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一株多重耐药猪源ST37型肺炎克雷伯菌铁载体因子的遗传多样性分析 被引量：1
1
作者 闫鹤 梁慧贤 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第11期19-26,共8页
肺炎克雷伯菌是获得性感染相关的条件致病菌,被WHO列为急需研发新抗生素的耐药致病菌。铁载体因子是肺炎克雷伯菌在宿主细胞内增殖的重要毒力因子,主要包括肠杆菌素、耶尔森菌素、气杆菌素和沙门菌素。笔者前期从病猪的肝脏分离到一株... 肺炎克雷伯菌是获得性感染相关的条件致病菌,被WHO列为急需研发新抗生素的耐药致病菌。铁载体因子是肺炎克雷伯菌在宿主细胞内增殖的重要毒力因子,主要包括肠杆菌素、耶尔森菌素、气杆菌素和沙门菌素。笔者前期从病猪的肝脏分离到一株多重耐药ST37型(ST)肺炎克雷伯菌KP200,文中利用生物信息学软件,分析KP200与来自NCBI的ST37型的160株肺炎克雷伯菌菌株铁载体因子的进化关系及遗传多样性。单拷贝核心基因组进化树分析表明,KP200与1株中国的人源肺炎克雷伯菌位于同一个进化支,相似度为99.8%;铁载体因子分析表明,所有161株ST37型肺炎克雷伯菌都携带肠杆菌素entABCEF和fepABC,KP200与其他15株肺炎克雷伯菌携带气杆菌素转运基因iutA,且这些iutA基因序列间核苷酸相似性为73.49%~100%。与高毒力肺炎克雷伯菌NTUH-K2044携带的iutA核苷酸序列比较,发现KP200携带的iutA核苷酸序列中两个碱基突变,导致两个氨基酸替换:即亮氨酸替换成苯丙氨酸、缬氨酸替换成亮氨酸。本研究为肺炎克雷伯菌ST37型别菌株的进化及其毒力分析提供了基础数据。 展开更多
关键词 耐药致病菌 肺炎克雷伯菌 铁载体因子 进化关系 遗传多样性
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pcDNA3-hNGF真核表达载体的构建及其在大鼠骨髓基质干细胞中的表达 被引量：3
2
作者 粟谋 贝朝涌 +2 位作者 蒋林彬 徐威 陈宁 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期41-44,共4页
目的构建人神经生长因子(h NGF)真核表达载体pc DNA3-h NGF,检测其在大鼠骨髓基质干细胞中的表达。方法利用PCR扩增h NGF全长c DNA,构建真核表达载体pc DNA3-h NGF,经测序证实后将其转染至大鼠骨髓基质干细胞中,利用Western blot方法检... 目的构建人神经生长因子(h NGF)真核表达载体pc DNA3-h NGF,检测其在大鼠骨髓基质干细胞中的表达。方法利用PCR扩增h NGF全长c DNA,构建真核表达载体pc DNA3-h NGF,经测序证实后将其转染至大鼠骨髓基质干细胞中,利用Western blot方法检测h NGF的表达情况。结果 DNA测序结果显示构建的pc DNA3-h NGF表达载体与实验设计相符。Western blot检测显示该重组载体转染大鼠BMSCs 72h后,有h NGF的过表达。结论构建的pc DNA3-h NGF能在骨髓基质干细胞过表达h NGF蛋白,本研究为应用神经生长因子修饰的骨髓基质干细胞进行骨折治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 神经生长因子真核表达载体 骨髓基质干细胞 表达
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大鼠结膜囊成纤维细胞TGFβ_2特异性siRNA的筛选及其载体构建的研究 被引量：5
3
作者 马建民 赵家良 +3 位作者 卞爱琳 程钢炜 张文宝 张华 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2006年第6期577-581,共5页
目的筛选结膜囊成纤维细胞转化生长因子β2(TGFβ2)特异性siRNAs,并构建其载体。方法采用体外转录法合成4个TGFβ2siRNAs(L1、L2、L3、L4),分别转染体外培养的大鼠Tenon’s囊成纤维细胞,以未转染细胞作为对照,转染后48h采用RT-PCR技术... 目的筛选结膜囊成纤维细胞转化生长因子β2(TGFβ2)特异性siRNAs,并构建其载体。方法采用体外转录法合成4个TGFβ2siRNAs(L1、L2、L3、L4),分别转染体外培养的大鼠Tenon’s囊成纤维细胞,以未转染细胞作为对照,转染后48h采用RT-PCR技术检测所合成的siRNAs对TGFβ2mRNA表达的干扰作用;在此基础上,再构建有干扰作用siRNA的载体。结果与对照组相比,转染48h后,仅L4能够使大鼠Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2的mRNA表达水平明显下调,其余3条TGFβ2siRNAs未产生明显的干扰效果。经过测序检测证明成功构建了有干扰效果TGFβ2siRNA的载体。结论不同的TGFβ2siRNA对大鼠Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2mRNA表达具有不同的干扰效能;能够构建出有干扰效能的TGFβsiRNA特异性载体。 展开更多
关键词 大鼠 结膜囊成纤维细胞 转化生长因子β2mRNA 转化生长因子β2siRNA载体
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茯苓酸通过Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路调控铁死亡改善阿尔茨海默病大鼠认知障碍的研究 被引量：20
4
作者 樊赟 窦润鹏 +2 位作者 胡久略 侯紫君 周春祥 《中国全科医学》 北大核心 2024年第2期177-183,共7页
