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C4ST-1在大肠杆菌中的可溶性表达
被引量：
1
1
作者
李青
周正雄
+2 位作者
堵国成
李江华
康振
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期68-75,共8页
软骨素-4-O-硫酸转移酶-1(Chondroitin-4-O-sulfotransferase-1,C4ST-1,EC 2.8.2.5)催化软骨素N-乙酰半乳糖胺(N-Acetylgalactosamine,GalNAc)4号位羟基硫酸化生成硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)。C4ST-1含3对二硫键,在Escheri...
软骨素-4-O-硫酸转移酶-1(Chondroitin-4-O-sulfotransferase-1,C4ST-1,EC 2.8.2.5)催化软骨素N-乙酰半乳糖胺(N-Acetylgalactosamine,GalNAc)4号位羟基硫酸化生成硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)。C4ST-1含3对二硫键,在Escherichia coli细胞质内二硫键难以正确形成,故在E.coli中表达时主要以包涵体形式存在。为提高胞内可溶性蛋白质的表达水平,共表达了催化二硫键从头形成的巯基氧化酶(Erv1p)或/和促进二硫键正确折叠的二硫键异构酶(DsbC)。结果表明共表达DsbC可使C4ST-1融合蛋白的胞内可溶性表达水平显著提高,但C4ST-1和Erv1p共表达对胞内可溶性蛋白质的表达影响相对较小。C4ST-1和Erv1p或C4ST-1和DsbC共表达菌株的酶活分别为原始菌株的1.30和2.33倍,活力达到(12.32±0.76)U/L和(21.99±0.42)U/L。挑取同时共表达C4ST-1、Erv1p和DsbC的菌株进行摇瓶水平和3 L发酵罐放大培养,酶活分别达到(29.12±0.66)U/L和49.97 U/L。本研究为C4ST-1的大规模应用奠定了一定的基础。
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关键词
软骨素-4-o-硫酸转移酶-1
硫氧还蛋白还原
酶
巯基氧化
酶
二硫键异构
酶
可溶性表达
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职称材料
小鼠供肾选择性缺失Ndst1对肾移植术后急性排斥反应的影响及其机制研究
2
作者
李雪梅
谷保红
+5 位作者
胡继科
马延龄
王博方
冯泽东
张凡
陈昊
《器官移植》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期424-429,共6页
目的探讨小鼠供肾选择性缺失N-脱乙酰基酶-N-磺基转移酶(Ndst)1对肾移植术后受体小鼠急性排斥反应的影响及其机制。方法建立小鼠肾移植模型。根据品系和处理方式不同,将小鼠分为3组:野生型(WT)组(n=10)、Ndst1-/-组(n=9)、黏液瘤病毒T7...
目的探讨小鼠供肾选择性缺失N-脱乙酰基酶-N-磺基转移酶(Ndst)1对肾移植术后受体小鼠急性排斥反应的影响及其机制。方法建立小鼠肾移植模型。根据品系和处理方式不同,将小鼠分为3组:野生型(WT)组(n=10)、Ndst1-/-组(n=9)、黏液瘤病毒T7蛋白(M-T7)治疗组(n=7)。术后第10日对各组小鼠实施安乐死,对各组小鼠移植肾分别进行病理学检查和糖胺聚糖(GAGs)中的双糖[硫酸乙酰肝素(HS)和硫酸软骨素(CS)]含量分析。分析病理学评分与双糖含量变化的相关性。结果与WT组比较,Ndst1-/-组和M-T7治疗组小鼠移植肾组织的早期排斥反应的总体病理学评分显著降低(均为P<0.05)。与WT组比较,Ndst1-/-组小鼠移植肾组织中HS的6-O硫酸化比例、D0S6含量显著增加(均为P<0.05),CS的D0A4和D2A4含量显著下降(均为P<0.05)。与WT组比较,M-T7治疗组小鼠移植肾组织中HS的6-O硫酸化比例、CS的6-O硫酸化和2-O硫酸化比例、HS的D0S6和D2S6含量均显著增加(均为P<0.05),HS的D2A0含量、CS的D0A4和D2A4含量明显降低(均为P<0.05)。小鼠移植肾组织中双糖含量变化与急性排斥反应相关病理学评分均具有相关性(均为P<0.05)。结论供肾选择性缺失Ndst1可减轻肾移植术后的急性排斥反应,其机制可能与移植肾组织中双糖HS的6-O硫酸化比例增加有关。
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关键词
N
-
脱乙酰基
酶
-
N
-
磺基
转移
酶
-
1
肾移植
急性排斥反应
内皮细胞
糖胺聚糖
硫酸
乙酰肝素
硫酸
软骨素
透明质酸
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职称材料
题名
C4ST-1在大肠杆菌中的可溶性表达
被引量：
1
1
作者
李青
周正雄
堵国成
李江华
康振
机构
江南大学生物工程学院
江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期68-75,共8页
基金
国家自然基金面上项目(31670092)
江南大学自主科研计划重点项目(JUSRP51707A)
