试剂盒-8检测细胞存活率,试剂盒检测谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,流氏细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹定量分析氧化信号通路与凋亡信号通路的相关蛋白表达。结果表明,肌肽预处理显著降低了L-02细胞外液ALT、AST活性,抑制ROS形成,提高细胞内GSH含量,显著抑制L-02细胞凋亡,上调核红细胞2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)的蛋白表达,下调Kelch样ECH关联蛋白1(Kelch like ECH associated protein 1,Keap1)、磷酸化氨基末端激酶(amino-terminal kinases phosphorylation,p-JNK)、胱天蛋白酶3(caspase-3,Cas-3)的蛋白表达。肌肽通过调控Keap1-Nrf2与JNK-Cas-3信号通路有效修复TBHP诱导的肝细胞损伤。 展开更多
关键词 肌肽 叔丁基过氧化氢 肝细胞损伤 L-02细胞 氧化应激 细胞凋亡 Keap1-Nrf2 JNK-Cas-3
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软枣猕猴桃黄酮对过氧化氢诱导HaCaT细胞损伤的保护作用 被引量:12
4
作者 石浩 王仁才 +1 位作者 吴小燕 刘琼 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第13期229-234,共6页
研究软枣猕猴桃中黄酮类化合物对过氧化氢(H_2O_2)损伤人永生化表皮细胞(HaCaT细胞)的保护作用。以湖南省浏阳市大围山软枣猕猴桃为实验材料,以体外培养的HaCaT细胞为实验对象。实验分为空白对照组、H_2O_2模型组、阳性对照组(VC组)和... 研究软枣猕猴桃中黄酮类化合物对过氧化氢(H_2O_2)损伤人永生化表皮细胞(HaCaT细胞)的保护作用。以湖南省浏阳市大围山软枣猕猴桃为实验材料,以体外培养的HaCaT细胞为实验对象。实验分为空白对照组、H_2O_2模型组、阳性对照组(VC组)和黄酮处理组(软枣猕猴桃黄酮0.1~1.0 mg/mL预处理),以细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平为综合评价指标,并以VC作为阳性对照评价其抗氧化活性。实验结果表明:当H_2O_2浓度为30μmol/L时,细胞相对存活率为40%左右,较好地诱导了HaCaT细胞氧化损伤模型。当加入黄酮类化合物对细胞进行预保护后,质量浓度0.3、0.6 mg/mL的黄酮处理组细胞相对存活率为60%左右,较模型组均提高了20%左右。0.3 mg/mL黄酮处理组细胞内SOD活力(6.33 U/mg)较模型组升高了约1倍,且存在明显差异(P<0.05);ROS水平显著下降,与模型组(677.80)相比下降了13%左右。说明软枣猕猴桃中黄酮类化合物对H_2O_2造成的氧化损伤具有一定的预保护作用,可进一步将其开发成相应的天然抗氧化剂产品投入市场。 展开更多
关键词 软枣猕猴桃 黄酮 过氧化氢诱导氧化损伤 HaCaT细胞损伤 保护作用
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饲料酵母水溶物具有促进草鱼原代肝细胞生长及修复过氧化氢损伤的作用 被引量:1
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作者 马杰 王卓君 +4 位作者 石瑶瑶 叶元土 蔡春芳 吴萍 陈鹏 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期159-166,共8页
研究以3种酵母水溶物为实验材料,探究饲料酵母对草鱼原代肝细胞生长的促进作用和过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导草鱼原代肝细胞氧化损伤的缓解作用。实验使用酶消化法分离得到草鱼原代肝细胞,以200μmol/L H_(2)O_(2)处理细胞1 h建立氧化应... 研究以3种酵母水溶物为实验材料,探究饲料酵母对草鱼原代肝细胞生长的促进作用和过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导草鱼原代肝细胞氧化损伤的缓解作用。实验使用酶消化法分离得到草鱼原代肝细胞,以200μmol/L H_(2)O_(2)处理细胞1 h建立氧化应激模型;分别选取质量浓度为25、50、100、200、400 mg/L的饲料酵母水溶物处理细胞,比较3种饲料酵母水溶物对原代肝细胞的促生长效果;分别使用3种饲料酵母的最佳促生长质量浓度处理模型细胞,分析饲料酵母水溶物对H_(2)O_(2)诱导的氧化损伤的缓解作用。结果表明:3种饲料酵母水溶物均能促进原代肝细胞增殖,酵母培养物YC-A、YC-B、酵母细胞壁多糖YCP的最佳促生长质量浓度分别为100、200、100 mg/L,在该质量浓度下细胞活力较对照组极显著提高(P<0.001)。相比于H_(2)O_(2)模型组,3个饲料酵母水溶物组细胞活力和MMP极显著提高(P<0.001),培养液中LDH活性极显著降低(P<0.001),细胞凋亡率和胞内ROS水平极显著降低(P<0.01);电镜结果显示,模型组细胞线粒体肿胀、嵴扭曲或消失,细胞内出现大量空泡,而3个饲料酵母水溶物处理组观察到线粒体肿胀情况得以改善。转录组结果提示,YCP可能通过增加细胞内Ⅰ相和Ⅱ相代谢酶保护细胞免受氧化损伤,而YC对细胞的保护可能是通过调控细胞内铁稳态实现的。饲料酵母水溶物能够促进草鱼原代肝细胞生长,并对原代肝细胞H_(2)O_(2)氧化损伤具有一定的修复作用。 展开更多
关键词 饲料酵母 原代肝细胞 过氧化氢 氧化损伤 草鱼
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发芽粟米活性肽减轻铜诱导秀丽隐杆线虫氧化损伤及其分子机制
