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捕获输出蛋白编码基因的小分子量质粒载体的构建与验证
1
作者
余旭平
朱军莉
+2 位作者
姚学萍
何世成
牛冬
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期127-132,共6页
自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SPAmp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoR 和Xba 间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分...
自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SPAmp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoR 和Xba 间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分酶切补平自连,筛选得到消除Hind 位点端EcoR 位点的质粒,即为用于输出信号基因片段捕获的目的载体pMBL,大小为3.46kb.经酶切鉴定和测序分析,表明构建的载体与预期设计的一致,并应用四环素抗性基因(Tetr)对载体的有效性进行了验证,证明构建的载体pMBL能有效捕获含启动子和信号肽序列的输出蛋白编码基因.
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关键词
质粒载体
克隆
信号肽
输出蛋白编码基因
细菌
启动子
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职称材料
题名
捕获输出蛋白编码基因的小分子量质粒载体的构建与验证
1
作者
余旭平
朱军莉
姚学萍
何世成
牛冬
机构
浙江大学动物医学系
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期127-132,共6页
文摘
自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SPAmp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoR 和Xba 间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分酶切补平自连,筛选得到消除Hind 位点端EcoR 位点的质粒,即为用于输出信号基因片段捕获的目的载体pMBL,大小为3.46kb.经酶切鉴定和测序分析,表明构建的载体与预期设计的一致,并应用四环素抗性基因(Tetr)对载体的有效性进行了验证,证明构建的载体pMBL能有效捕获含启动子和信号肽序列的输出蛋白编码基因.
关键词
质粒载体
克隆
信号肽
输出蛋白编码基因
细菌
启动子
Keywords
bacteria
genes encoding exported proteins
signal peptide
cloning vector
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
捕获输出蛋白编码基因的小分子量质粒载体的构建与验证
余旭平
朱军莉
姚学萍
何世成
牛冬
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
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