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微小RNA-133b对紫外线诱导的晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用及其调控机制
被引量：
12
1
作者
李晓彤
秦宇
+2 位作者
赵江月
闵锐
张劲松
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第11期977-983,共7页
背景 研究证实紫外线B照射是白内障发生的主要原因之一，其机制与晶状体上皮细胞（LECs）凋亡有关。微小RNA-133b（miR-133b）参与氧化应激诱导的LECs凋亡的调控过程，但其是否参与紫外线诱导白内障的发病过程及其机制尚未阐明。 目...
背景 研究证实紫外线B照射是白内障发生的主要原因之一，其机制与晶状体上皮细胞（LECs）凋亡有关。微小RNA-133b（miR-133b）参与氧化应激诱导的LECs凋亡的调控过程，但其是否参与紫外线诱导白内障的发病过程及其机制尚未阐明。 目的 观察miR-133b对紫外线诱导白内障LECs凋亡的抑制作用及其调控机制。 方法 将20只8周龄SPF级C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为白内障模型组和正常对照组，其中白内障模型组小鼠用波长302 nm的紫外线直接照射眼部5 min，照射强度为300 W/cm2，每天照射1次，共照射1周；正常对照组小鼠不给于任何干预。于末次照射后24 h处死各组小鼠并摘出10只眼球以制备全眼球切片。取人LECs细胞系（SRA01/04）紫外线照射25 min，并继续培养4 h作为紫外线照射组，正常对照组细胞不作任何干预。取紫外线照射模型组细胞接种于96孔板并分为miR-133b模拟物组、模拟物阴性对照组、miR-133b抑制物组和抑制物对照组，分别用lipofectamine2000联合50 nmol/L miR-133b模拟物、miR-133b模拟物对照剂、100 nmol/L miR-133b抑制物或miR-133b抑制物对照剂瞬时转染细胞。采用实时荧光定量PCR法检测小鼠晶状体组织和不同转染组人LECs中miR-133b mRNA及其预测靶基因BCL2L2 mRNA的表达以评估转染效率；采用TUNEL凋亡检测试剂盒检测小鼠晶状体组织中LECs和不同转染组人LECs的凋亡情况。 结果 正常对照组小鼠晶状体前囊膜LECs排列规则，未发现TUNEL染色阳性细胞，白内障模型组小鼠LECs排列稀疏，可见凋亡细胞呈红色荧光。紫外线照射组细胞凋亡率为（43.90±9.30）%，明显高于正常对照组的（1.08±0.49）%，差异有统计学意义（t＝－7.963，P＝0.015）。白内障模型组小鼠晶状体组织和紫外线照射组细胞中miR-133b mRNA的相对表达量分别低于正常对照组小鼠和正常人LECs，差异均有统计学意义（t＝－2.958，P＝0.042；t＝－6.195，P＝0.003）。白内障模型组小鼠晶状体组织和紫外线照射组细胞中BCL2L2 mRNA的相对表达量分别高于正常对照组小鼠和正常人LECs，差异均有统计学意义（t＝3.761，P＝0.020；t＝12.437，P＝0.000）。miR-133b模拟物组人LECs中miR-133b mRNA的相对表达量明显高于miR-133b模拟物对照组，而BCL2L2 mRNA的相对表达量明显低于miR-133b模拟物对照组，差异均有统计学意义（t＝10.883、－5 927.617，均P〈0.01）；miR-133b抑制物组人LECs中miR-133b mRNA的相对表达量明显低于miR-133b抑制物对照组，而BCL2L2 mRNA的相对表达量明显高于miR-133b抑制物对照组，差异均有统计学意义（t＝－1 606.622、17.556，均P〈0.01）。miR-133b模拟物组LECs凋亡率明显低于miR-133b模拟物对照组[（17.55±4.24）%与（43.62±9.19）%]，miR-133b抑制物组LECs凋亡率为（78.23±12.42）%，明显高于miR-133b抑制物对照组的（48.01±9.68）%，差异均有统计学意义（t＝－4.462，P＝0.011；t＝3.324，P＝0.029）。 结论 miR-133b可防止紫外线照射所致的白内障的形成，其机制可能与靶向负性调控BCL2L2基因从而调控LECs的凋亡过程有关。
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关键词
微小RNA
紫外线/不良作用
辐射损伤/病理
白内障/防控
晶状体上皮细胞
近交系
C57BL小鼠
微小RNA-133b
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职称材料
题名
微小RNA-133b对紫外线诱导的晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用及其调控机制
被引量：
12
1
作者
李晓彤
秦宇
赵江月
闵锐
张劲松
机构
中国医科大学附属第四医院眼科中国医科大学眼科医院辽宁省晶状体学重点实验室