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作者 张惠琪 陈晓 +5 位作者 金雪玲 黎晶晶 袁娟丽 高金燕 陈红兵 武涌 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2025年第1期384-393,共10页
目的:以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)为模型,探究发芽粟米活性肽(Germinated foxtail millet bioactive peptides,GRBPs)对铜诱导的体内氧化损伤的缓解作用和相关机制。方法:将野生型N2秀丽隐杆线虫随机分为对照组、... 目的:以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)为模型,探究发芽粟米活性肽(Germinated foxtail millet bioactive peptides,GRBPs)对铜诱导的体内氧化损伤的缓解作用和相关机制。方法:将野生型N2秀丽隐杆线虫随机分为对照组、GRBPs组,观察喂食GRBPs对线虫接受铜刺激后运动能力和存活率的影响;通过检测活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(Superoxide disumutase,SOD)活性,评估GRBPs对铜诱导线虫氧化损伤的影响;进一步,通过基因组及转录组测序技术(RNA-seq)以及非靶向代谢组学分析,探讨GRBPs的作用机制。最后对抗氧化相关基因进行逆转录和实时定量PCR(qPCR)验证。结果:GRBPs可明显提高铜刺激后线虫的存活率和运动能力;1 mg/mL浓度的GRBPs可极显著降低丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量(P<0.0001),增加CAT和SOD活性,同时调节特定基因(如ctl-1、ctl-2的上调和sod-1、sod-2的下调)的表达量。在基因水平上,GRBPs对线虫的影响主要是调控编码角质层结构成分和活性以及细胞色素酶P450的相关基因表达;在代谢水平上,GRBPs对线虫的影响主要是调控植物次生代谢产物的含量。结论:发芽粟米活性肽可以有效减轻铜诱导的氧化损伤,其作用机制可能是通过提高抗氧化酶活性、降低角质层和细胞色素酶P450相关基因表达和调节植物次生代谢产物的含量来实现。 展开更多
关键词 发芽粟米活性肽 秀丽隐杆线虫 诱导 氧化损伤
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过氧化氢诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤模型的建立 被引量:21
7
作者 金鹿 闫素梅 +3 位作者 史彬林 石惠宇 郭晓宇 李俊良 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期3651-3658,共8页
本试验旨在利用过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)作为刺激源,以细胞存活率及抗氧化指标为判断指标,建立奶牛乳腺上皮细胞( bovine mammary epithelial cells,BMEC)的氧化损伤模型。试验一采用单因子完全随机试验设计,将第3代贴壁... 本试验旨在利用过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)作为刺激源,以细胞存活率及抗氧化指标为判断指标,建立奶牛乳腺上皮细胞( bovine mammary epithelial cells,BMEC)的氧化损伤模型。试验一采用单因子完全随机试验设计,将第3代贴壁生长的BMEC随机分为42组,每组10个重复。细胞培养液中分别添加0、100、200、400、600、800和1000μmol/L H2O2,使之分别作用2、4、6、8、12、24 h,测定细胞数量,计算存活率。试验二是在试验一得出的适宜H2O2作用时间(本试验的结果为6 h)的基础上,采用单因子完全随机试验设计,将第3代贴壁生长的BMEC随机分为7组,每组6个重复,BMEC中添加不同浓度的H2O2(0、100、200、400、600、800和1000μmol/L)作用细胞6 h,收集细胞和培养液测定抗氧化指标,筛选使细胞发生氧化损伤的适宜H2O2作用浓度。试验一结果表明,600μmol/L H2O2作用细胞6 h,BMEC的存活率降低至79.79%。试验二结果表明,600-1000μmol/L组与其他各组相比均显著降低了谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性,提高了丙二醛含量(P〈0.05),但600、800和1000μmol/L组之间差异不显著( P〉0.10)。结果提示,H2O2作用浓度为600μmol/L、作用时间为6 h,使BMEC产生了明显的氧化应激,可作为建立细胞氧化损伤模型时的适宜条件。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 过氧化氢 氧化损伤模型
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靶向TLR4的siRNA慢病毒感染减少过氧化氢诱导的心肌H9C2细胞凋亡及氧化损伤 被引量:7
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作者 李飞 周静 +3 位作者 孙红梅 赵莉 张鹏 高峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期665-670,共6页
