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1株绵羊边界病病毒的分离鉴定与序列分析
被引量:
3
1
作者
刘霞
毛立
+4 位作者
李文良
杨蕾蕾
张纹纹
魏建忠
江杰元
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期434-442,共9页
对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行...
对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行病毒分离鉴定。通过Npro基因RT-PCR扩增、电镜观察、病毒全基因组序列分析,并对分离毒株5′-UTR和Npro基因进行遗传进化分析。结果显示,该毒株在MDBK细胞上盲传至第8代,不发生细胞病变。RT-PCR扩增获得Npro基因预期大小片段,电镜观察以及测序分析表明成功分离出1株BDV,将其命名为JSLS12-01。设计覆盖BDV全基因组的6对引物,RT-PCR扩增并测序,该分离株全基因组序列大小为12 227bp(GenBank登录号为KC963426)。序列比对结果显示,该毒株基因组序列和氨基酸序列与已有BDV分离株之间相似性分别为72.3%~80.4%和80.1%~89.7%。5′-UTR和Npro基因系统进化分析显示,该分离株与BDV 3参考毒株亲缘关系最近,相似性最高分别为87.7%和75.8%。结果证实从绵羊血液样品中鉴定并分离到1株ncp型BDV分离株,经序列分析表明该毒株属于BDV 3亚型。
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关键词
边界病病毒
分离
鉴定
序列分析
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职称材料
山东省外观健康羊群中检出羊边界病病毒
被引量:
4
2
作者
彭程
王素春
+4 位作者
庄青叶
侯广宇
黄娟
单虎
陈继明
《中国动物检疫》
CAS
2015年第3期1-3,共3页
2014年从山东省外观健康的牛羊采集鼻拭子样品共707份,提取其RNA,用流感病毒特异性引物进行RT-PCR检测。对RT-PCR扩增的阳性产物进行序列测定,意外发现其中1份羊拭子样品含有羊边界病病毒,并且该结果得到其他试验验证。结合我国2012年...
2014年从山东省外观健康的牛羊采集鼻拭子样品共707份,提取其RNA,用流感病毒特异性引物进行RT-PCR检测。对RT-PCR扩增的阳性产物进行序列测定,意外发现其中1份羊拭子样品含有羊边界病病毒,并且该结果得到其他试验验证。结合我国2012年首次在安徽和江苏两地检出该病毒,以及当前我国羊群流通情况,推测该病毒可能在我国有所存在。该调研结果对分析各类RT-PCR检测的假阳性产生原因,有参考意义。并提示RT-PCR检测结果难以作为疫病或感染病诊断的确切依据。其诊断结果有时需要用荧光探针或测序进行进一步鉴定。
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关键词
边界病病毒
羊
RT-PCR
系统进化
假阳性
山东
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职称材料
边界病病毒E2蛋白质的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
被引量:
2
3
作者
毛立
刘霞
+4 位作者
李文良
杨蕾蕾
张纹纹
魏建忠
江杰元
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2015年第1期93-99,共7页
边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原。为了建立检测BDV特异抗体的ELISA方法,本研究将BDV基因克隆入原核表达载体p ET-32a(+),并构建重组表达菌,经SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白质。以纯化...
边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原。为了建立检测BDV特异抗体的ELISA方法,本研究将BDV基因克隆入原核表达载体p ET-32a(+),并构建重组表达菌,经SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白质。以纯化的重组表达蛋白质为抗原,建立间接ELISA(r E2-ELISA)检测方法。通过反应条件优化,确定抗原包被浓度4.0μg/ml;封闭液为20 g/L BSA;血清最佳稀释度为1∶50,孵育1 h;二抗最佳稀释倍数为1∶30 000,作用45 min;以TMB为底物显色10 min。用该ELISA方法检测瘟病毒属的CSFV、BVDV阳性血清,结果均为阴性。对187份山羊血清样品进行临床检测,与Svanova试剂盒检测结果阳性符合率为76.25%,总符合率为74.87%;上述检测方法同时与Western blot鉴定结果进行比较,结果显示,Western blot结果与r E2-ELISA检测结果的符合率为79.55%,高于与Svanova试剂盒检测的符合率(72.73%)。表明建立的间接ELISA检测方法可适用于临床BDV血清样品的抗体检测。
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关键词
边界病病毒
E2蛋白质
间接ELISA
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职称材料
土耳其小反刍动物感染的边界病病毒(BDV)是一个新的BDV亚型
4
作者
Oguzoglu T C
晋大鹏
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第11期181-181,共1页
绵、山羊血样采自土耳其的艾丁和布尔杜尔省的8个小反刍动物群,应用抗原捕获ELISA法检测其是否感染边界病病毒。对临床诊断为患病的羔羊,记录其病理和免疫组化特征。阳性BDV羔羊的尸检结果显示为,被毛异常,低髓鞘形成的非化脓性脑脊髓...