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第11期977-983,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目（81470617、81270988、81371003）
国家自然科学基金青年科学基金项目（81600717）
辽宁省自然科学基金项目（201602851）
文摘
背景 研究证实紫外线B照射是白内障发生的主要原因之一，其机制与晶状体上皮细胞（LECs）凋亡有关。微小RNA-133b（miR-133b）参与氧化应激诱导的LECs凋亡的调控过程，但其是否参与紫外线诱导白内障的发病过程及其机制尚未阐明。 目的 观察miR-133b对紫外线诱导白内障LECs凋亡的抑制作用及其调控机制。 方法 将20只8周龄SPF级C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为白内障模型组和正常对照组，其中白内障模型组小鼠用波长302 nm的紫外线直接照射眼部5 min，照射强度为300 W/cm2，每天照射1次，共照射1周；正常对照组小鼠不给于任何干预。于末次照射后24 h处死各组小鼠并摘出10只眼球以制备全眼球切片。取人LECs细胞系（SRA01/04）紫外线照射25 min，并继续培养4 h作为紫外线照射组，正常对照组细胞不作任何干预。取紫外线照射模型组细胞接种于96孔板并分为miR-133b模拟物组、模拟物阴性对照组、miR-133b抑制物组和抑制物对照组，分别用lipofectamine2000联合50 nmol/L miR-133b模拟物、miR-133b模拟物对照剂、100 nmol/L miR-133b抑制物或miR-133b抑制物对照剂瞬时转染细胞。采用实时荧光定量PCR法检测小鼠晶状体组织和不同转染组人LECs中miR-133b mRNA及其预测靶基因BCL2L2 mRNA的表达以评估转染效率；采用TUNEL凋亡检测试剂盒检测小鼠晶状体组织中LECs和不同转染组人LECs的凋亡情况。 结果 正常对照组小鼠晶状体前囊膜LECs排列规则，未发现TUNEL染色阳性细胞，白内障模型组小鼠LECs排列稀疏，可见凋亡细胞呈红色荧光。紫外线照射组细胞凋亡率为（43.90±9.30）%，明显高于正常对照组的（1.08±0.49）%，差异有统计学意义（t＝－7.963，P＝0.015）。白内障模型组小鼠晶状体组织和紫外线照射组细胞中miR-133b mRNA的相对表达量分别低于正常对照组小鼠和正常人LECs，差异均有统计学意义（t＝－2.958，P＝0.042；t＝－6.195，P＝0.003）。白内障模型组小鼠晶状体组织和紫外线照射组细胞中BCL2L2 mRNA的相对表达量分别高于正常对照组小鼠和正常人LECs，差异均有统计学意义（t＝3.761，P＝0.020；t＝12.437，P＝0.000）。miR-133b模拟物组人LECs中miR-133b mRNA的相对表达量明显高于miR-133b模拟物对照组，而BCL2L2 mRNA的相对表达量明显低于miR-133b模拟物对照组，差异均有统计学意义（t＝10.883、－5 927.617，均P〈0.01）；miR-133b抑制物组人LECs中miR-133b mRNA的相对表达量明显低于miR-133b抑制物对照组，而BCL2L2 mRNA的相对表达量明显高于miR-133b抑制物对照组，差异均有统计学意义（t＝－1 606.622、17.556，均P〈0.01）。miR-133b模拟物组LECs凋亡率明显低于miR-133b模拟物对照组[（17.55±4.24）%与（43.62±9.19）%]，miR-133b抑制物组LECs凋亡率为（78.23±12.42）%，明显高于miR-133b抑制物对照组的（48.01±9.68）%，差异均有统计学意义（t＝－4.462，P＝0.011；t＝3.324，P＝0.029）。 结论 miR-133b可防止紫外线照射所致的白内障的形成，其机制可能与靶向负性调控BCL2L2基因从而调控LECs的凋亡过程有关。
关键词
微小RNA
紫外线/不良作用
辐射损伤/病理
白内障/防控
晶状体上皮细胞
近交系
C57BL小鼠
微小RNA-133b
Keywords
MicroRNAs
Ultraviolet rays/adverse effects
Radiation injuries/pathology
Cataract/ prevention ＆ control
Epithelial cells, lens
Mice, inbred C57BL
MicroRNA-133b
分类号
R776.1 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
微小RNA-133b对紫外线诱导的晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用及其调控机制
李晓彤
秦宇
赵江月
闵锐
张劲松
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
12
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