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微载体-肝细胞复合体冻存损伤机制及优化策略
1
作者 郝彬江 庾曾颖 刘宝林 《制冷学报》 北大核心 2025年第4期156-162,共7页
为提高细胞的存活率和贴壁率,优化人工肝支持系统中微载体-肝细胞复合体的冻存方案,通过实验评估了不同冷冻保护剂体积分数、加载温度和方式对细胞冻存效果的影响。研究发现,使用体积分数为5%的二甲亚砜(Me 2SO)在4℃预冷条件下,通过两... 为提高细胞的存活率和贴壁率,优化人工肝支持系统中微载体-肝细胞复合体的冻存方案,通过实验评估了不同冷冻保护剂体积分数、加载温度和方式对细胞冻存效果的影响。研究发现,使用体积分数为5%的二甲亚砜(Me 2SO)在4℃预冷条件下,通过两步加载法,能显著减少细胞毒性和渗透损伤,保持较高的细胞存活率和贴壁率。此外,还研究了降温速率和胞内冰形成对细胞冻存效果的影响,在-6℃植冰可以减轻胞内冰的损伤,提高细胞复苏后的贴壁率。在1℃/min降温速率下,体积分数为10%的Me 2SO尽管存在较高的毒性和渗透损伤,但由于热膨胀差异最小,冻存效果最佳。研究结果可为人工肝支持系统中微载体-肝细胞复合体的冻存提供技术支撑。 展开更多
关键词 低温保存 肝细胞-微载体复合体 冷冻保护剂 热膨胀损伤
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新型超薄软骨-软骨膜复合体预制刀在耳内镜下鼓膜成形术中的应用
2
作者 刘月红 周玲玲 +2 位作者 谭俊 周晶 韩朝 《中华耳科学杂志》 北大核心 2025年第6期750-753,共4页
目的探究用于制备超薄软骨-软骨膜复合体(ultrathin cartilage-perichondrium complex,UCPC)的新型预制刀的临床效果。方法设计制作一种新型预制刀,用于制备适合鼓膜成形术的UCPC,观察该预制刀的制作效率、成功率。回顾性纳入2022年2月... 目的探究用于制备超薄软骨-软骨膜复合体(ultrathin cartilage-perichondrium complex,UCPC)的新型预制刀的临床效果。方法设计制作一种新型预制刀,用于制备适合鼓膜成形术的UCPC,观察该预制刀的制作效率、成功率。回顾性纳入2022年2月至2022年9月复旦大学附属华东医院耳鼻咽喉科住院并接受单纯鼓膜修补手术的27例患者为研究对象,对UCPC厚度、厚薄均匀度及影响UCPC制作成功的因素进行分析。结果预制刀安装简单,易于掌握,制作快,成功率100%,制作UCPC和软骨片适用于鼓膜修补和鼓室成形术。UCPC厚度接近天然鼓膜的厚度,不受性别、侧别影响。使用UCPC进行鼓膜修补的患者术后鼓膜外观恢复良好,术后听阈低于术前,差异有统计学意义(P<0.001)。结论预制刀操作简单、耗时少,制作出的UCPC临床适应性强,适合临床推广。 展开更多
关键词 超薄软骨-软骨膜复合体 预制刀 耳内镜下鼓膜成形术
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细胞-支架复合体构建及其异体移植修复关节软骨缺损的形态学观察 被引量：1
3
作者 戴刚 李起鸿 +1 位作者 周强 石国华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期563-566,共4页
目的　探讨应用组织工程技术进行异体移植修复关节软骨缺损的有效性和可行性。方法　采用动态倒置显微镜与扫描显微镜观察及大体、组织学和免疫组织化学观察方法 ,以优化获取的单层传代培养幼兔关节软骨细胞及结构与性能优化的CPPf(Calc... 目的　探讨应用组织工程技术进行异体移植修复关节软骨缺损的有效性和可行性。方法　采用动态倒置显微镜与扫描显微镜观察及大体、组织学和免疫组织化学观察方法 ,以优化获取的单层传代培养幼兔关节软骨细胞及结构与性能优化的CPPf(Calciumpolyphosphatefibers ,CPPf) /PLLA (poly L lacticacid ,PLLA)自制支架复合材料 ,进行细胞 支架复合体体外构建与培养及其异体移植修复关节软骨缺损的病理形态学实验研究。结果　将适宜密度培养细胞种植于支架材料中 ,细胞密集 ,分布均匀 ;经一定时间体外培养 ,其种植细胞与支架材料粘附、生长繁殖并分泌细胞外基质 ;支架材料保持培养前的外形与内部微结构。其细胞 支架复合体异体移植修复关节软骨缺损的病理形态学特征为 :①修复后的关节面光滑 ,与周围组织整合良好 ;②软骨细胞呈柱状排列 ;③Ⅱ型胶原及硫化糖胺多糖在空间上分布均匀 ;④软骨下板得以重建 ;⑤修复组织与其下方骨质紧密结合 ;⑥支架材料逐渐降解吸收。结论　应用细胞 支架复合体异体移植进行关节软骨缺损修复 ,具有种植细胞来源广泛、可根据缺损大小和形状设计支架外形、使缺损完全生物学再生修复的优点。这一组织工程技术为关节软骨缺损完全再生修复提供了一条新的有效途径。 展开更多
