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辛酸-硫酸铵法纯化细胞培养上清中单克隆抗体的条件优化 被引量:8
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作者 刘若飞 张萃 +2 位作者 葛如意 陈玉琼 刘晓波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1303-1306,共4页
常用的单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb)纯化方法有辛酸硫酸铵沉淀法、 离子交换色谱法、 免疫亲和色谱法、 蛋白A亲和层析法等, 以此纯化小鼠IgG类或IgM类mAb。其中辛酸硫酸铵沉淀法简单易行, 无需复杂的仪器及设备, 实... 常用的单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb)纯化方法有辛酸硫酸铵沉淀法、 离子交换色谱法、 免疫亲和色谱法、 蛋白A亲和层析法等, 以此纯化小鼠IgG类或IgM类mAb。其中辛酸硫酸铵沉淀法简单易行, 无需复杂的仪器及设备, 实验中所用试剂均为普通试剂, 容易获得, 比其他纯化方法更值得推广。本文探讨辛酸-硫酸铵法纯化细胞培养上清中IgG类型的mAb优化条件, 目的在于更好的回收细胞培养上清中的mAb, 减少mAb制备过程中的大量抗体丢失, 为mAb的进一步开发利用提供实验条件。 展开更多
关键词 辛酸-硫酸铵 MAB 纯化 正交实验
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辛酸-硫酸铵联合沉淀法在单克隆抗体纯化中的应用 被引量:25
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作者 陈丹 孙广瑞 柳增善 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第26期8105-8105,8108,共2页
[目的]为了解决在单克隆抗体纯化中纯度与产量的矛盾。[方法]分别采用辛酸法、硫酸铵法和辛酸-硫酸铵联合沉淀法,研究对抗体的纯化效果。[结果]结果表明,单纯使用辛酸法或硫酸铵法都没有很好的纯化效果,而采用辛酸-硫酸铵联合沉淀法纯... [目的]为了解决在单克隆抗体纯化中纯度与产量的矛盾。[方法]分别采用辛酸法、硫酸铵法和辛酸-硫酸铵联合沉淀法,研究对抗体的纯化效果。[结果]结果表明,单纯使用辛酸法或硫酸铵法都没有很好的纯化效果,而采用辛酸-硫酸铵联合沉淀法纯化效果很好。[结论]辛酸-硫酸铵联合沉淀法完全可以满足ELISA试验的要求,但在操作中要控制好反应条件。 展开更多
关键词 抗体 辛酸-硫酸铵 克隆
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MRSA-PBP2a单克隆抗体乳胶凝集检测法的建立 被引量:3
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作者 徐霞 陈思聪 唐晓华 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期611-614,628,共5页
【目的】应用抗PBP2a单克隆抗体,以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶,建立快速检测MRSA-PBP2a的乳胶凝集法。【方法】以辛酸-硫酸铵法纯化PBP2a单克隆抗体,将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺(EDC)共价偶联,并对偶联条件(偶联抗... 【目的】应用抗PBP2a单克隆抗体,以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶,建立快速检测MRSA-PBP2a的乳胶凝集法。【方法】以辛酸-硫酸铵法纯化PBP2a单克隆抗体,将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺(EDC)共价偶联,并对偶联条件(偶联抗体浓度、乳胶浓度、偶联时间和偶联缓冲液)进行探索和优化,建立检测PBP2a的乳胶凝集法。【结果】140mg/L的抗体浓度与15g/L的羧化聚苯乙烯乳胶,在pH 5.8缓冲液中偶联8h后有较好的凝集效果和偶联效率,所建立的乳胶凝集法敏感性和特异性良好。【结论】初步建立了检测PBP2a的胶乳凝集法,为研制MRSA快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 乳胶凝集法 单克隆抗体 检测法 PBP2A 辛酸-硫酸铵 共价偶联 抗体浓度 聚苯乙烯
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两种简易高效的单克隆抗体提纯方法 被引量:18
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作者 曹军平 闫桂玲 +1 位作者 刘秀梵 张如宽 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1995年第2期52-54,共3页
本文介绍两种纯化单克隆抗体的方法,即用聚乙二醇(PEG,Mr=6000)沉淀法提纯IgM和辛酸—硫酸铵沉淀法纯化IgG。用这两种方法成功地从小鼠腹水型单克隆抗体中得到了较纯净的、活性损失较少的抗体制剂。经多次使用,证... 本文介绍两种纯化单克隆抗体的方法,即用聚乙二醇(PEG,Mr=6000)沉淀法提纯IgM和辛酸—硫酸铵沉淀法纯化IgG。用这两种方法成功地从小鼠腹水型单克隆抗体中得到了较纯净的、活性损失较少的抗体制剂。经多次使用,证实它们是两种简易、高效的单克隆抗体提纯方法,适于推广应用。 展开更多
关键词 单克隆抗体 提纯 聚乙二醇 辛酸-硫酸铵
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鸡IgG快速分离纯化和纯度鉴定 被引量:6
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作者 钟旗 玛依拉 +1 位作者 康吉克孜.艾沙 张婕 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2000年第8期20-21,共2页
关键词 血清 IGG 分离 纯化 辛酸-硫酸铵 生物活性 纯度鉴定
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两种纯化兔抗酸性红73免疫球蛋白G方法的比较研究 被引量:1
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作者 常向彩 杨晓农 +2 位作者 朱子凤 陈瑞 刘凌颖 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期124-126,共3页
分别采用饱和硫酸铵法和辛酸—硫酸铵法纯化兔抗酸性红73(acid red 73,AR73)免疫球蛋白G(IgG)。通过二喹啉甲酸(BCA)法、十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试验、间接ELISA法分别测定IgG的浓度、纯度及效价。结果显示,饱和... 分别采用饱和硫酸铵法和辛酸—硫酸铵法纯化兔抗酸性红73(acid red 73,AR73)免疫球蛋白G(IgG)。通过二喹啉甲酸(BCA)法、十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试验、间接ELISA法分别测定IgG的浓度、纯度及效价。结果显示,饱和硫酸铵法所提IgG浓度为36.44mg/mL,最高效价达1.6×105;辛酸—硫酸铵法所提IgG浓度为15.79mg/mL,最高效价达3.2×105。提示,辛酸—硫酸铵法IgG纯度优于饱和硫酸铵法。 展开更多
关键词 酸性红73 酸性大红GR 饱和硫酸铵 辛酸-硫酸铵
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