软脂酸诱导的HepG2细胞糖脂代谢紊乱及机制研究 被引量：9

1

作者 龚受基 刘仲华 +2 位作者 黄建安 王丽丽 杨新河 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1383-1387,共5页

目的探讨软脂酸诱导HepG2细胞糖脂代谢紊乱特征及二甲双胍和辛伐他丁对糖脂代谢的影响。方法以软脂酸诱导HepG2细胞产生糖脂代谢紊乱,用二甲双胍和辛伐他丁进行治疗,检测各组糖原、总胆固醇、甘油三酯累积量,用荧光定量PCR检测糖脂代谢... 目的探讨软脂酸诱导HepG2细胞糖脂代谢紊乱特征及二甲双胍和辛伐他丁对糖脂代谢的影响。方法以软脂酸诱导HepG2细胞产生糖脂代谢紊乱,用二甲双胍和辛伐他丁进行治疗,检测各组糖原、总胆固醇、甘油三酯累积量,用荧光定量PCR检测糖脂代谢相关基因AMP活化蛋白激酶(AMPK)α-2、葡萄糖转运体(GLUT)2、肝脂肪酶(HL)、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP)1、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)2等的表达。结果软脂酸诱导HepG2细胞总胆固醇、甘油三酯升高(P<0.05),糖脂代谢相关基因表达异常。二甲双胍和辛伐他丁治疗后,细胞总胆固醇、甘油三酯累积明显下降,糖原累积上升;AMPKα-2、GLUT2、HL mRNA表达上升,G6pase、PEPCK、SREBP1、ACC2 mRNA表达下降。结论软脂酸诱导HepG2细胞出现糖脂代谢异常,经二甲双胍和辛伐他丁治疗后异常情况改善。 展开更多

关键词 软脂酸 HEPG2 糖脂代谢 糖原 荧光PCR AMPK

在线阅读 下载PDF 职称材料

乙醇和软脂酸诱导的脂肪肝离体细胞模型 被引量：14

2

作者 张红锋 杨慧萍 王耀发 《华东师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期88-95,共8页

该文以人正常肝细胞株L02为实验材料,采用乙醇和软脂酸等损伤条件建立脂肪肝的离体细胞模型,并以细胞内脂滴数量、甘油三酯含量和γ-谷氨酰转肽酶泄露量等指标,证明该离体细胞模型与实验动物模型的相似性,及其实际应用意义。实验结果表... 该文以人正常肝细胞株L02为实验材料,采用乙醇和软脂酸等损伤条件建立脂肪肝的离体细胞模型,并以细胞内脂滴数量、甘油三酯含量和γ-谷氨酰转肽酶泄露量等指标,证明该离体细胞模型与实验动物模型的相似性,及其实际应用意义。实验结果表明,分别用含有0.6%酒精、10微克/毫升软脂酸或5微克/毫升软脂酸和0.6%乙醇的1640培养基长期培养肝细胞(6天),可使肝细胞代谢紊乱,产生明显的甘油三酯累积(P<0.01),脂滴数量明显增多,和γ-谷氨酰转肽酶泄漏增加等现象。这些现象与人类及实验动物脂肪肝的表型特征很相符,且用公认去脂药物洛伐他汀,脂必妥处理,可使上述症状明显减轻。 展开更多

关键词 乙醇 软脂酸 离体细胞模型 脂肪肝 脂肪酸 表型特征 发病机理 去脂药物

在线阅读 下载PDF 职称材料

软脂酸增加血管内皮细胞Toll样受体4表达及活化TLR4炎症信号通路 被引量：3

3

作者 赵乃倩 王冬青 +3 位作者 荣青峰 韩乐 赵文慧 张策 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1775-1777,1800,共4页