关键词 组织工程 关节软骨 细胞-支架复合体 异体移植 缺损修复
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TGF-β通过miR-23a-3p/IRF1轴下调主要组织相容性复合体Ⅰ类表达促进肝癌免疫逃逸
4
作者 于滢 涂丽 +3 位作者 刘洋 宋雪翼 邵倩倩 唐小龙 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1397-1408,共12页
目的 探讨肝癌细胞中转化生长因子-β(TGF-β)调控主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHC-I)分子的机制及其在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法 设置对照组、TGF-β处理组及TGF-β联合TGF-βⅠ型受体抑制剂SB-431542干预组,通过Western blotting和RT-... 目的 探讨肝癌细胞中转化生长因子-β(TGF-β)调控主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHC-I)分子的机制及其在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法 设置对照组、TGF-β处理组及TGF-β联合TGF-βⅠ型受体抑制剂SB-431542干预组,通过Western blotting和RT-qPCR评估TGF-β对肝癌细胞MHC-I表达水平的影响;通过RNA转染及其干扰技术、RT-qPCR和Western blotting实验探究TGF-β调控肝癌细胞MHC-I表达水平的分子机制。将各组肝癌细胞与健康人外周血单个核细胞(PBMC)共培养,采用CCK-8、克隆形成实验检测肿瘤增殖能力;通过乳酸脱氢酶(LDH)释放实验、线粒体膜电位检测量化T细胞杀伤效率,并利用流式细胞术及ELISA分析T细胞活化水平。结果 TGF-β抑制肝癌细胞MHC-I表达(P<0.01),且T细胞活化水平降低,导致共培养体系中肿瘤增殖率上升且死亡率下降;TGF-β通过特异性上调miR-23a-3p(P<0.001,P<0.01),负向调控其靶基因IRF1(P<0.05),进而抑制MHC-I转录(P<0.01);过表达miR-23a-3p可重现IRF1/MHC-I表达抑制效应(P<0.05)。结论 TGF-β通过miR-23a-3p/IRF1信号轴下调MHC-I表达,削弱T细胞介导的抗肿瘤免疫应答,揭示了肝癌免疫逃逸的新机制。 展开更多
关键词 肝癌细胞 转化生长因子-Β 主要组织相容性复合体I类 肿瘤免疫逃逸
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同种异体脂肪源性间充质干细胞复合β-磷酸三钙支架修复兔桡骨大段骨缺损 被引量：6
5
作者 吴子征 李受珉 +2 位作者 王泽 李智 张键 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期338-343,共6页
目的探讨以β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)陶瓷为支架材料复合兔脂肪源性间充质干细胞(rabbit adipose-derived mesenchymal stem cells,rADSCs)构建组织工程骨修复骨缺损的可行性。方法将体外培养的rADSCs接种于β-TCP... 目的探讨以β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)陶瓷为支架材料复合兔脂肪源性间充质干细胞(rabbit adipose-derived mesenchymal stem cells,rADSCs)构建组织工程骨修复骨缺损的可行性。方法将体外培养的rADSCs接种于β-TCP支架上,构建rADSCs/β-TCP骨组织工程复合体,并进行体外培养。将24只新西兰大白兔在双侧桡骨中下段造成2cm长度的节段性骨缺损模型,随机平均分为3组,A组:空白对照组,不植入任何材料;B组:单β-TCP人工骨对照组;C组:rADSCs/β-TCP复合体实验组。在手术后2周、4周、6周和8周时进行X线检查,然后每组各选2只兔处死后取出标本,对标本进行大体观察以及常规HE染色,光镜下观察骨修复情况,并观察是否发生免疫排斥反应。