绵、山羊血样采自土耳其的艾丁和布尔杜尔省的8个小反刍动物群,应用抗原捕获ELISA法检测其是否感染边界病病毒。对临床诊断为患病的羔羊,记录其病理和免疫组化特征。阳性BDV羔羊的尸检结果显示为,被毛异常,低髓鞘形成的非化脓性脑脊髓炎引发了后肢麻痹。免疫组化检测结果发现,脑的所有部分(包括小脑、大脑半球和中脑)都有边界病病毒抗原存在。
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关键词
边界病病毒
绵羊
山羊
序列
土耳其
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职称材料
由一头持续感染母羊将边界病病毒传染给绵羊和牛
5
作者
黄骏明
《国外兽医学(畜禽传染病)》
1995年第1期49-52,共4页
关键词
家畜
羊
病
母羊
边界病病毒
绵羊
牛
病
传染
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职称材料
牛病毒性腹泻病毒荧光定量PCR检测方法
6
作者
武玲玲
《中国畜牧业》
2024年第19期53-54,共2页
牛病毒性腹泻病病毒(BVDV)为一类黄病毒科、瘟病毒属的单股正链RNA病毒。该病毒在血清学上与猪瘟病毒(CSFV)及羊边界病病毒(BDV)存在交叉反应。此类病毒具有突破宿主特异性交叉感染的能力,不仅感染牛,还可感染其他动物。BVDV的存在对养...
牛病毒性腹泻病病毒(BVDV)为一类黄病毒科、瘟病毒属的单股正链RNA病毒。该病毒在血清学上与猪瘟病毒(CSFV)及羊边界病病毒(BDV)存在交叉反应。此类病毒具有突破宿主特异性交叉感染的能力,不仅感染牛,还可感染其他动物。BVDV的存在对养殖生产造成很大危害。牛血清制备生物制品可能存在BVDV感染和潜在感染的风险。基于此,本文分析了牛病毒性腹泻/黏膜病病毒荧光定量PCR检测方法,以期为相关人员提供参考。
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关键词
牛
病毒
性腹泻
病毒
宿主特异性
黄
病毒
科
瘟
病毒
属
交叉感染
交叉反应
BVDV
边界病病毒
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职称材料
边界病
被引量:
2
7
作者
杨林
张绍学
+1 位作者
牛钟相
王新平
《山东农业大学学报(自然科学版)》
CSCD
1999年第1期79-84,共6页
本文依据众多资料,对羊边界病的病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理学、免疫学、诊断及控制作了全面概述。
关键词
边界
病
边界病病毒
羊
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职称材料
羊边界病致病机制及宿主嗜性变化的研究进展
被引量:
1
8
作者
赵泽阳
冯茜莉
+3 位作者
汪梦竹
蒲飞洋
马忠仁
程燕
《浙江农业科学》
2023年第2期474-479,共6页
羊边界病病毒(border disease virus,BDV)属于黄病毒科瘟病毒属,经常在牛、羊等反刍动物群体间广泛流行传播,能以多种动物为宿主且对健康动物具有一定危害。BDV感染反刍动物可引起持续性感染和免疫抑制,给畜牧业造成严重危害,且在多个...