目的:研究沉默TLR4对过氧化氢(H_2O_2)诱导的心肌H9C2细胞凋亡及氧化损伤的影响。方法:用H_2O_2处理心肌H9C2细胞,qRT-PCR和Western blot检测细胞中Toll样受体4(TLR4) mRNA和蛋白水平。用siRNA TLR4慢病毒感染心肌H9C2细胞,H_2O_2诱导以... 目的:研究沉默TLR4对过氧化氢(H_2O_2)诱导的心肌H9C2细胞凋亡及氧化损伤的影响。方法:用H_2O_2处理心肌H9C2细胞,qRT-PCR和Western blot检测细胞中Toll样受体4(TLR4) mRNA和蛋白水平。用siRNA TLR4慢病毒感染心肌H9C2细胞,H_2O_2诱导以后,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)和剪切型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)水平,硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性,二硝基苯肼显色法检测上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测活性氧(ROS)水平,ELISA法检测培养液上清中TNF-α、IL-6水平。结果:H_2O_2诱导处理以后的心肌H9C2细胞中TLR4mRNA和蛋白水平均明显高于未经诱导的心肌H9C2细胞(P<0. 05)。siRNA TLR4慢病毒感染后可以降低心肌H9C2细胞中TLR4 mRNA和蛋白水平。H_2O_2诱导后的心肌H9C2细胞凋亡率升高,Bax和Cleaved Caspase-3蛋白水平升高,细胞中SOD活性降低,MDA水平升高,ROS水平也升高,同时细胞培养液中LDH水平升高,细胞分泌的TNF-α、IL-6增多,与未经诱导的心肌H9C2细胞比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。敲低TLR4后的心肌H9C2细胞经H_2O_2诱导处理以后,细胞凋亡率降低,细胞中Bax和Cleaved Caspase-3蛋白水平降低,细胞中SOD活性升高,MDA水平降低,ROS水平也降低,同时细胞培养液中LDH水平降低,细胞分泌的TNF-α、IL-6减少,与单纯经H_2O_2诱导处理的心肌H9C2细胞比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:沉默TLR4减弱H_2O_2诱导的心肌H9C2细胞凋亡及氧化损伤,减少细胞中ROS的聚集,减少心肌H9C2细胞分泌炎症因子。 展开更多
关键词 心肌H9C2细胞 过氧化氢 凋亡 TLR4 氧化损伤
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激活乙醛脱氢酶2的表达可减轻过氧化氢诱导的心肌细胞损伤 被引量:7
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作者 曹瑞平 王文连 +3 位作者 方婷婷 叶红伟 胡杰 高琴 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期938-942,共5页
目的探讨线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)在过氧化氢(H_2O_2)诱导的心肌细胞氧化应激损伤中的变化。方法正常体外培养的H9C2心肌细胞,取对数生长期细胞建立H_2O_2氧化应激损伤模型,分为正常对照组、正常+ALDH2激动剂Alda-1组、H_2O_2损伤组、H... 目的探讨线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)在过氧化氢(H_2O_2)诱导的心肌细胞氧化应激损伤中的变化。方法正常体外培养的H9C2心肌细胞,取对数生长期细胞建立H_2O_2氧化应激损伤模型,分为正常对照组、正常+ALDH2激动剂Alda-1组、H_2O_2损伤组、H_2O_2+ALDH2激动剂Alda-1组、H_2O_2+ALDH2抑制剂Daidzin组;MTT比色法测定各组心肌细胞活力,DHE荧光染色检测各组心肌细胞氧化应激水平,分光光度法和Western blotting法分别检测ALDH2活性及蛋白水平变化。结果与正常对照组相比,正常+ALDH2激动剂Alda-1组心肌细胞活力、氧化应激水平、ALDH2活性水平和蛋白表达均无明显变化(P>0.05);H_2O_2损伤组心肌细胞活力明显下降,DHE荧光染色显示氧化应激水平明显升高,ALDH2活性和蛋白表达降低(P<0.05);给予Alda-1激动ALDH2后,与H_2O_2损伤组相比,心肌细胞活力升高,氧化应激水平下降,ALDH2活性和蛋白表达均明显升高(P<0.05);给予Daidzin阻断ALDH2后,与H_2O_2损伤组相比,心肌细胞活力、氧化应激水平、ALDH2活性水平和蛋白表达均无明显变化(P<0.05)。结论 H_2O_2直接诱导H9C2心肌细胞ALDH2活性及蛋白表达下降;提高心肌ALDH2表达可减轻H_2O_2诱导的氧化应激损伤。 展开更多
关键词 乙醛脱氢酶2 氧化应激 心肌损伤 过氧化氢
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总丹酚酸对过氧化氢诱导内皮细胞损伤的抑制作用(英文) 被引量:25
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作者 任德成 杜冠华 张均田 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期333-337,共5页