结果 rADSCs在适当的诱导条件下具有成骨细胞分化潜能,复合β-TCP后对其生长分化无影响。X线检查结果发现,A组有稍多的骨组织形成,未见髓腔及正常骨影像学表现;B组虽然骨连接性基本恢复,但骨髓腔尚未完全再通;C组骨连接性完全恢复,骨缺损基本修复,骨髓腔再通。术后4周,C组可观察到骨缺损周围开始形成新生骨,并随着时间的延长新生骨量逐渐增多。术后6周,材料逐渐降解,材料孔隙内有新生骨长入。术后8周,C组材料降解明显,材料孔隙基本消失,髓腔已基本再通;B组部分骨髓腔再通,而A组未发现骨髓腔再通。新生骨组织面积比较,各时间点C组的面积最大,且其差异有统计学意义。组织学检测未见免疫排斥现象。结论 rADSCs在适当的诱导条件下具有成骨细胞分化潜能。ADSCs有望成为理想的修复骨缺损、促进骨折愈合的组织工程骨所需要的种子细胞,为大段骨缺损组织工程的修复提供可行的技术方案,为临床治疗大段骨缺损提供新的方法。 展开更多
关键词 脂肪源性间充质干细胞 骨组织工程复合体 大段骨缺损 Β-磷酸三钙 兔
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胶原-壳聚糖复合支架体外三维培养神经干细胞
6
作者 关水 刘天庆 +3 位作者 葛丹 陆瑞欣 马学虎 崔占峰 《大连理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期637-643,共7页
采用冷冻干燥法制备了胶原-壳聚糖复合支架并通过层粘连蛋白（LN）进行结构修饰，测定其物理性能特征，建立了胎鼠海马神经干细胞（NSCs）的三维培养体系，同时考察了NSCs与胶原-壳聚糖复合支架的生物相容性．孔径、孔隙率、吸水率、降... 采用冷冻干燥法制备了胶原-壳聚糖复合支架并通过层粘连蛋白（LN）进行结构修饰，测定其物理性能特征，建立了胎鼠海马神经干细胞（NSCs）的三维培养体系，同时考察了NSCs与胶原-壳聚糖复合支架的生物相容性．孔径、孔隙率、吸水率、降解率等参数的比较表明，体积比为7：3的复合支架更适合于体外细胞培养的要求，并且NSCs在经LN修饰后支架材料上的接种率得到明显提高；激光共聚焦显微镜及扫描电镜观察表明，NSCs能够在胶原-壳聚糖复合支架内良好地生长、增殖及分化．这些结果为NSCs的进一步临床移植应用，以及治疗神经系统疾病的新药筛选和机理研究等奠定了坚实的实验基础． 展开更多
关键词 神经干细胞 三维培养 复合支架 胶原-壳聚糖
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不良孕产夫妇着丝粒-动粒复合体的细胞遗传学研究 被引量：15
7
作者 焦海燕 墙克信 +3 位作者 陈银涛 彭亮 于黎明 张翠霞 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期344-346,共3页
为研究不良孕产夫妇染色体着丝粒 -动粒复合体 (centromerekinetochorecomplex ,CKC)变异与不良孕产的相关性 ,探索不良孕产中非整倍体形成的细胞遗传学基础 ,应用改良的着丝粒点 -核仁组织区 (Cd NOR)同步银染技术 ,分别对 5 3对不明... 为研究不良孕产夫妇染色体着丝粒 -动粒复合体 (centromerekinetochorecomplex ,CKC)变异与不良孕产的相关性 ,探索不良孕产中非整倍体形成的细胞遗传学基础 ,应用改良的着丝粒点 -核仁组织区 (Cd NOR)同步银染技术 ,分别对 5 3对不明原因的不良孕产夫妇和 5 7对已生育正常儿的正常夫妇外周血淋巴细胞染色体CKC变异类型及频率进行研究和分析。结果发现 ,不良孕产夫妇其小Cd、Cd消失、Cd迟滞和Cd NOR融合频率均较正常对照组明显增高 ,两者相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。CKC变异频率增高可能是导致不良孕产非整倍体形成的主要原因之一。 展开更多
关键词 不良孕产 着丝粒-动粒复合体 细胞遗传学 染色体异常
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两种软骨-软骨膜复合体在鼓室成形术中的应用 被引量：9
8
作者 孙文青 刘运春 王云霞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1896-1898,共3页