羊边界病病毒(border disease virus,BDV)属于黄病毒科瘟病毒属,经常在牛、羊等反刍动物群体间广泛流行传播,能以多种动物为宿主且对健康动物具有一定危害。BDV感染反刍动物可引起持续性感染和免疫抑制,给畜牧业造成严重危害,且在多个国家和地区呈现出一定的流行性趋势。目前尚无公认的有效疫苗来预防BDV,所以如何科学饲养以及做好安全防控就成了重中之重。本文对BDV在牛群、羊群内的传播进行研究分析,有助于人们对BDV可能造成的风险进行预估并进行防控。因此,从BDV的分子生物学、流行现状、流行病学、临床症状以及与牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的混合感染来进行研究分析,有助于人们深入了解BDV致病及传播扩散的生物学机制,为该病的诊断、防治和疫苗研发提供新思路和策略。
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关键词
边界病病毒
反刍动物
持续感染
流行
病
学
宿主嗜性
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职称材料
用ELISA检测绵羊和猪慢病毒感染
9
作者
朱其太
《畜牧兽医科技信息》
2001年第9期12-12,共1页
英国学者Graham等应用ELISA对北爱尔兰地区绵羊和猪慢病毒感染进行血清学调查。对10个地区92个畜群918头母羊血清检测,发现为边界病病毒阳性的有28个畜群(阳性率为30.4%)的49头母羊(阳性率为5.3%),其畜群阳性范围从0—70%不等,但阳...
英国学者Graham等应用ELISA对北爱尔兰地区绵羊和猪慢病毒感染进行血清学调查。对10个地区92个畜群918头母羊血清检测,发现为边界病病毒阳性的有28个畜群(阳性率为30.4%)的49头母羊(阳性率为5.3%),其畜群阳性范围从0—70%不等,但阳性畜群中阳性数却没有差异。在阳性畜群中,平均阳性率为17.5%,最高为40%。对14份阳性血清进行牛病毒性腹泻病毒Ⅰ型(BVDVI)
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关键词
ELISA检测
慢
病毒
边界病病毒
牛
病毒
性腹泻
病毒
绵羊
阳性率
血清学调查
中和抗体
畜群
血清检测
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职称材料
题名
1株绵羊边界病病毒的分离鉴定与序列分析
被引量:
3
1
作者
刘霞
毛立
李文良
杨蕾蕾
张纹纹
魏建忠
江杰元
机构
安徽农业大学动物科技学院
江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期434-442,共9页
基金
江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(12)3064)
文摘
对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行病毒分离鉴定。通过Npro基因RT-PCR扩增、电镜观察、病毒全基因组序列分析,并对分离毒株5′-UTR和Npro基因进行遗传进化分析。结果显示,该毒株在MDBK细胞上盲传至第8代,不发生细胞病变。RT-PCR扩增获得Npro基因预期大小片段,电镜观察以及测序分析表明成功分离出1株BDV,将其命名为JSLS12-01。设计覆盖BDV全基因组的6对引物,RT-PCR扩增并测序,该分离株全基因组序列大小为12 227bp(GenBank登录号为KC963426)。序列比对结果显示,该毒株基因组序列和氨基酸序列与已有BDV分离株之间相似性分别为72.3%~80.4%和80.1%~89.7%。5′-UTR和Npro基因系统进化分析显示,该分离株与BDV 3参考毒株亲缘关系最近,相似性最高分别为87.7%和75.8%。结果证实从绵羊血液样品中鉴定并分离到1株ncp型BDV分离株,经序列分析表明该毒株属于BDV 3亚型。
关键词
边界病病毒
分离
鉴定
序列分析
Keywords
border disease virus(BDV)
isolation
identification
sequence analysis
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
山东省外观健康羊群中检出羊边界病病毒
被引量:
4
2
作者
彭程
王素春
庄青叶
侯广宇
黄娟
单虎
陈继明
机构
青岛农业大学
中国动物卫生与流行病学中心
出处
《中国动物检疫》
CAS
2015年第3期1-3,共3页
文摘
2014年从山东省外观健康的牛羊采集鼻拭子样品共707份,提取其RNA,用流感病毒特异性引物进行RT-PCR检测。对RT-PCR扩增的阳性产物进行序列测定,意外发现其中1份羊拭子样品含有羊边界病病毒,并且该结果得到其他试验验证。结合我国2012年首次在安徽和江苏两地检出该病毒,以及当前我国羊群流通情况,推测该病毒可能在我国有所存在。该调研结果对分析各类RT-PCR检测的假阳性产生原因,有参考意义。并提示RT-PCR检测结果难以作为疫病或感染病诊断的确切依据。其诊断结果有时需要用荧光探针或测序进行进一步鉴定。
关键词
边界病病毒
羊
RT-PCR
系统进化
假阳性
山东
Keywords
border disease virus
sheep
RT-PCR
evolution