目的研究饱和脂肪酸软脂酸对血管内皮细胞Toll样受体4(TLR4)表达及信号转导的影响。方法采用软脂酸处理猪髋动脉内皮细胞(PIECs),实时荧光定量PCR检测PIECs TLR4 mRNA表达,蛋白印迹法检测PIECs TLR4及IκBα蛋白表达,流式细胞仪检测PIEC... 目的研究饱和脂肪酸软脂酸对血管内皮细胞Toll样受体4(TLR4)表达及信号转导的影响。方法采用软脂酸处理猪髋动脉内皮细胞(PIECs),实时荧光定量PCR检测PIECs TLR4 mRNA表达,蛋白印迹法检测PIECs TLR4及IκBα蛋白表达,流式细胞仪检测PIECs细胞表面TLR4蛋白水平,酶联免疫吸附测定法检测细胞培养液TNF-α及IL-6水平。结果与对照组比较,软脂酸组PIECs TLR4 mRNA及蛋白表达显著升高(TLR4 mRNA:4.73±0.61 vs 1.25±0.90,P<0.05;TLR4蛋白:5.79±0.05 vs4.07±0.31,P<0.05),PIECs细胞表面TLR4蛋白水平显著增加(38.070±3.907 vs 29.390±1.072,P<0.05);软脂酸组PIECs IκBα蛋白表达显著降低(2.04±0.22 vs 3.98±0.18,P<0.05),细胞培养液TNF-α及IL-6水平显著升高(TNF-α:2.52±0.30 vs 1.38±0.26,P<0.05;IL-6:3.28±0.32 vs 1.44±0.28,P<0.05)。结论软脂酸在诱导血管内皮细胞TLR4表达的同时活化TLR4炎症信号通路。 展开更多

关键词 软脂酸 TOLL样受体4 血管内皮细胞 胰岛素抵抗

在线阅读 下载PDF 职称材料

内质网应激在软脂酸钠诱导的脂肪变性L02肝细胞凋亡中的作用 被引量：7

4

作者 曹洁 杨朝霞 +1 位作者 沈薇 姚隆 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期1935-1938,共4页

目的观察内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)蛋白在软脂酸钠诱导的脂肪变性L02肝细胞凋亡过程中的改变,探讨ERS与脂变肝细胞凋亡的关系。方法用软脂酸钠(饱和脂肪酸)诱导建立L02肝细胞脂肪变性模型。将细胞分为正常对照组和... 目的观察内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)蛋白在软脂酸钠诱导的脂肪变性L02肝细胞凋亡过程中的改变,探讨ERS与脂变肝细胞凋亡的关系。方法用软脂酸钠(饱和脂肪酸)诱导建立L02肝细胞脂肪变性模型。将细胞分为正常对照组和实验组(软脂酸钠72μmol/L)。MTT法筛选软脂酸钠最佳作用浓度;油红O染色和甘油三酯(TG)试剂盒检测细胞内脂变程度;流式细胞术Annexin V-PE/7-AAD双染检测细胞凋亡率;Western blot检测GRP78、CHOP、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达。结果软脂酸钠在体外能够诱导肝细胞发生脂肪变性以及脂变肝细胞凋亡,与对照组(1.38±0.42)比较,实验组48 h细胞凋亡率(5.95±0.37)显著增加(P<0.05)。Western blot检测示软脂酸钠刺激肝细胞12 h,GRP78表达(0.50±0.03)较0 h(0.37±0.02)明显增加,48 h(0.83±0.01)达高峰(P<0.05)。CHOP和p-JNK表达与GRP78几乎同步增加。结论软脂酸钠对L02肝细胞具有较强的脂毒性,可以诱导肝细胞发生ERS反应。ERS上调CHOP和P-JNK表达可能在软脂酸钠诱导脂肪变性肝细胞凋亡中具有重要作用。 展开更多

关键词 软脂酸钠 内质网应激 非酒精性脂肪性肝病 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

羊栖菜多糖对软脂酸诱导的HL-7702细胞凋亡的保护作用 被引量：3

5

作者 吴利敏 吴金明 +4 位作者 黄智铭 吴建胜 金思思 申苏建 刘扬 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第3期634-637,共4页

