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胰岛素样生长因子Ⅰ与透明质酸对人胚关节软骨细胞表型的影响 被引量:14
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作者 黄建荣 刘尚礼 +4 位作者 宋卫东 李卫平 郑召民 沈慧勇 黄东生 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期419-422,426,共5页
【目的】研究胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )和透明质酸 (HA)联合培养对人关节软骨细胞生物学行为的影响 ,判断其稳定软骨细胞表型的效果。【方法】分离培养人关节软骨细胞 ,从第 4代开始 ,用hIGF Ⅰ和HA联合培养 ,通过电镜观察、甲苯胺... 【目的】研究胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )和透明质酸 (HA)联合培养对人关节软骨细胞生物学行为的影响 ,判断其稳定软骨细胞表型的效果。【方法】分离培养人关节软骨细胞 ,从第 4代开始 ,用hIGF Ⅰ和HA联合培养 ,通过电镜观察、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原和aggrecan免疫组化及RT PCR判断联合培养第 8代软骨细胞表型的变化。自然传代的第 6代细胞为对照组。【结果】IGF Ⅰ和HA联合培养的第 8代细胞胞浆内含有丰富的粗面内质网和分泌小泡 ;RT PCR显示Ⅱ型胶原mRNA表达阳性而Ⅰ型胶原mRNA表达阴性 ;甲苯胺蓝染色显示细胞浆内有大量的紫色异染颗粒 ;Ⅱ型胶原和aggrecan免疫组化见 80 %~ 92 %的细胞染色呈阳性或强阳性 ,平均灰度分别为 85 92和 116 2 3,均显著低于对照组 ,说明处理组染色较对照组增强。【结论】IGF Ⅰ和HA联合培养的第 8代细胞仍能保持透明软骨细胞的表型 ,为体外获得高数量级别的有正常功能的人关节软骨细胞提供一种新方法。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子I 透明质酸 人胚关节 软骨细胞表型 关节损伤
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具有软骨细胞表型特征的永生化兔髁突软骨细胞系的建立
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作者 段小红 吴军正 +1 位作者 杨彤元 王会信 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期26-28,共3页
目的 :建立具有稳定软骨细胞表型特征的永生化兔髁突细胞系。方法 :采用逆转录病毒载体介导的方法将SV40大T抗原基因导入原代培养的兔髁突软骨细胞 ,利用G418筛选阳性克隆并对其进行扩大培养 ,通过RNA点杂交检测转基因细胞I、II型胶原... 目的 :建立具有稳定软骨细胞表型特征的永生化兔髁突细胞系。方法 :采用逆转录病毒载体介导的方法将SV40大T抗原基因导入原代培养的兔髁突软骨细胞 ,利用G418筛选阳性克隆并对其进行扩大培养 ,通过RNA点杂交检测转基因细胞I、II型胶原基因的转录。结果 :有一株克隆在体外 1年半稳定传代10 0次以上 ,命名为永生化髁突软骨细胞系 (immortalizedmandibularcondylarchondrocyte ,IMCC) ,点杂交显示IMCC有I、II型前胶原基因的转录。结论 :获得具有稳定软骨细胞表型特征的永生化兔髁突细胞系。 展开更多
关键词 软骨细胞表型特征 永生化 SV40病毒 下颌骨髁状突 软骨细胞 建立
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山羊骨髓间充质干细胞分离培养及向软骨细胞诱导分化 被引量:2
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作者 张晓强 李旭 +3 位作者 吴涛 黎健伟 杜浩 裴国献 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期419-422,427,共5页
目的探讨体外分离、培养山羊骨髓间充质干细胞(BMSCs),并将其诱导分化为软骨细胞表型,明确其向软骨细胞分化的能力。方法抽取10月龄健康中国青山羊骨髓,贴壁法培养BMSCs,体外培养至第4代时进行流式细胞术鉴定,并加入成软骨诱导培养基,... 目的探讨体外分离、培养山羊骨髓间充质干细胞(BMSCs),并将其诱导分化为软骨细胞表型,明确其向软骨细胞分化的能力。方法抽取10月龄健康中国青山羊骨髓,贴壁法培养BMSCs,体外培养至第4代时进行流式细胞术鉴定,并加入成软骨诱导培养基,其成分包括10%FBS高糖DMEM培养基、6.25μg/ml胰岛素、6.25μg/ml转铁蛋白、50μmol/ml抗坏血酸、100nmol/L地塞米松及10ng/ml TGF-β1。分别于0、1、2、4周行细胞化学染色、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹试验(Western blot)检测II型胶原和Aggrecan的表达。结果山羊BMSCs生长良好,传至第4代时细胞纯度较高。加入诱导培养基后,山羊BMSCs在1、2、4周均可看到软骨细胞表型的表达,并且随着时间的延长,其II型胶原及Aggrecan基因和蛋白的表达量逐渐增加,2周时即可达到较好的诱导效果。结论本实验采取一种简易的方法分离、培养并向软骨细胞方向诱导分化山羊BMSCs,证实其具有分化为软骨细胞的潜能,为山羊用于骨软骨组织工程的体内研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 山羊骨髓间充质干细胞 软骨细胞表型 诱导分化 组织工程
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髓核细胞鉴定方法的相关研究进展 被引量:4
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作者 董俊文 李浩鹏 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期850-853,共4页
腰椎间盘突出症是引起腰痛的主要原因,目前治疗方法包括药物、手术等,这些方法不能阻止或延缓腰椎间盘突出症的病理进程.如腰椎融合术反而可能促进相邻椎间盘的退变病理进程。干细胞移植可以分化为髓核样细胞或/和可以促进退变椎间... 腰椎间盘突出症是引起腰痛的主要原因,目前治疗方法包括药物、手术等,这些方法不能阻止或延缓腰椎间盘突出症的病理进程.如腰椎融合术反而可能促进相邻椎间盘的退变病理进程。干细胞移植可以分化为髓核样细胞或/和可以促进退变椎间盘内髓核细胞的增殖,是目前研究的热点,但是,髓核细胞和关节软骨细胞表型非常相似, 展开更多
关键词 髓核细胞 鉴定方法 腰椎间盘突出症 软骨细胞表型 病理进程 腰椎融合术 细胞移植 治疗方法
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