目的 研究总丹酚酸对过氧化氢 (H2 O2 )诱导血管内皮细胞损伤的影响。方法 培养的人脐静脉内皮细胞 ,用MTT法测定内皮细胞的存活率。用碘化丙啶 (PI)染色和TUNEL法测定H2 O2 诱导内皮细胞的凋亡作用。用荧光法测定半胱天冬酶 (cas pas... 目的 研究总丹酚酸对过氧化氢 (H2 O2 )诱导血管内皮细胞损伤的影响。方法 培养的人脐静脉内皮细胞 ,用MTT法测定内皮细胞的存活率。用碘化丙啶 (PI)染色和TUNEL法测定H2 O2 诱导内皮细胞的凋亡作用。用荧光法测定半胱天冬酶 (cas pase) 3的活性。用Fura 2 /AM测定内皮细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ] i)。结果  1 0 0 μmol·L-1 H2 O2可使内皮细胞的存活率下降 40 .2 % ,提前 1h给予总丹酚酸 1 0和 1 0 0mg·L-1 使存活率分别增加8.4%和2 8.6 %。 1 0 0 μmol·L-1 H2 O2 还可引起内皮细胞的凋亡 ,PI染色的结果显示 ,H2 O2 处理内皮细胞 1 8h后 ,凋亡率从 (7.1 %± 0 .7) %升至 (38.1±4.0 ) %。总丹酚酸 1 0 0mg·L-1 提前处理内皮细胞1h,可使内皮细胞凋亡率降至 (1 3 .6± 0 .8) %。TUNEL方法检测结果显示 ,H2 O2 处理内皮细胞后 ,TUNEL染色阳性的细胞从 (3 .0± 0 .8) %升至 (30 .5±2 .9) % ,总丹酚酸 1 0 0mg·L-1 可使TUNEL阳性细胞率降至 (1 9.0± 3 .7) %。此外 ,H2 O2 处理细胞后 ,内皮细胞半胱天冬酶 3的活性增加 1 76% ,[Ca2 + ] i 升高 1 0 1 % ,而总丹酚酸可以抑制H2 O2 引起的半胱天冬酶 3活性的增加和 [Ca2 + ] i 升高。结论 总丹酚酸对H2 O2 展开更多
关键词 过氧化氢 总丹酚酸 内皮细胞损伤 血管 抑制作用 细胞凋亡
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过氧化氢诱导肠上皮干细胞DNA氧化损伤模型的建立 被引量:7
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作者 蔡善荣 郑树 +1 位作者 张苏展 彭佳萍 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第4期366-369,376,共5页
目的:探索建立过氧化氢诱导肠上皮细胞DNA氧化损伤模型,以便在体外进一步研究DNA氧化损伤在大肠癌发生发展中的作用。方法:过氧化氢以RPM11640培养基稀释成100、50、10、5、μmol/L5个浓度,以RPMI1640培养荆作空白对照。作用人胎... 目的:探索建立过氧化氢诱导肠上皮细胞DNA氧化损伤模型,以便在体外进一步研究DNA氧化损伤在大肠癌发生发展中的作用。方法:过氧化氢以RPM11640培养基稀释成100、50、10、5、μmol/L5个浓度,以RPMI1640培养荆作空白对照。作用人胎肠上皮干细胞不同时间(10min、30min、1h、1.5h、12h、24h)后,以MTT法检测细胞生存状况,以免疫组织化学方法检测DNA特异性氧化损伤产物8-羟-2-脱氧鸟苷(8-OhdG),用SPSS10.0软件以线性回归方法检验肠上皮干细胞在不同时间的生存率变化趋势。结果:MTT活性检测结果表明,在10~30min时,各浓度过氧化氢作用后的细胞活性较高,为60%~80%,但随时间推移,细胞活性下降,至24h,降至30%左右,时间趋势检验表明,除100、50μmol/L过氧化氢组和空白对照组外,其余各组的生存率随过氧化氢作用时间的延长,生存率下降,时间趋势差异具统计学意义。过氧化氢作用时间在10~30min内,100、50μmol/L组的细胞活性明显低于1~10μmol/L组20%左右,但在1.0h以上各组,虽然过氧化氢浓度不同,但在同一作用时间内细胞活性无明显差别。过氧化氢处理肠上皮细胞15min后进行8-OhdG免疫组织化学检测,结果除对照组阴性外,其余各组肠上皮细胞在不同浓度过氧化氢作用后的胞核及胞浆染色均呈棕褐色,为阳性。结论:过氧化氢能诱导肠上皮细胞发生DNA氧化损伤,肠上皮细胞DNA氧化损伤模型的条件以1~10μmol/L过氧化氢作用10~30min为宜。 展开更多
关键词 DNA损伤/药物作用 细胞 培养的 DNA氧化损伤 肠上皮干细胞 过氧化氢 8-OHDG
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过氧化氢诱导肺微血管内皮损伤的实验研究 被引量:3
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作者 肖贞良 孙耕耘 +2 位作者 夏前明 钱桂生 孙翊道 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期274-276,共3页
目的 探讨H2 O2 诱导培养肺微血管内皮细胞损伤的机制。方法 观察H2 O2 对大鼠肺微血管内皮细胞 (RP MVEC)的形态、单层通透性、F 肌动蛋白和 β AR的影响。结果 H2 O2 浓度大于 1mmol·L-1作用 48h内观察到细胞脱落和破裂。 10m... 目的 探讨H2 O2 诱导培养肺微血管内皮细胞损伤的机制。方法 观察H2 O2 对大鼠肺微血管内皮细胞 (RP MVEC)的形态、单层通透性、F 肌动蛋白和 β AR的影响。结果 H2 O2 浓度大于 1mmol·L-1作用 48h内观察到细胞脱落和破裂。 10mmol·L-1H2 O2 90min内可使RPMVEC单层通透性增高、F 肌动蛋白发生明显解聚和 β AR显著下调 ;FOR、山莨菪碱和CTX可抑制上述变化。结论 H2 O2引起的RPMVEC脱落与破裂呈浓度和时间依赖性。H2 O2引起RPMVEC单层通透性增高的机制与F 肌动蛋白解聚密切相关 ;β AR参与内皮通透性调节。FOR、山莨菪碱和CTX对H2 O2 引起RPMVEC单层通透性增高有一定的保护作用。 展开更多
关键词 过氧化氢 内皮细胞损伤 损伤 实验研究
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硫氧还蛋白对过氧化氢诱导的BRL-3A细胞损伤的保护作用 被引量:3