目的观察比较条栅状软骨-软骨膜和马蹄铁状软骨-软骨膜两种修复技术在鼓室成形术中的疗效。方法回顾分析我科2005～2008年39例(39耳)资料完整的鼓膜穿孔面积>40%患者应用两种类型自身软骨-软骨膜复合体的鼓室成形术,其中条栅状软骨... 目的观察比较条栅状软骨-软骨膜和马蹄铁状软骨-软骨膜两种修复技术在鼓室成形术中的疗效。方法回顾分析我科2005～2008年39例(39耳)资料完整的鼓膜穿孔面积>40%患者应用两种类型自身软骨-软骨膜复合体的鼓室成形术,其中条栅状软骨组19例(19耳),马蹄铁状软骨组20例(20耳)。对术后鼓膜愈合率和听力指标进行统计分析。结果术后3个月两组鼓膜愈合率均为100%,而言语频率的术前气骨导差与术后气骨导差的差值,马蹄铁状组优于条栅状组(P<0.05)。结论两种软骨-软骨膜复合体修补技术在修补鼓膜大、中穿孔的鼓室成形术均有较好疗效,术后3个月时马蹄铁状软骨-软骨膜组语频听力的改善优于条栅状软骨-软骨膜组。 展开更多
关键词 软骨-软骨膜复合体 鼓室成形术 鼓膜穿孔
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半月板纤维软骨细胞与壳聚糖/聚磷酸钙体外复合培养的实验研究 被引量：6
9
作者 付维力 王践云 +4 位作者 李箭 万昌秀 叶京兵 罗大辉 李棋 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期53-58,共6页
目的:观察半月板纤维软骨细胞在不同配比壳聚糖/聚磷酸钙(chitosan/calciumpolyphosphate,CS/CPP)支架材料上的生长状况,优选最佳配比CS/CPP生物材料作为组织工程半月板支架材料。方法:采用机械分离与酶连续消化相结合的方法体外分离兔... 目的:观察半月板纤维软骨细胞在不同配比壳聚糖/聚磷酸钙(chitosan/calciumpolyphosphate,CS/CPP)支架材料上的生长状况,优选最佳配比CS/CPP生物材料作为组织工程半月板支架材料。方法:采用机械分离与酶连续消化相结合的方法体外分离兔半月板纤维软骨细胞,单层培养传代至第3代,并对其进行表型鉴定。采用共混-化学交联固化-冷冻干燥法将CS、醛基化海藻酸钠(aldehyde alginate,ADA)、CPP有机地结合起来,制备4种不同配比的新型组织工程半月板复合支架材料。将体外分离培养的第3代半月板细胞,通过二次沉淀接种法将其种植于不同配比的CS/CPP支架上,体外培养7天,采用相差倒置显微镜、SEM、HE染色观察细胞在支架上的形态、黏附、生长情况。结果:体外分离培养的第3代半月板细胞基本维持纤维软骨细胞的表型。相差倒置显微镜下可见,细胞在支架上黏附良好;扫描电镜下可见,细胞在支架上均匀分布,细胞多数呈多角形,并有基质分泌;HE染色结果显示,有细胞长入到三维支架材料内部。其中,半月板细胞在3:7的CS/CPP支架材料上单位面积内数目最多,生长最旺盛,细胞外基质分泌最多。结论:三维多孔的CS/CPP复合材料能促进半月板纤维软骨细胞的黏附、生长和增殖,其中3:7的CS/CPP支架材料细胞相容性和生物活性最好,最适于半月板纤维软骨细胞粘附和生长,并且能促进半月板细胞增殖和维持其表型,有望成为组织工程半月板良好的支架载体。 展开更多
关键词 半月板纤维软骨细胞 壳聚糖/聚磷酸钙 复合支架材料 组织工程半月板
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体外冲击波对兔膝骨关节炎软骨白细胞介素-1β及肿瘤坏死因子-α表达的影响 被引量：18
10
作者 侯晓东 刘洪柏 刘克敏 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2014年第2期121-124,共4页
目的观察体外冲击波(ESW)对兔膝骨性关节炎软骨白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法将30只新西兰大白兔随机分为对照组、模型组和治疗组,每组各10只。模型组和治疗组采用改良伸直位固定6周,制备兔膝骨关... 目的观察体外冲击波(ESW)对兔膝骨性关节炎软骨白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法将30只新西兰大白兔随机分为对照组、模型组和治疗组,每组各10只。模型组和治疗组采用改良伸直位固定6周,制备兔膝骨关节炎模型。治疗组造模后立即给予ESW治疗1次,能流密度0.1 mJ/mm2,冲击次数1000次。各组分别于治疗后4周处死,观察大体标本形态学变化,采用免疫组织化学法检测各组关节软骨中IL-1β和TNF-α的水平。结果治疗组IL-1β和TNF-α的表达较模型组明显下调(P<0.01)。结论 ESW能下调兔膝骨关节炎软骨细胞IL-1β、TNF-α的表达。 展开更多