背景阿尔茨海默病(AD)是一种常见且不可逆转的神经退行性脑疾病,严重影响患者的生活品质和生存质量,目前仍缺乏有效的治疗方法延缓或阻止疾病进展。中药及其活性成分在防治AD方面具有重要潜力。目的探讨茯苓酸(PA)对AD大鼠认知障碍及核... 背景阿尔茨海默病(AD)是一种常见且不可逆转的神经退行性脑疾病,严重影响患者的生活品质和生存质量,目前仍缺乏有效的治疗方法延缓或阻止疾病进展。中药及其活性成分在防治AD方面具有重要潜力。目的探讨茯苓酸(PA)对AD大鼠认知障碍及核因子E2相关因子2(Nrf2)/溶质载体家族7A11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路的影响。方法2022年1—9月将75只6~8周龄雄性SPF级SD大鼠依据随机数字表法分为对照组(Control组)、AD模型组(Model组)、PA治疗组(PA组),PA+Nrf2抑制剂组(PA+ML385组),除Control组外制备AD大鼠模型。造模成功后,PA组腹腔注射50 mg/kg PA,PA+ML385组腹腔注射50 mg/kg PA+30 mg/kg Nrf2抑制剂ML385,Control组与Model组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。末次给药24 h后进行Morris水迷宫实验,第2、4、6天进行定位航行实验,记录大鼠到达平台的时间(逃避潜伏期),第7天移走平台,记录大鼠在120 s内滞留平台时间和穿越平台次数。Nissl染色后观察各组大鼠海马神经元病理变化,普鲁士蓝染色检测海马组织铁沉积,免疫荧光染色检测海马神经元GPX4表达,检测海马组织谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、Fe2+含量,蛋白质印迹法(Western blotting)检测大鼠海马组织Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达。结果末次给药第2、4、6天Model组逃避潜伏期高于Control组、PA组,PA+ML385组高于PA组,差异有统计学意义(P<0.05);Model组平台停留时间、穿越平台次数低于Control组、PA组,PA+ML385组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05)。Nissl染色结果示Model组神经元坏死严重,细胞核皱缩,尼氏体数目减少;PA组神经元坏死减少,排列紧密且尼氏体增多;PA+ML385组神经元损伤明显加重,尼氏体数目减少。普鲁士蓝染色结果示Model组铁沉积较Control组增加,与Model组比较,PA组铁沉积减少,PA+ML385组较PA组铁沉积增多。免疫荧光染色结果示Model组绿色荧光减弱,GPX4阳性细胞减少,PA组细胞绿色荧光较Model组增强,GPX4阳性细胞增多,PA+ML385组较PA组GPX4阳性细胞减少。Model组GSH低于Control组、PA组,PA+ML385组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05);Model组MDA、Fe2+高于Control组、PA组,PA+ML385组高于PA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Model组Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白相对表达量低于Control组、PA组,PA+ML385组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PA可改善AD大鼠认知障碍,其机制可能与通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路抑制铁死亡有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 茯苓酸 核因子E2相关因子2/溶质载体家族7A11/GPX4信号通路 铁死亡 大鼠
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基于蚁群算法的情感模型研究 被引量：4
5
作者 张国丽 李祚泳 《计算机应用》 CSCD 北大核心 2009年第10期2758-2761,共4页
情感是人类智能中的一个重要表现形式,在人类决策过程中起着重要的作用。从情感的特征出发,抽取影响情感产生的载体因子,引入蚁群算法思想,将携带载体因子的蚂蚁,采用串行的方式,通过反应强度值的不断更新,完成寻找最优情感状态的任务,... 情感是人类智能中的一个重要表现形式,在人类决策过程中起着重要的作用。从情感的特征出发,抽取影响情感产生的载体因子,引入蚁群算法思想,将携带载体因子的蚂蚁,采用串行的方式,通过反应强度值的不断更新,完成寻找最优情感状态的任务,以此来考察人类的情感变化。通过和隐马尔可夫情感模型相比较,可以看出基于蚁群算法思想的情感模型实现过程简单,并反映了情感状态的变化过程。仿真结果表明了该模型与实际相符合,对研究计算机情感表达有较好的作用。 展开更多
关键词 情感计算 蚁群算法 情感模型 载体因子 激励量
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侧脑室注射rAAV-HIF-1α基因治疗AD模型大鼠的研究 被引量：4
6
作者 孙祎敏 郝宏强 +2 位作者 孔卫娜 刘凌云 柴锡庆 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2711-2714,共4页