目的:探讨羊栖菜多糖(SFPS)对软脂酸诱导的肝细胞凋亡的保护作用及其可能机制。方法:SFPS不同浓度(25、50、100μg/mL)预处理24h后,0.5mmol/L软脂酸(PA)作用48h诱导正常人肝细胞株(HL-7702)凋亡。MTT比色法检测SFPS对细胞增殖的影响;Ann... 目的:探讨羊栖菜多糖(SFPS)对软脂酸诱导的肝细胞凋亡的保护作用及其可能机制。方法:SFPS不同浓度(25、50、100μg/mL)预处理24h后,0.5mmol/L软脂酸(PA)作用48h诱导正常人肝细胞株(HL-7702)凋亡。MTT比色法检测SFPS对细胞增殖的影响;Annexin V-FITC标记法检测细胞的凋亡;RT-PCR法检测凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达并计算其比值(Bcl-2/Bax)。结果:0.5mmol/L PA处理48h的HL-7702细胞存活率下降为正常对照组的64.9%,细胞凋亡率为35.1%,Bax表达上升,Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值明显下降(均P<0.05);与模型组相比,SFPS不同浓度(25、50、100 ug/ml)预处理后细胞存活率逐渐升高,细胞凋亡率显著降低,Bax表达逐渐下降,Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值逐渐上升(均P<0.05)。结论:SFPS对PA诱导的肝细胞凋亡有较好的保护作用,其作用机制可能与调节Bcl-2、Bax基因的表达有关。 展开更多

关键词 羊栖菜多糖 软脂酸 细胞凋亡 BCL-2/BAX

在线阅读 下载PDF 职称材料

HPLC-ELSD法同时测定九香虫中的亚油酸、油酸及软脂酸 被引量：5

6

作者 王新雨 郑晓媚 谭晓梅 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1522-1525,共4页

目的 建立一种同时定量测定九香虫中未甲酯化的亚油酸、油酸及软脂酸方法。方法 九香虫石油醚提取物以高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）分析,采用Prevail C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,乙腈-甲醇（95∶5）为流动相... 目的 建立一种同时定量测定九香虫中未甲酯化的亚油酸、油酸及软脂酸方法。方法 九香虫石油醚提取物以高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）分析,采用Prevail C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,乙腈-甲醇（95∶5）为流动相进行洗脱,洗脱时间为15 min。结果 亚油酸、油酸及软脂酸峰面积的自然对数与相应质量浓度的自然对数呈良好的线性关系。其中,亚油酸的线性方程为Y=1.211 7X-2.965 6,r=0.999 0,线性范围为0.135~0.450 mg/m L,平均加样回收率为98.1%,RSD为2.5%;油酸的线性方程为Y=1.149 2X-2.757 0,r=0.999 0,线性范围为0.268~0.893 mg/m L,平均加样回收率为99.6%,RSD为2.3%;软脂酸的线性方程为Y=1.104 7X-2.327 6,r=0.999 1,线性范围为0.150~0.500 mg/m L,平均加样回收率为100.1%,RSD为2.8%。结论该方法中的样品不需要甲酯化,而且测定快速、简便、准确,可作为九香虫饮片的质量控制方法。 展开更多

关键词 HPLC-ELSD 九香虫 亚油酸 油酸 软脂酸

在线阅读 下载PDF 职称材料

软脂酸对体外原代培养大鼠胰岛细胞凋亡作用的实验研究 被引量：3

7

作者 姜一真 薛耀明 +1 位作者 邓燕 朱姿英 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期449-451,共3页

目的观察软脂酸诱导体外原代培养胰岛细胞的凋亡,初步探讨软脂酸在2型糖尿病发病中的机制。方法应用分离的体外单层培养SD大鼠胰岛细胞,与不同浓度软脂酸(分别为0、0.125、0.250、0.500mmol/L)共同孵育48h,用放免法测定培养液中胰岛素含... 目的观察软脂酸诱导体外原代培养胰岛细胞的凋亡,初步探讨软脂酸在2型糖尿病发病中的机制。方法应用分离的体外单层培养SD大鼠胰岛细胞,与不同浓度软脂酸(分别为0、0.125、0.250、0.500mmol/L)共同孵育48h,用放免法测定培养液中胰岛素含量,PI/Hoechst33342双染法荧光显微镜观察胰岛细胞凋亡的形态变化。结果0.250、0.5mmol/L软脂酸可抑制高糖刺激下的胰岛素分泌,促进胰岛细胞的凋亡。结论软脂酸可诱导胰岛细胞凋亡,凋亡程度与游离软脂酸浓度有关。 展开更多