false positive
Shandong
分类号
S852.654 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
边界病病毒E2蛋白质的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
被引量:
2
3
作者
毛立
刘霞
李文良
杨蕾蕾
张纹纹
魏建忠
江杰元
机构
江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心
安徽农业大学动物科技学院
出处
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2015年第1期93-99,共7页
基金
江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(14)2090]
文摘
边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原。为了建立检测BDV特异抗体的ELISA方法,本研究将BDV基因克隆入原核表达载体p ET-32a(+),并构建重组表达菌,经SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白质。以纯化的重组表达蛋白质为抗原,建立间接ELISA(r E2-ELISA)检测方法。通过反应条件优化,确定抗原包被浓度4.0μg/ml;封闭液为20 g/L BSA;血清最佳稀释度为1∶50,孵育1 h;二抗最佳稀释倍数为1∶30 000,作用45 min;以TMB为底物显色10 min。用该ELISA方法检测瘟病毒属的CSFV、BVDV阳性血清,结果均为阴性。对187份山羊血清样品进行临床检测,与Svanova试剂盒检测结果阳性符合率为76.25%,总符合率为74.87%;上述检测方法同时与Western blot鉴定结果进行比较,结果显示,Western blot结果与r E2-ELISA检测结果的符合率为79.55%,高于与Svanova试剂盒检测的符合率(72.73%)。表明建立的间接ELISA检测方法可适用于临床BDV血清样品的抗体检测。
关键词
边界病病毒
E2蛋白质
间接ELISA
Keywords
border disease virus
E2 protein
indirect ELISA
分类号
Q939.4 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
土耳其小反刍动物感染的边界病病毒(BDV)是一个新的BDV亚型
4
作者
Oguzoglu T C
晋大鹏
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第11期181-181,共1页
文摘
绵、山羊血样采自土耳其的艾丁和布尔杜尔省的8个小反刍动物群,应用抗原捕获ELISA法检测其是否感染边界病病毒。对临床诊断为患病的羔羊,记录其病理和免疫组化特征。阳性BDV羔羊的尸检结果显示为,被毛异常,低髓鞘形成的非化脓性脑脊髓炎引发了后肢麻痹。免疫组化检测结果发现,脑的所有部分(包括小脑、大脑半球和中脑)都有边界病病毒抗原存在。
关键词
边界病病毒
绵羊
山羊
序列
土耳其
分类号
S858.315.3 [农业科学—临床兽医学]
S852.615 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
由一头持续感染母羊将边界病病毒传染给绵羊和牛
5
作者
黄骏明
出处
《国外兽医学(畜禽传染病)》
1995年第1期49-52,共4页
关键词
家畜
羊
病
母羊
边界病病毒
绵羊
牛
病
传染
分类号
S858.205.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
牛病毒性腹泻病毒荧光定量PCR检测方法
6
作者
武玲玲
机构
辽宁省北票市动物疫病预防控制中心
出处
《中国畜牧业》
2024年第19期53-54,共2页
文摘
牛病毒性腹泻病病毒(BVDV)为一类黄病毒科、瘟病毒属的单股正链RNA病毒。该病毒在血清学上与猪瘟病毒(CSFV)及羊边界病病毒(BDV)存在交叉反应。此类病毒具有突破宿主特异性交叉感染的能力,不仅感染牛,还可感染其他动物。BVDV的存在对养殖生产造成很大危害。牛血清制备生物制品可能存在BVDV感染和潜在感染的风险。基于此,本文分析了牛病毒性腹泻/黏膜病病毒荧光定量PCR检测方法,以期为相关人员提供参考。
关键词
牛
病毒
性腹泻
病毒
宿主特异性
黄
病毒
科
瘟
病毒
属
交叉感染
交叉反应
BVDV
边界病病毒
分类号
S85 [农业科学—兽医学]
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职称材料
题名
边界病
被引量:
2
7
作者
杨林
张绍学
牛钟相
王新平
机构
山东农业大学动物科技学院
中国人民解放军农牧大学动医系
出处
《山东农业大学学报(自然科学版)》
CSCD
1999年第1期79-84,共6页
文摘
本文依据众多资料,对羊边界病的病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理学、免疫学、诊断及控制作了全面概述。
关键词
边界
病
边界病病毒
羊
Keywords
border disease(BD)
border disease virus(BDV)