关键词 骨关节炎 体外冲击波 关节软骨 白细胞介素-1Β 肿瘤坏死因子-Α 兔 INTERLEUKIN-1Β TUMOUR NECROSIS factor-α
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耳屏软骨-软骨膜复合体厚度测量及其在鼓室成形术中的应用 被引量：18
11
作者 杜娟 许为青 赵海专 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期257-260,共4页
目的测量耳屏软骨-软骨膜复合体厚度，探讨其对中耳炎手术治疗效果及重建听力的影响。方法49例（50耳）慢性中耳炎患者根据病情行伴或不伴乳突根治的鼓室成形术，均以耳屏软骨-软骨膜复合体修补鼓膜，术中测量耳屏软骨-软骨膜复合体厚... 目的测量耳屏软骨-软骨膜复合体厚度，探讨其对中耳炎手术治疗效果及重建听力的影响。方法49例（50耳）慢性中耳炎患者根据病情行伴或不伴乳突根治的鼓室成形术，均以耳屏软骨-软骨膜复合体修补鼓膜，术中测量耳屏软骨-软骨膜复合体厚度，术后每周随访一次至干耳，术后半年复查纯音听阈，分析耳屏软骨-软骨膜复合体厚度、干耳与否、干耳时间、鼓膜生长情况、术前和术后半年0．5、1．0、2．0、3．0kHz频率的纯音听阈。结果50耳耳屏软骨-软骨膜复合体的平均厚度为0．87±0．08mm（0．72～1．07mm），干耳时间3～12w，中位数3w；42耳术后随访半年，鼓膜形态、色泽良好；其中31耳患耳气骨导差缩小，听力提高，另11耳听力结果未纳入分析。结论耳屏软骨-软骨膜复合体的厚度较恒定，作为修复中耳材料具有干耳时间较短、利于听力改善、并发症较少等特点。 展开更多
关键词 耳屏软骨-软骨膜复合体 鼓室成形术 纯音听阈
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LIPUS激活的压电pPLLA/SrSiO_(3)复合支架通过P2RX1介导的Ca^(2+)信号通路促进骨软骨再生 被引量：1
12
作者 刘宬孝 俞彬 +11 位作者 苏乐峰 王瑞清 金钰 张赵文斌 郭伟明 李若梅 曾真 梅鹏 常江 夏伦果 杨晨 房兵 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期20-20,共1页
目的治疗由于急性创伤或慢性病引起的严重关节损伤,实现软骨和软骨下骨的综合修复。方法采用静电纺丝技术制备压电pPLLA/SrSiO_(3)复合支架;使用XRD、SEM、EDS研究了支架理化性能;检测了支架在低强度脉冲超声(LIPUS)刺激下的压电信号输... 目的治疗由于急性创伤或慢性病引起的严重关节损伤,实现软骨和软骨下骨的综合修复。方法采用静电纺丝技术制备压电pPLLA/SrSiO_(3)复合支架;使用XRD、SEM、EDS研究了支架理化性能;检测了支架在低强度脉冲超声(LIPUS)刺激下的压电信号输出、体外实验测定支架在LIPUS刺激下促进大鼠软骨细胞(rCCs)和骨髓间充质干细胞(rBMSCs)的增殖、迁移、分化情况,并对可能的机制进行了探索。体内实验研究了支架与LIPUS结合对大鼠软骨和软骨下骨再生的刺激作用。结果压电pPLLA/SrSiO_(3)复合支架与LIPUS结合显著刺激rCCs的增殖、迁移、基质分泌和rBMSCs的增殖、迁移、成骨分化;且发现LIPUS刺激下产生的压电信号与支架释放Sr^(2+)和SiO_(3)^(2-)离子的化学信号有协同作用。这种协同作用可能与激活P2RX1/CaMKII钙信号通路有关;在体内实验中支架与LIPUS结合显著促进了大鼠骨软骨缺损的再生。结论成功制备了一种可降解的用于骨软骨再生的压电pPLLA/SrSiO_(3)复合支架,在LIPUS刺激下能够产生可控的压电效应,并持续释放Sr^(2+)和SiO_(3)^(2-)的生物活性离子。这种电信号和化学信号的结合促进了软骨和软骨下骨的修复,为临床治疗多种骨软骨损伤提供了一种新颖的方法。 展开更多
关键词 软骨下骨 急性创伤 复合支架 骨髓间充质干细胞 骨软骨再生 化学信号 分化情况 关节损伤
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耳屏软骨-软骨膜复合体在上鼓室切开术中的应用 被引量：4
13
作者 曾宪海 李娟娟 +3 位作者 赵海亮 周才杰 高晗 邱书奇 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期412-413,共2页