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作者 余文兰 王朵朵 +1 位作者 郭剑英 胡莲美 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第6期154-158,共5页
本试验利用不同浓度过氧化氢(H2O2)作用于BRL-3A大鼠肝细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测BRL-3A细胞存活数量以确定H2O2最适损伤浓度。试验随机分为正常对照组、H2O2处理组和硫氧还蛋白(2.5和5μmol/L)预处理组,用脂质过氧化物丙二... 本试验利用不同浓度过氧化氢(H2O2)作用于BRL-3A大鼠肝细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测BRL-3A细胞存活数量以确定H2O2最适损伤浓度。试验随机分为正常对照组、H2O2处理组和硫氧还蛋白(2.5和5μmol/L)预处理组,用脂质过氧化物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)试剂盒测定细胞的氧化应激变化。结果显示1000μmol/L H2O2对BRL-3A细胞增殖具有显著的抑制作用(P<0.05);2.5μmol/L硫氧还蛋白对H2O2损伤的BRL-3A细胞具有保护作用,能显著抑制H2O2诱导的BRL-3A细胞损伤产生MDA(P<0.05),并显著增加细胞SOD及CAT的活性(P<0.05),从而保护肝细胞。本试验结果表明,硫氧还蛋白对H2O2诱导BRL-3A细胞的氧化应激损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 硫氧还蛋白 过氧化氢 损伤 保护
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谷氨酰胺对过氧化氢诱导氧化应激人结肠癌HT-29细胞损伤和凋亡的影响 被引量:2
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作者 肖英平 桂国弘 +3 位作者 陈安国 何祥祥 李开锋 杨华 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期2734-2742,共9页
本试验旨在通过研究谷氨酰胺对过氧化氢(H_2O_2)诱导氧化应激人结肠癌HT-29细胞损伤和凋亡的影响,阐明谷氨酰胺的抗氧化效果和作用机理。HT-29细胞经不同浓度[0(对照组)、0.5、2.0、10.0 mmol/L]谷氨酰胺和0.35 mmol/L H_2O_2分别处理12... 本试验旨在通过研究谷氨酰胺对过氧化氢(H_2O_2)诱导氧化应激人结肠癌HT-29细胞损伤和凋亡的影响,阐明谷氨酰胺的抗氧化效果和作用机理。HT-29细胞经不同浓度[0(对照组)、0.5、2.0、10.0 mmol/L]谷氨酰胺和0.35 mmol/L H_2O_2分别处理12、24、32 h后,测定细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并采用荧光定量PCR方法分析谷氨酰胺对H_2O_2诱导的细胞凋亡相关基因的mRNA相对表达量,以及采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法对HT-29细胞染色,并用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果表明:1)处理24 h后,0.5、2.0 mmol/L Gln组SOD活性显著高于对照组(P<0.05);处理32 h后,0.5、2.0 mmol/L Gln组SOD活性显著高于对照组(P<0.05),MDA含量显著低于对照组(P<0.05)。2)处理12 h后,各组天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)mRNA相对表达量无显著差异(P>0.05)。与对照组比较,0.5 mmol/L Gln组核转录因子κB(NF-κB)mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),0.5与2.0 mmol/L Gln组B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。处理24 h后,与对照组比较,0.5、2.0和10.0 mmol/L Gln组Caspase-3、NF-κB和Bax mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05),Bcl-2mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。处理32 h后,与对照组比较,2.0 mmol/L Gln组细胞表面诱导凋亡分子(FAS)、Caspase-3、NF-κB、Bax mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05),Bcl-2mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);10.0 mmol/L Gln组FAS、Caspase-3、NF-κB、Bax mRNA相对表达量均显著升高(P<0.05)。3)处理24 h后,与对照组比较,Gln处理使活细胞数量提高了5.32%~11.97%,坏死细胞数量降低了6.75%~12.66%。处理32 h后,与对照组比较,Gln处理使活细胞数量提高了1.39%~7.63%,坏死细胞数量降低了3.40%~4.57%。由此可见,谷氨酰胺可抑制氧化应激反应,降低H_2O_2诱导的HT-29细胞凋亡。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 氧化损伤 细胞凋亡 HT-29细胞 过氧化氢