分类号
S858.265.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
羊边界病致病机制及宿主嗜性变化的研究进展
被引量:
1
8
作者
赵泽阳
冯茜莉
汪梦竹
蒲飞洋
马忠仁
程燕
机构
西北民族大学生物医学研究中心
西北民族大学生命科学与工程学院
出处
《浙江农业科学》
2023年第2期474-479,共6页
基金
甘肃省科学技术厅自然基金(20JR5A505)
中央高校基本科研业务费(31920200073)。
文摘
羊边界病病毒(border disease virus,BDV)属于黄病毒科瘟病毒属,经常在牛、羊等反刍动物群体间广泛流行传播,能以多种动物为宿主且对健康动物具有一定危害。BDV感染反刍动物可引起持续性感染和免疫抑制,给畜牧业造成严重危害,且在多个国家和地区呈现出一定的流行性趋势。目前尚无公认的有效疫苗来预防BDV,所以如何科学饲养以及做好安全防控就成了重中之重。本文对BDV在牛群、羊群内的传播进行研究分析,有助于人们对BDV可能造成的风险进行预估并进行防控。因此,从BDV的分子生物学、流行现状、流行病学、临床症状以及与牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的混合感染来进行研究分析,有助于人们深入了解BDV致病及传播扩散的生物学机制,为该病的诊断、防治和疫苗研发提供新思路和策略。
关键词
边界病病毒
反刍动物
持续感染
流行
病
学
宿主嗜性
分类号
S858.26 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
用ELISA检测绵羊和猪慢病毒感染
9
作者
朱其太
出处
《畜牧兽医科技信息》
2001年第9期12-12,共1页
文摘
英国学者Graham等应用ELISA对北爱尔兰地区绵羊和猪慢病毒感染进行血清学调查。对10个地区92个畜群918头母羊血清检测,发现为边界病病毒阳性的有28个畜群(阳性率为30.4%)的49头母羊(阳性率为5.3%),其畜群阳性范围从0—70%不等,但阳性畜群中阳性数却没有差异。在阳性畜群中,平均阳性率为17.5%,最高为40%。对14份阳性血清进行牛病毒性腹泻病毒Ⅰ型(BVDVI)
关键词
ELISA检测
慢
病毒
边界病病毒
牛
病毒
性腹泻
病毒
绵羊
阳性率
血清学调查
中和抗体
畜群
血清检测
分类号
S854.4 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
1株绵羊边界病病毒的分离鉴定与序列分析
刘霞
毛立
李文良
杨蕾蕾
张纹纹
魏建忠
江杰元
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
在线阅读
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职称材料
2
山东省外观健康羊群中检出羊边界病病毒
彭程
王素春
庄青叶
侯广宇
黄娟
单虎
陈继明
《中国动物检疫》
CAS
2015
4
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职称材料
3
边界病病毒E2蛋白质的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
毛立
刘霞
李文良
杨蕾蕾
张纹纹
魏建忠
江杰元
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2015
2
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职称材料
4
土耳其小反刍动物感染的边界病病毒(BDV)是一个新的BDV亚型
Oguzoglu T C
晋大鹏
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009
0
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职称材料
5
由一头持续感染母羊将边界病病毒传染给绵羊和牛
黄骏明
《国外兽医学(畜禽传染病)》
1995
0
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职称材料
6
牛病毒性腹泻病毒荧光定量PCR检测方法
武玲玲
《中国畜牧业》
2024
0
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职称材料
7
边界病
杨林
张绍学
牛钟相
王新平
《山东农业大学学报(自然科学版)》
CSCD
1999
2
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职称材料
8
羊边界病致病机制及宿主嗜性变化的研究进展
赵泽阳
冯茜莉
汪梦竹
蒲飞洋
马忠仁
程燕
《浙江农业科学》
2023
1
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职称材料
9
用ELISA检测绵羊和猪慢病毒感染
朱其太
《畜牧兽医科技信息》
2001
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职称材料
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