目的观察应用耳屏软骨-软骨膜复合体行上鼓室外侧壁重建和鼓室成形术治疗上鼓室胆脂瘤的临床疗效。方法对43例(43耳)上鼓室胆脂瘤患者行上鼓室切开,彻底清除病变,43例均用耳屏软骨-软骨膜复合体重建上鼓室外侧壁加鼓室成形术,其中13例... 目的观察应用耳屏软骨-软骨膜复合体行上鼓室外侧壁重建和鼓室成形术治疗上鼓室胆脂瘤的临床疗效。方法对43例(43耳)上鼓室胆脂瘤患者行上鼓室切开,彻底清除病变,43例均用耳屏软骨-软骨膜复合体重建上鼓室外侧壁加鼓室成形术,其中13例听骨链结构完整,30例取出病变的锤骨头和砧骨,用人工听骨(PORP)重建听骨链。观察上鼓室外侧壁和鼓膜愈合及听力改善情况。结果术后随访1～2.5年,43例均未发现囊袋状内陷或胆脂瘤复发,1例术后出现鼓膜穿孔,其余病例鼓膜愈合良好;术后随访听力资料完整的32例中,0.5、1、2、4kHz气骨导差由术前平均27.8dB缩小到到16.4dB(P<0.01);1例术后出现听力下降伴耳鸣,其余患者听力稳定,无眩晕等并发症。结论耳屏软骨-软骨膜复合体应用于上鼓室外侧壁重建和鼓室成形术是较为理想的修复材料,有利于较好地恢复外耳道及鼓膜结构和功能。 展开更多
关键词 上鼓室 胆脂瘤 鼓室成形术 软骨-软骨膜复合体
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间歇性机械拉伸对体外培养兔关节软骨细胞微管蛋白-β取向的影响 被引量：2
14
作者 李晓娜 陈静 +2 位作者 董江峰 陈维毅 吴文周 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2007年第4期373-377,共5页
目的探讨间歇性机械拉伸对兔关节软骨细胞生长和细胞形态及骨架的影响,为软骨细胞内力学信号传导研究的提供参考。方法采用FX-4000TM柔性基底拉伸系统对体外单层原代培养的兔软骨细胞实施正弦波、0.5Hz、0～5%间歇性周期应变加载,每日拉... 目的探讨间歇性机械拉伸对兔关节软骨细胞生长和细胞形态及骨架的影响,为软骨细胞内力学信号传导研究的提供参考。方法采用FX-4000TM柔性基底拉伸系统对体外单层原代培养的兔软骨细胞实施正弦波、0.5Hz、0～5%间歇性周期应变加载,每日拉伸3h,共加载3天。对照组静态培养。3天后检测细胞活力、基质合成情况以及微管蛋白-β细胞免疫荧光染色,并对细胞周期进行检测。结果加载组软骨细胞生长良好,氨基多聚糖和蛋白多糖的合成与对照组无明显差异;但细胞增殖指数显著增高（P〈0.05）;微管蛋白-β沿细胞长轴发生重排,细胞形态和取向趋于一致。结论间歇性机械拉伸对细胞生长起到积极的作用,并且通过微管蛋白-β的重排影响细胞形态和取向。 展开更多
关键词 细胞微管 关节软骨 机械拉伸 蛋白-β 体外培养 间歇性 兔 细胞形态
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组织工程血管脱细胞支架主要组织相容性复合体Ⅰ抗原性的免疫组化观察 被引量：6
15
作者 刘太华 张炎 +3 位作者 姜宗来 李玉泉 刘波 张秀花 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期72-74,F004,共4页
目的 :探讨组织工程血管全生物支架的免疫原性的检测方法。 方法 :取猪颈总动脉 ,剥离外膜 ,剪成 2 cm长的血管段 ,随机分为 3组 :对照组、脱细胞组和脱细胞加碱处理组 ,每组 5段。以免疫组化方法检测血管脱细胞处理前后主要组织相容性... 目的 :探讨组织工程血管全生物支架的免疫原性的检测方法。 方法 :取猪颈总动脉 ,剥离外膜 ,剪成 2 cm长的血管段 ,随机分为 3组 :对照组、脱细胞组和脱细胞加碱处理组 ,每组 5段。以免疫组化方法检测血管脱细胞处理前后主要组织相容性复合体 (MHC )的变化情况 ,并将检测结果作图像分析。 结果 :对照组血管壁 MHC 高表达 ,脱细胞处理后 MHC 明显减少。图像分析得出阳性颗粒面积与视场面积比 :对照组为 (2 4 .0 9± 6 .0 9) % ,脱细胞组为 (6 .71± 2 .1 8) % ,脱细胞加碱处理组为 (1 .6 2± 0 .76 ) % ,组间比较差别均有显著意义 (P<0 .0 1 )。 结论 :MHC 展开更多
关键词 组织工程 血管脱细胞支架 免疫组织化学 免疫原性 主要组织相容性复合体I 免疫排斥反应
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TGF-β1诱导分化的兔BMSCs复合左旋聚乳酸＼β-磷酸三钙多孔支架材料体外研究实验 被引量：2
16
作者 陈康 王大平 +6 位作者 熊建义 朱伟民 刘建全 雷鸣 许蕴 张晓丽 刘弼 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第5期543-547,共5页