目的在体观察侧脑室注射缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)腺相关病毒rAAV-HIF-1α对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法健康雄性SD大鼠32只随机分为4组,每组8只:①... 目的在体观察侧脑室注射缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)腺相关病毒rAAV-HIF-1α对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法健康雄性SD大鼠32只随机分为4组,每组8只:①正常组(normal组):未作任何特殊处理;②AD模型组(AD组):右侧脑室注射2μlβ-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)25-35(10mg/m1);③假手术组(sham组):右侧脑室注射2μl生理盐水;④AD模型+rAAV-HIF-1a组(AD+rAAV-HIF-1a组):右侧脑室注射2μl Aβ25-35后1周右侧脑室注射10μl rAAV-HIF-1a(1×1012v.g/.m1)。以上各组动物于注射Aβ25-35或生理盐水后5周取材检测海马神经细胞HIF-1a蛋白表达及凋亡百分率。结果 Western blot检测表明rAAV-HIF-1α组海马神经细胞HIF-1α蛋白表达明显增强(P<0.05),同时可显著降低Aβ25-35诱导海马神经细胞凋亡百分率。结论侧脑室注射rAAV-HIF-1α能够在AD模型大鼠海马高效表达HIF-1α蛋白并抑制海马神经细胞凋亡。 展开更多
关键词 基因治疗 阿尔茨海默病 重组人类缺氧诱导因子-1α腺相关病毒载体 海马
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鸦胆子苦醇调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路对皮肤鳞癌细胞铁死亡的影响 被引量：9
7
作者 谌程程 何平 +1 位作者 黄宇婧 陈爱军 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期369-374,共6页
目的:探讨鸦胆子苦醇调节核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路对皮... 目的:探讨鸦胆子苦醇调节核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路对皮肤鳞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,cSCC)细胞铁死亡的影响。方法:CCK-8法检测0、100、250、500、700、900 nmol/L鸦胆子苦醇处理后人cSCC细胞系A431细胞增殖率,筛选出合适的鸦胆子苦醇作用浓度。体外培养的A431细胞随机分为对照组、鸦胆子苦醇低剂量组、鸦胆子苦醇高剂量组、特丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,TBHQ;Nrf2激活剂)组、鸦胆子苦醇高剂量+TBHQ组,以鸦胆子苦醇和TBHQ分组处理后,采用CCK-8法、Hoechst 33342染色法检测各组A431细胞增殖与凋亡;采用试剂盒检测各组A431细胞抗氧化因子[谷胱甘肽(glutathione,GSH)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)]水平及铁死亡指标[铁含量、活性氧(reactive oxygen species,ROS)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)]水平;采用免疫印迹实验检测各组A431细胞增殖、凋亡及Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,鸦胆子苦醇低、高剂量组细胞增殖率、GSH及CAT、SOD水平,以及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及Bcl-2、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率、铁含量、ROS及MDA水平和Bax蛋白表达均升高(P<0.05);鸦胆子苦醇高剂量组细胞增殖率、GSH及CAT、SOD水平,以及PCNA及Bcl-2、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达相比鸦胆子苦醇低剂量组进一步降低(P<0.05),凋亡率、铁含量、ROS及MDA水平和Bax蛋白表达进一步升高(P<0.05);TBHQ组细胞增殖率、GSH及CAT、SOD水平,以及PCNA及Bcl-2、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达升高(P<0.05),凋亡率、铁含量、ROS及MDA水平和Bax蛋白表达降低(P<0.05)。与鸦胆子苦醇高剂量组相比,鸦胆子苦醇高剂量+TBHQ组细胞增殖率、GSH及CAT、SOD水平,以及PCNA及Bcl-2、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达升高(P<0.05),凋亡率、铁含量、ROS及MDA水平和Bax蛋白表达降低(P<0.05)。结论:鸦胆子苦醇通过下调Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路而促进铁死亡,诱导cSCC细胞凋亡,并抑制其增殖。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 核因子E2相关因子2/溶质载体家族7成员11/谷胱甘肽过氧化物酶4 皮肤鳞癌 铁死亡
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