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miRNA-99a对过氧化氢诱导neuro-2a细胞氧化损伤的影响 被引量:3
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作者 陶真 王荣亮 +1 位作者 赵海苹 罗玉敏 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第3期305-309,共5页
目的研究microRNA-99a(miR-99a)对过氧化氢所诱导神经细胞neuro-2a氧化损伤的影响。方法常规培养neuro-2a细胞并分为3组:正常对照组,过氧化氢100μmol/L刺激组,miR-99a预处理组(转染miRNA-99a mimics+过氧化氢100μmol/L刺激),用CCK-8... 目的研究microRNA-99a(miR-99a)对过氧化氢所诱导神经细胞neuro-2a氧化损伤的影响。方法常规培养neuro-2a细胞并分为3组:正常对照组,过氧化氢100μmol/L刺激组,miR-99a预处理组(转染miRNA-99a mimics+过氧化氢100μmol/L刺激),用CCK-8试剂盒检测细胞存活率,生化试剂盒检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)含量和总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)活性,Western blotting检测突触小体相关蛋白(synaptosoma associated protein of molecular mass 25 000,SNAP25)及Mn-SOD、细胞外超氧化物歧化酶(extracellular SOD,EC-SOD)的蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,过氧化氢刺激的2组细胞存活率明显下降,分别为85%和89%(P<0.05),但miR-99a预处理组的细胞存活率下降程度较小仅为11%(P<0.05)。进一步研究发现,过氧化氢刺激引起细胞T-SOD、Mn-SOD活性降低(P<0.05),转染miR-99a mimics不但能增强T-SOD和Mn-SOD的活性,还能促进Mn-SOD和EC-SOD的表达(P<0.05)。过氧化氢导致细胞中NADH含量降低(P<0.05),miR-99a能够增加NADH含量甚至高于正常细胞水平(P<0.05)。miR-99a还有增加neuro-2a细胞表达SNAP25的趋势。结论 miR-99a对过氧化氢诱导neuro-2a细胞引起的氧化损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 miR-99a neuro-2a 过氧化氢 氧化损伤
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山奈酚在H_(2)O_(2)诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤及凋亡中的作用与机制研究 被引量:1
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作者 李亚楠 孙朝晖 +3 位作者 王海燕 左建霞 赵娴 刘明琦 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2025年第1期22-26,共5页
目的探究山奈酚在过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人晶状上皮细胞氧化损伤、凋亡中的作用,以及对Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路的调控作用。方法体外培养人晶状上皮细胞HLE-B3并分为:空白组(不做干预处理)... 目的探究山奈酚在过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人晶状上皮细胞氧化损伤、凋亡中的作用,以及对Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路的调控作用。方法体外培养人晶状上皮细胞HLE-B3并分为:空白组(不做干预处理)、模型组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2))、山奈酚组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+40μmol·L^(-1)山奈酚)、AG490组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+50μmol·L^(-1) JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490)、抑制剂组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+40μmol·L^(-1)山奈酚+50μmol·L^(-1) AG490)和激活剂组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+40μmol·L^(-1)山奈酚+0.5μmol·L^(-1) JAK2/STAT3信号通路激活剂C-A1)。干预24 h后,采用Hoechst 33258染色法测定细胞凋亡率;丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测MDA、SOD水平;Western blot测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、JAK2、STAT3、磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平。