关键词 软脂酸 2型糖尿病 胰岛细胞 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于棕榈油软脂的甘油二酯油结晶特性研究 被引量：2

8

作者 宋佳 刘尊 +3 位作者 杨雪 滕英来 李爱军 汪勇 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期31-37,共7页

采用Lipozyme 435脂肪酶催化棕榈油软脂与甘油进行酯交换反应制得两种不同甘油二酯含量(62.7%与82.6%)的甘油二酯油。通过差示扫描量热仪、X射线衍射仪等表征了两种产品的熔化结晶特性和晶型等物理特性,并通过Avrami方程对其等温结晶动... 采用Lipozyme 435脂肪酶催化棕榈油软脂与甘油进行酯交换反应制得两种不同甘油二酯含量(62.7%与82.6%)的甘油二酯油。通过差示扫描量热仪、X射线衍射仪等表征了两种产品的熔化结晶特性和晶型等物理特性,并通过Avrami方程对其等温结晶动力学进行了研究。结果表明:脂肪酸组成相似而纯度不同的甘油二酯油,纯度高的甘油二酯油的熔点、结晶起始点均高于纯度低的甘油二酯油。非等温结晶中,两者表现出相似的热力学性质。等温结晶中,两者成核方式均为异相成核,但存在两种晶体生长机制。此外,高纯度的甘油二酯油较低纯度的甘油二酯油含有更多的β'晶型,形成的结晶网络更加细腻。 展开更多

关键词 甘油二酯油 结晶特性 棕榈油软脂

在线阅读 下载PDF 职称材料

软脂酸在体外激活Caspase9和Caspase3引起L02细胞凋亡 被引量：2

9

作者 屠迪 邬静 +1 位作者 袁莉芸 文利新 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第2期10-13,共4页

以人肝细胞系L02为试验材料,采用Western blot和流式细胞术检测软脂酸对L02细胞凋亡及Caspase3、Caspase9信号的影响,为解决动物摄入高能量日粮时肝损伤状况提供理论依据。试验结果显示,软脂酸可以通过激活Caspase3和Caspase9引起L02细... 以人肝细胞系L02为试验材料,采用Western blot和流式细胞术检测软脂酸对L02细胞凋亡及Caspase3、Caspase9信号的影响,为解决动物摄入高能量日粮时肝损伤状况提供理论依据。试验结果显示,软脂酸可以通过激活Caspase3和Caspase9引起L02细胞凋亡,发生凋亡的L02细胞多处于凋亡早期,L02细胞凋亡率与软脂酸的剂量呈正相关。当软脂酸浓度超过30mg/mL,处理24h后可显著升高L02细胞凋亡率(P<0.05)。上述结果表明,软脂酸在体外激活Caspase9和Caspase3信号从而诱导L02细胞进入早期凋亡阶段。 展开更多

关键词 软脂酸 肝细胞 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

CHI3L1对软脂酸处理后人脐静脉内皮细胞氧化应激的影响 被引量：2

10

作者 王巧 邹舒玥 +1 位作者 常帅 周佳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期967-973,共7页

