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ETEC K88菌毛蛋白抗体PPA-ELISA检测方法的建立 被引量:3
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作者 李书光 李峰 +5 位作者 苗立中 张娜 肖跃强 陈金龙 孙翠平 沈志强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第6期95-98,共4页
以纯化的大肠埃希菌K88菌毛蛋白为包被抗原,建立了检测大肠埃希菌K88IgG抗体的间接ELISA方法。确定了间接ELISA的最适反应条件,即最佳抗原包被浓度为1μg/mL,兔抗体稀释倍数为1∶10,猪抗体稀释倍数为1∶100,确定最佳封闭液为50g/L脱脂奶... 以纯化的大肠埃希菌K88菌毛蛋白为包被抗原,建立了检测大肠埃希菌K88IgG抗体的间接ELISA方法。确定了间接ELISA的最适反应条件,即最佳抗原包被浓度为1μg/mL,兔抗体稀释倍数为1∶10,猪抗体稀释倍数为1∶100,确定最佳封闭液为50g/L脱脂奶粉,最佳封闭时间为0.5h,血清反应时间0.5h,二抗反应时间1h,底物室温反应时间为15min,阴阳性临界值兔血清为0.33、猪血清为0.45。证实该间接PPA-ELISA方法特异性强、重复性好、敏感度高,可以作为疫苗效力检验和流行病学调查的参考方法。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠埃希菌 K88 辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌a蛋白-酶联免疫吸附试验
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