结果与空白组相比,模型组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均升高(均为P<0.05),SOD和Bcl-2蛋白表达水平均降低(均为P<0.05)。与模型组相比,山奈酚组和AG490组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均降低(均为P<0.05),SOD和Bcl-2蛋白表达水平均升高(均为P<0.05)。与山奈酚组相比,抑制剂组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均降低,SOD和Bcl-2蛋白表达水平均升高(均为P<0.05);激活剂组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均升高,SOD和Bcl-2蛋白表达水平均降低(均为P<0.05)。结论山奈酚能够通过抑制JAK2/STAT3信号通路发挥减轻H_(2)O_(2)诱导的HLE-B3细胞氧化损伤的作用,并抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 白内障 晶状体上皮细胞 山奈酚 过氧化氢 JAK2/STAT3通路 氧化损伤 凋亡
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桂花提取物的抗氧化活性及对t-BHP诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用 被引量:1
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作者 冯庆 徐思远 +5 位作者 任梦 郝思怡 袁欣 陈佳蕊 杨旭 马萍 《化学与生物工程》 北大核心 2025年第1期53-58,共6页
采用DPPH法、ABTS法、FRAP法评价了桂花水提取物、95%乙醇提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物的抗氧化活性,并探究了桂花水提取物对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人肝癌细胞HepG2氧化损伤的保护作用。结果表明,桂花提... 采用DPPH法、ABTS法、FRAP法评价了桂花水提取物、95%乙醇提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物的抗氧化活性,并探究了桂花水提取物对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人肝癌细胞HepG2氧化损伤的保护作用。结果表明,桂花提取物具有一定的抗氧化活性,但不同溶剂提取物的抗氧化活性存在差异;桂花水提取物与HepG2细胞具有良好的生物相容性,可以抑制t-BHP诱导的HepG2细胞中8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的产生,还显著降低了丙二醛(MDA)水平。 展开更多
关键词 桂花 氧化 HEPG2 叔丁基过氧化氢(t-BHP) 氧化损伤
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新型复合水凝胶对H_(2)O_(2)诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护作用
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作者 王岳 马宁 +5 位作者 卢嘉骏 王成瑶 陈琳渝 任宇晨 李景武 孙红 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期352-359,共8页
目的:探讨新型复合水凝胶对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:小鼠皮下注射水凝胶100μL,1、14和28 d正常饲养后处死小鼠,取材,HE染色观察水凝胶的组织相容性。提取出生1d SD大鼠... 目的:探讨新型复合水凝胶对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:小鼠皮下注射水凝胶100μL,1、14和28 d正常饲养后处死小鼠,取材,HE染色观察水凝胶的组织相容性。提取出生1d SD大鼠的原代心肌细胞,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。原代心肌细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组和水凝胶(H_(2)O_(2)+Hydrogel)组。对照组原代心肌细胞正常培养,H_(2)O_(2)组原代心肌细胞采用200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)溶液处理24 h;HH_(2)O_(2)+Hydrogel组原代心肌细胞采用1 g·L^(-1)的水凝胶与200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)共孵育24 h。采用细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测各组心肌细胞活性,双氢乙啶(DHE)和2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测各组心肌细胞中活性氧(ROS)水平,鬼笔环肽荧光染色标记法检测各组心肌细胞中纤维形肌动蛋白(F-actin)表达情况,免疫荧光法检测各组心肌细胞中连接蛋白43 (Cx43)和心肌肌钙蛋白T (cTnT)表达情况,TUNEL染色法检测各组心肌细胞凋亡率,Western blotting法检测各组心肌细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果:HE染色,水凝胶周围组织炎性细胞浸润较少,皮下埋植的炎症反应较小。