目的观察壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)对软脂酸处理后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激水平的影响,并初步探讨其分子机制。方法体外培养HUVECs,采用不同浓度CHI3L1处理HUVECs 24 h,MTT法检测细胞增殖情况。按照处理因素分为对照组(未处理)... 目的观察壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)对软脂酸处理后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激水平的影响,并初步探讨其分子机制。方法体外培养HUVECs,采用不同浓度CHI3L1处理HUVECs 24 h,MTT法检测细胞增殖情况。按照处理因素分为对照组(未处理),软脂酸组及CHI3L1+软脂酸组,软脂酸组用100μmol/L软脂酸处理24 h,CHI3L1+软脂酸组先用100 ng/ml CHI3L1预孵育2 h,随后加入100μmol/L软脂酸共同处理24 h。Western blotting检测细胞核及细胞质p65、核纤层蛋白(Lamin)B、肌动蛋白(Actin)、血红素氧合酶(HMOX)、还原型辅酶Ⅰ/Ⅱ依赖醌氧化还原酶(NQO1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、内质网氧化还原1样蛋白(Ero1-Lα)、钙连蛋白(Calnexin)、蛋白二硫键异构酶(PDI)、伴侣蛋白/葡萄糖调节蛋白(BIP1/GRP)78、内质网核信号转导蛋白(IRE)-1α及磷酸化真核细胞翻译启动因子(p-eIF)2α含量。ELISA法测定白细胞介素(IL)-6及肿瘤坏死因子(TNF)-α的分泌水平,DNA结合实验测定核因子(NF)-κB活性的变化。免疫荧光检测Nrf2的核转位。结果MTT结果显示,与对照组相比,100 ng/ml CHI3L1作用24 h并不能降低HUVECs活性(94.17±6.13 vs.100.00±0.00)。Western blotting检测结果显示,CHI3L1+软脂酸组细胞核中p65水平低于软脂酸组(0.77±0.04 vs.0.92±0.09,P<0.05),细胞质中p65含量高于软脂酸组(0.45±0.04 vs.0.27±0.05,P<0.05);CHI3L1+软脂酸组p65 DNA结合活性低于软脂酸组(0.26±0.04 vs.0.43±0.07,P<0.05)。ELISA法检测结果显示,CHI3L1+软脂酸组TNF-α(85.91±21.16)pg/ml及IL-6(71.43±10.56)pg/ml的含量明显低于软脂酸组[分别为(221.12±18.71)pg/ml及(95.03±11.2)pg/ml,P<0.05]。Western blotting检测结果显示,CHI3L1+软脂酸组中的HMOX及NQO1水平(分别为0.58±0.07、1.08±0.04)明显高于软脂酸组(分别为0.32±0.09、0.62±0.09,P<0.05)。免疫荧光结果显示,与软脂酸组比较,CHI3L1+软脂酸组细胞核中的Nrf2含量增加(10.26%±4.53%vs.78.64%±3.16%)。Western blotting结果显示,CHI3L1+软脂酸组PI3K/Akt的磷酸化水平明显高于软脂酸组(0.51±0.04 vs.0.15±0.09,P<0.05),CHI3L1+软脂酸组Ero1-Lα(0.32±0.02 vs.0.39±0.09)、Calnexin(0.42±0.04 vs.0.54±0.07)、PDI(0.19±0.02 vs.0.24±0.05)、BIP1/GRP78(0.11±0.01 vs.0.17±0.03)、IRE-1α(0.19±0.03 vs.0.33±0.04)及p-eIF2α(0.22±0.07 vs.0.67±0.09)等分子的表达量明显低于软脂酸组(P<0.05)。结论CHI3L1能抑制软脂酸处理后HUVECs中的细胞因子分泌,并减轻内质网应激水平。 展开更多

关键词 壳多糖酶3样蛋白1 软脂酸 氧化应激 人脐静脉内皮细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

软脂酸对INS-1胰岛细胞TXNIP表达的影响 被引量：2

11

作者 张倩 梁男男 +3 位作者 吴向征 王瑾 赵嘉惠 焦向英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期908-912,共5页

目的:2型糖尿病患者体内持续高水平的游离脂肪酸会损伤胰岛β细胞。硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)是内源性的硫氧还蛋白(Trx)抑制蛋白。已知高糖刺激可引起TXNIP表达上调,促进胰岛β细胞凋亡,而游离脂肪酸对TXNIP的影响尚不明确。本实... 目的:2型糖尿病患者体内持续高水平的游离脂肪酸会损伤胰岛β细胞。硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)是内源性的硫氧还蛋白(Trx)抑制蛋白。已知高糖刺激可引起TXNIP表达上调,促进胰岛β细胞凋亡,而游离脂肪酸对TXNIP的影响尚不明确。本实验旨在研究软脂酸对TXNIP表达的影响及机制。方法:在使用不同浓度和不同作用时间的软脂酸充分预实验的基础上,确定使用添加0.5 mmol/L软脂酸的RPMI-1640培养基培养INS-1胰岛细胞24 h,测定细胞TXNIP的表达变化、细胞凋亡情况及可能的调控因子变化。结果:与对照组相比,软脂酸组TXNIP的mRNA水平和蛋白表达量均明显增高(P<0.01),软脂酸组凋亡明显高于对照组(P<0.01)。软脂酸组的核因子κB(NF-κB)蛋白磷酸化水平升高(P<0.01),使用不同的NF-κB抑制剂PDTC和SN50均可阻断软脂酸诱导的TXNIP表达上调。结论:饱和脂肪酸软脂酸可通过增加NF-κB磷酸化而上调TXNIP的表达,从而诱导INS-1胰岛细胞凋亡。 展开更多