目的研究体外培养rBMSCs经TGF-β1诱导分化的软骨细胞复合左旋聚乳酸\β-磷酸三钙(PLLA\β-TCP)多孔支架材料体外构建仿生人工软骨。方法低温挤出成形法制备成PLLA\β-TCP复合多孔支架材料,体外分离、培养rBMSCs至第3代,利用含有TGF-β... 目的研究体外培养rBMSCs经TGF-β1诱导分化的软骨细胞复合左旋聚乳酸\β-磷酸三钙(PLLA\β-TCP)多孔支架材料体外构建仿生人工软骨。方法低温挤出成形法制备成PLLA\β-TCP复合多孔支架材料,体外分离、培养rBMSCs至第3代,利用含有TGF-β1特殊诱导系统诱导其向软骨细胞分化,诱导14d后用甲苯胺蓝染色及II型胶原免疫组化进行鉴定后与PLLA\β-TCP多孔支架材料体外复合培养,并取第7、14、21d细胞复合材料进行电镜扫描观察细胞贴附、生长、增殖状况,同时消化收集贴附支架第7、14、21d的细胞,行RT-PCR检测分化软骨细胞相关基因aggrecan、Col2A1在mRNA水平的表达,Western-bolt检测II型胶原蛋白的分泌情况。结果 rBMSCs经诱导后向软骨细胞分化,甲苯胺蓝染色见分化软骨细胞分泌糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG),Ⅱ型胶原免疫组织化学染色呈阳性;电镜扫描见分化细胞在支架材料分布均匀,黏附良好;RT-PCR及Western-bolt检测示7、14、21daggrecan、Col2A1在mRNA水平、II型胶原蛋白均有不同程度表达。结论利用含有TGF-β1特殊诱导系统诱导rBMSCs分化的软骨细胞复合到PLLA\β-TCP多孔支架材料上,细胞生长良好,并能正常分泌软骨细胞特异细胞外基质,体外成功构建了组织工程软骨。 展开更多
关键词 转化生长因子-β1 诱导 复合多孔支架材料 组织工程软骨
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软骨细胞与瑞福纳米人工骨复合物的体外构建 被引量：1
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作者 肖涛 彭程 +2 位作者 罗远明 林绵辉 刘夏君 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期641-645,共5页
目的:评估瑞福纳米人工骨(胶原基纳米骨,nano-hydroxyapatie/collagen,nHAC)作为软骨组织工程细胞支架材料的可行性。方法:选择骨性关节炎(OA)患者行髋关节置换手术后外观大致正常的关节软骨,消化、分离、体外培养扩增后种植到nHAC中,... 目的:评估瑞福纳米人工骨(胶原基纳米骨,nano-hydroxyapatie/collagen,nHAC)作为软骨组织工程细胞支架材料的可行性。方法:选择骨性关节炎(OA)患者行髋关节置换手术后外观大致正常的关节软骨,消化、分离、体外培养扩增后种植到nHAC中,复合物体外培养后进行Ⅱ型胶原免疫组织化学检测和扫描电镜观察。结果:软骨细胞可以长入nHAC支架材料中。同期软骨细胞保持了正常的外形且可分泌Ⅱ型胶原。结论:nHAC可以作为软骨细胞的载体。 展开更多
关键词 软骨细胞 组织工程 胶原基纳米骨 支架材料 体外
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大鼠第一腮弓细胞构建组织工程牙本质-牙髓复合体样结构 被引量：1
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作者 邓蔓菁 陈小红 +2 位作者 刘鲁川 安建平 匡桂英 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期57-59,共3页
目的观察胚胎12.5d(E12.5d)大鼠第一腮弓上皮及外胚间充质细胞离散后肾被膜下移植的成牙能力。方法切取E12.5d大鼠第一腮弓(下颌突),酶消化离心后与明胶海绵支架复合植入大鼠肾被膜下,4周后收获移植物,对移植物进行组织学观察和免疫组... 目的观察胚胎12.5d(E12.5d)大鼠第一腮弓上皮及外胚间充质细胞离散后肾被膜下移植的成牙能力。方法切取E12.5d大鼠第一腮弓(下颌突),酶消化离心后与明胶海绵支架复合植入大鼠肾被膜下,4周后收获移植物,对移植物进行组织学观察和免疫组化抗牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)检测。结果种植4周,植入细胞在肾被膜下形成牙本质-牙髓复合体样结构。DSP在新生的牙本质组织中呈阳性表达。Masson三色法显示绿色矿化基质形成。结论E12.5d大鼠第一腮弓细胞部分保留了牙齿自然发育的遗传信号,在肾被膜下可以构建形成牙本质-牙髓复合体样结构。 展开更多
