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白桦环阿齐醇合成酶(CAS)基因与达玛烯二醇合成酶(DS)基因的双基因RNA干扰载体构建
被引量：
3
1
作者
梁甜
马泓思
+2 位作者
尹静
詹亚光
张梦岩
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期355-362,共8页
环阿齐醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)和达玛烯二醇合成酶(Dammarenediol synthase,DS)为白桦三萜合成过程分支途径关键酶基因,对CAS和DS基因的抑制或沉默将有利于三萜前体-2,3氧化角鲨烯向目标产物白桦脂醇和齐墩果酸合成。利用...
环阿齐醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)和达玛烯二醇合成酶(Dammarenediol synthase,DS)为白桦三萜合成过程分支途径关键酶基因,对CAS和DS基因的抑制或沉默将有利于三萜前体-2,3氧化角鲨烯向目标产物白桦脂醇和齐墩果酸合成。利用同源序列PCR方法及pRNAi-GG新型载体,进行DS单基因RNAi及DS与CAS双基因RNAi载体的构建。结果显示,分别克隆获得CAS和DS c DNA序列长度为300和509 bp,Blast同源序列比对与已知日本白桦BPX1和OSCBPD相似度为100%和92%。依据基因RNAi引物设计及pRNAi-GG使用原则,分别将CAS、DS的正向片段和反向片段有序地连接到pRNAi-GG载体PDK内含子两侧,并转化大肠杆菌Trans1-T1中,经PCR及克隆测序验证,获得白桦DS单基因和CAS、DS双基因干扰载体,并通过三亲杂交方法分别获得含有两个RNAi载体的工程农杆菌菌株。该研究为进一步通过基因工程手段阻断白桦三萜分支途径及促进前体物质向目标产物白桦酯醇和齐墩果酸方向合成奠定了基础。
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关键词
白桦
三萜
RNA干扰载体
环阿齐
醇
合成酶
(CAS)
达
玛
烯
二
醇
合成酶
(
ds
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题名
白桦环阿齐醇合成酶(CAS)基因与达玛烯二醇合成酶(DS)基因的双基因RNA干扰载体构建
被引量：
3
1
作者
梁甜
马泓思
尹静
詹亚光
张梦岩
机构
东北林业大学生命科学学院
东北林业大学林学院林木遗传育种与生物技术国家重点实验室
出处
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期355-362,共8页
基金
国家自然基金资助项目(31200428)
黑龙江省自然科学基金项目(C201110)
哈尔滨市青年创新基金项目(2012RFQXN007)
文摘
环阿齐醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)和达玛烯二醇合成酶(Dammarenediol synthase,DS)为白桦三萜合成过程分支途径关键酶基因,对CAS和DS基因的抑制或沉默将有利于三萜前体-2,3氧化角鲨烯向目标产物白桦脂醇和齐墩果酸合成。利用同源序列PCR方法及pRNAi-GG新型载体,进行DS单基因RNAi及DS与CAS双基因RNAi载体的构建。结果显示,分别克隆获得CAS和DS c DNA序列长度为300和509 bp,Blast同源序列比对与已知日本白桦BPX1和OSCBPD相似度为100%和92%。依据基因RNAi引物设计及pRNAi-GG使用原则,分别将CAS、DS的正向片段和反向片段有序地连接到pRNAi-GG载体PDK内含子两侧,并转化大肠杆菌Trans1-T1中,经PCR及克隆测序验证,获得白桦DS单基因和CAS、DS双基因干扰载体,并通过三亲杂交方法分别获得含有两个RNAi载体的工程农杆菌菌株。该研究为进一步通过基因工程手段阻断白桦三萜分支途径及促进前体物质向目标产物白桦酯醇和齐墩果酸方向合成奠定了基础。
关键词
白桦
三萜
RNA干扰载体
环阿齐
醇
合成酶
(CAS)
达
玛
烯
二
醇
合成酶
(
ds
)
Keywords
Betula platyphylla Suk （ Birch. ）
triterpenoid
RNA interference
cycloartenol synthase （ CAS ）
dammarenediol synthase （
ds
）
分类号
S792.153 [农业科学—林木遗传育种]
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1
白桦环阿齐醇合成酶(CAS)基因与达玛烯二醇合成酶(DS)基因的双基因RNA干扰载体构建
梁甜
马泓思
尹静
詹亚光
张梦岩
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2015
3
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