国家轻工技术与工程一流学科自主课题项目(LITE2018-16)。
文摘
软骨素-4-O-硫酸转移酶-1(Chondroitin-4-O-sulfotransferase-1,C4ST-1,EC 2.8.2.5)催化软骨素N-乙酰半乳糖胺(N-Acetylgalactosamine,GalNAc)4号位羟基硫酸化生成硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)。C4ST-1含3对二硫键,在Escherichia coli细胞质内二硫键难以正确形成,故在E.coli中表达时主要以包涵体形式存在。为提高胞内可溶性蛋白质的表达水平,共表达了催化二硫键从头形成的巯基氧化酶(Erv1p)或/和促进二硫键正确折叠的二硫键异构酶(DsbC)。结果表明共表达DsbC可使C4ST-1融合蛋白的胞内可溶性表达水平显著提高,但C4ST-1和Erv1p共表达对胞内可溶性蛋白质的表达影响相对较小。C4ST-1和Erv1p或C4ST-1和DsbC共表达菌株的酶活分别为原始菌株的1.30和2.33倍,活力达到(12.32±0.76)U/L和(21.99±0.42)U/L。挑取同时共表达C4ST-1、Erv1p和DsbC的菌株进行摇瓶水平和3 L发酵罐放大培养,酶活分别达到(29.12±0.66)U/L和49.97 U/L。本研究为C4ST-1的大规模应用奠定了一定的基础。
关键词
软骨素-4-o-硫酸转移酶-1
硫氧还蛋白还原
酶
巯基氧化
酶
二硫键异构
酶
可溶性表达
Keywords
chondroitin
-
4
-o-
sulfotransferase
-
1
thioredoxin reductase
sulfhydryl oxidase
disulfide isomerase
soluble expression
分类号
O629.12 [理学—有机化学]
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职称材料
题名
小鼠供肾选择性缺失Ndst1对肾移植术后急性排斥反应的影响及其机制研究
2
作者
李雪梅
谷保红
胡继科
马延龄
王博方
冯泽东
张凡
陈昊
机构
兰州大学第二临床医学院
兰州大学第二医院肿瘤外科
兰州大学第二医院消化系统肿瘤重点实验室
出处
《器官移植》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期424-429,共6页
基金
国家自然科学基金(81470791
81670594
+1 种基金
81376597)
甘肃省自然科学基金(1606RJIA328)
文摘
目的探讨小鼠供肾选择性缺失N-脱乙酰基酶-N-磺基转移酶(Ndst)1对肾移植术后受体小鼠急性排斥反应的影响及其机制。方法建立小鼠肾移植模型。根据品系和处理方式不同,将小鼠分为3组:野生型(WT)组(n=10)、Ndst1-/-组(n=9)、黏液瘤病毒T7蛋白(M-T7)治疗组(n=7)。术后第10日对各组小鼠实施安乐死,对各组小鼠移植肾分别进行病理学检查和糖胺聚糖(GAGs)中的双糖[硫酸乙酰肝素(HS)和硫酸软骨素(CS)]含量分析。分析病理学评分与双糖含量变化的相关性。结果与WT组比较,Ndst1-/-组和M-T7治疗组小鼠移植肾组织的早期排斥反应的总体病理学评分显著降低(均为P<0.05)。与WT组比较,Ndst1-/-组小鼠移植肾组织中HS的6-O硫酸化比例、D0S6含量显著增加(均为P<0.05),CS的D0A4和D2A4含量显著下降(均为P<0.05)。与WT组比较,M-T7治疗组小鼠移植肾组织中HS的6-O硫酸化比例、CS的6-O硫酸化和2-O硫酸化比例、HS的D0S6和D2S6含量均显著增加(均为P<0.05),HS的D2A0含量、CS的D0A4和D2A4含量明显降低(均为P<0.05)。小鼠移植肾组织中双糖含量变化与急性排斥反应相关病理学评分均具有相关性(均为P<0.05)。结论供肾选择性缺失Ndst1可减轻肾移植术后的急性排斥反应,其机制可能与移植肾组织中双糖HS的6-O硫酸化比例增加有关。
关键词
N
-
脱乙酰基
酶
-
N
-
磺基
转移
酶
-
1
肾移植
急性排斥反应
内皮细胞
糖胺聚糖
硫酸
乙酰肝素
硫酸
软骨素
透明质酸
Keywords
N
-
deacetylase
-
N
-
sulfotransferase
1
Renal transplantation
Acute rejection
Endothelial cell
Glycosaminoglycans
Heparan sulfate
Chondroitin sulfate
Hyaluronic acid
分类号
R617 [医药卫生—外科学]
R392.4 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
C4ST-1在大肠杆菌中的可溶性表达
李青
周正雄
堵国成
李江华
康振
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
小鼠供肾选择性缺失Ndst1对肾移植术后急性排斥反应的影响及其机制研究
李雪梅
谷保红
胡继科
马延龄
王博方
冯泽东
张凡
陈昊
《器官移植》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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