关键词 第一腮弓细胞 牙本质-牙髓复合体 牙齿发育
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DHA联合5-FU对人胃癌细胞增殖的抑制及线粒体呼吸链膜蛋白复合体的表达变化 被引量：1
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作者 王曙逢 赵志浩 +2 位作者 刘竹君 高琨 李幼芬 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期491-495,共5页
目的：探讨二十二碳六烯酸（DHA）联合5-氟尿嘧啶（5-FU）对体外培养人胃腺癌细胞株 AGS 增殖的抑制作用并初步分析其机制。方法以不同梯度浓度的 DHA、5-FU 作用于体外培养的 AGS 细胞,采用中效原理和 Chou-Ta-lalay 联合指数原理计算... 目的：探讨二十二碳六烯酸（DHA）联合5-氟尿嘧啶（5-FU）对体外培养人胃腺癌细胞株 AGS 增殖的抑制作用并初步分析其机制。方法以不同梯度浓度的 DHA、5-FU 作用于体外培养的 AGS 细胞,采用中效原理和 Chou-Ta-lalay 联合指数原理计算药物单用和合用时的中效浓度（IC50）和合用指数（CI）,确定药物合适作用浓度。实验分为对照组、DHA 组、5-FU 组和 DHA 联合5-FU 组,四甲基偶氮唑蓝（MTT）观察细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western blot 分析细胞线粒体呼吸链膜蛋白复合体的表达变化。结果DHA、5-FU 单用可时间-剂量依赖地抑制 AGS 细胞增殖（P 〈0.05）。DHA、5-FU 单用24、48 h 时 IC50分别为51.60、34.82μg/mL（DHA）和45.90、16.86μg/mL（5-FU）。DHA 与5-FU 合用时,DHA 可显著增强5-FU 对 AGS 细胞生长增殖的抑制效应,并将5-FU的 IC50减少3.56~2.15倍,CI〈1二者呈现协同作用。与对照组、DHA 组、5-FU 组比较,联合干预组 AGS 细胞的DNA 合成前期（G0/Gl 期）细胞分布比例明显增加,DNA 合成期（S 期）细胞分布比例明显减少（P 〈0.05）。与对照组、DHA 组、5-FU 组比较,联合干预组 AGS 线粒体呼吸链膜蛋白复合体表达显著下降（P 〈0.05）。结论DHA 和5-FU 合用可协同抑制人胃腺癌细胞株 AGS 的生长增殖,可能通过抑制线粒体呼吸链膜蛋白复合体表达而干扰细胞能量代谢及阻滞细胞周期于 G0/G1期。 展开更多
关键词 二十二碳六烯酸 胃癌 5-氟尿嘧啶 线粒体呼吸链膜蛋白复合体 细胞周期
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不同方法获取Descemet膜-角膜内皮细胞复合体的效果比较 被引量：1
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作者 叶向彧 盛耀华 +1 位作者 周秀莉 徐国庆 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第9期645-648,共4页
目的评价不同方法获取Descemet膜-角膜内皮细胞复合体(DM+CECs)的效果。方法将20只兔(40只眼)根据手术方法的不同随机分成4组:镊子剥离组、水分离组、大气泡法组和机械分离组,每组10只眼。通过活体染色和组织切片分析评价DM+CECs。结果... 目的评价不同方法获取Descemet膜-角膜内皮细胞复合体(DM+CECs)的效果。方法将20只兔(40只眼)根据手术方法的不同随机分成4组:镊子剥离组、水分离组、大气泡法组和机械分离组,每组10只眼。通过活体染色和组织切片分析评价DM+CECs。结果成功获取DM+CECs镊子剥离组2眼,水分离组8眼,大气泡法组5眼,机械分离法组3眼,4个组之间的成功率差异有统计学意义(P<0.05)。水分离法组(98.03±2.18)%和大气泡法组(97.14±3.04)%内皮细胞存活率(ESR)明显高于镊子剥离法组(80.16±5.21)%和机械分离法组(71.56±9.57)%(F=436.04,P<0.05)。苏木精-伊红染色显示水分离法和大气泡法对内皮细胞损伤小。结论水分离法或大气泡法是安全、有效地获取DM+CECs的技术。 展开更多
关键词 角膜 内皮细胞 角膜移植 Descemet膜-角膜内皮细胞复合体
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