与对照组比较,H_(2)O_(2)组心肌细胞活性明显降低(P<0.05),细胞中ROS水平明显升高(P<0.05),细胞中Cx43、cTnT和F-actin蛋白表达水平明显降低(P<0.001),心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.01),心肌细胞中Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.001),Bax蛋白表达水平降低(P<0.01);与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+Hydrogel组心肌细胞活性明显升高(P<0.05),细胞中ROS水平明显降低(P<0.01),细胞中cTnT、Cx43和F-actin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.001),心肌细胞中Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01),Bax蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论:水凝胶能够通过清除环境中的ROS促进心肌细胞相关蛋白的表达,抑制心肌细胞凋亡,发挥对氧化应激环境下心肌细胞的保护作用。 展开更多
关键词 水凝胶 心肌细胞 过氧化氢 氧化应激损伤 细胞凋亡
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过氧化氢诱导斜带石斑鱼原代肝细胞氧化损伤模型的构建 被引量:6
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作者 张润蔚 王玲 +1 位作者 张春晓 宋凯 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期1227-1232,共6页
本试验以斜带石斑鱼原代培养肝细胞为研究对象,以过氧化氢为刺激源,以肝细胞存活率和抗氧化指标的变化为判断指标,旨在建立稳定的斜带石斑鱼原代肝细胞氧化损伤模型。在原代肝细胞培养液中分别添加0(对照)、100、200、400、600、800和1 ... 本试验以斜带石斑鱼原代培养肝细胞为研究对象,以过氧化氢为刺激源,以肝细胞存活率和抗氧化指标的变化为判断指标,旨在建立稳定的斜带石斑鱼原代肝细胞氧化损伤模型。在原代肝细胞培养液中分别添加0(对照)、100、200、400、600、800和1 000μmol/L过氧化氢,使之分别作用2、4、6、8、12和24 h,共42组,每组10个重复,测定肝细胞存活率。在得出适宜过氧化氢作用时间的基础上,使每个浓度的过氧化氢(每个过氧化氢浓度设6个重复)作用于肝细胞适宜时间后,收集肝细胞和培养液测定抗氧化指标,筛选使肝细胞发生氧化损伤的适宜过氧化氢作用浓度。结果显示:800μmol/L过氧化氢作用肝细胞8 h,斜带石斑鱼肝细胞的存活率降低至61.98%;800和1 000μmol/L组与其他各组相比,肝细胞超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶(600μmol/L组除外)和过氧化氢酶活性显著降低(P<0.05),丙二醛与脂质过氧化物含量显著升高(P<0.05),但800和1 000μmol/L组之间差异不显著(P>0.05)。以上结果表明,过氧化氢作用浓度为800μmol/L、作用时间为8 h,可作为建立斜带石斑鱼肝细胞氧化损伤模型的适宜条件。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 原代肝细胞 过氧化氢 氧化损伤模型
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樱柏酸对叔丁基过氧化氢诱导SH-SY5Y神经细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量:3
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作者 鄢黎 何乡 +2 位作者 马泽康 李沛波 苏薇薇 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期51-58,共8页
采用TBHP处理SH-SY5Y细胞的方法,建立了细胞氧化应激损伤模型,用以评价樱柏酸对细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。同时借助MTS法、β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法、乳酸脱氢酶(LDH)含量检测法、Annexin V-FITC/PI双染法、2′,7′-二... 采用TBHP处理SH-SY5Y细胞的方法,建立了细胞氧化应激损伤模型,用以评价樱柏酸对细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。同时借助MTS法、β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法、乳酸脱氢酶(LDH)含量检测法、Annexin V-FITC/PI双染法、2′,7′-二氯荧光素二乙酸盐(DCFH-DA)法以及酶联免疫法(ELISA)法等对细胞的活性及衰老相关指标进行了检测。研究结果显示樱柏酸对TBHP诱导的SH-SY5Y氧化应激损伤细胞模型具有保护作用,并且能够降低细胞衰老比例、细胞凋亡水平,其作用机制可能通过减轻细胞膜和DNA等氧化应激损伤、提高体内抗氧化酶SOD和GSH-Px酶活力减少ROS含量起效。 展开更多
关键词 樱柏酸 SH-SY5Y细胞 氧化应激 叔丁基过氧化氢 细胞损伤
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