关键词 软脂酸 INS-1细胞 硫氧还蛋白相互作用蛋白 核因子ΚB

在线阅读 下载PDF 职称材料

高浓度软脂酸体外抑制人外周血内皮祖细胞的增殖 被引量：1

12

作者 江海龙 梁春 +4 位作者 潘晓明 谭鸿兵 吴建祥 孙承波 吴宗贵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1786-1788,1801,共4页

目的观察软脂酸对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖的影响。方法采用密度梯度离心法分离培养人外周血单个核细胞,经FITC标记荆豆凝集素I(FITC-UEA-I)和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-acLDL)双染色鉴定为正在分化的EPCs,并进... 目的观察软脂酸对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖的影响。方法采用密度梯度离心法分离培养人外周血单个核细胞,经FITC标记荆豆凝集素I(FITC-UEA-I)和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-acLDL)双染色鉴定为正在分化的EPCs,并进一步通过流式细胞仪检测其表面标志CD34、CD133和VEGFR2。分别以不同浓度(0、50、100、200、400、800μmol/L)软脂酸溶液作用48h,以及400μmol/L软脂酸溶液作用不同时间(0、12、24、36、48和60h)后,CCK-8法观察EPCs增殖的情况。结果与对照组比较,400μmol/L组及800μmol/L软脂酸组均抑制了EPCs的增殖功能(P<0.05),在400μmol/L时最为显著;且400μmol/L软脂酸对EPCs增殖抑制作用随时间延长逐渐增强,48h达到高峰(增殖抑制率为58.59%(P<0.05)。结论高浓度软脂酸体外能显著抑制外周血内皮祖细胞的增殖。 展开更多

关键词 软脂酸 内皮祖细胞 细胞增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

气相色谱法测定蜂蜡中软脂酸的含量 被引量：3

13

作者 丁晨光 钟红玲 安君 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期348-349,共2页

关键词 蜂蜡 软脂酸 气相色谱法

在线阅读 下载PDF 职称材料

软脂酸对奶牛乳腺上皮细胞甘油三酯合成及脂代谢相关基因表达的影响 被引量：1

14

作者 刘莉莉 林叶 +1 位作者 高学军 李庆章 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2013年第12期8-12,共5页

以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型，研究软脂酸对细胞甘油三酯（Triacylglycerol，TAG）合成能力及脂代谢相关基因表达的影响。采用CASY细胞分析仪检测细胞活力和增殖能力，甘油三酯测试盒检测培养液中甘油三酯浓度；qRT—PCR检测目... 以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型，研究软脂酸对细胞甘油三酯（Triacylglycerol，TAG）合成能力及脂代谢相关基因表达的影响。采用CASY细胞分析仪检测细胞活力和增殖能力，甘油三酯测试盒检测培养液中甘油三酯浓度；qRT—PCR检测目的基因相对表达丰度。结果显示：与对照组相比．200μmol／L和250μmol／L的软脂酸能显著抑制细胞活力和增殖能力：50～150μmol／L的软脂酸以浓度依赖方式显著增加培养液中甘油三酯的浓度；150μmol／L的软脂酸使脂肪酸从头合成相关基因表达有下降趋势，但能不同程度地促进脂代谢其它相关基因的表达。本研究揭示软脂酸能促进乳腺上皮细胞甘油三酯合成．并对部分脂代谢相关基因转录有促进作用，但较高浓度的软脂酸能抑制细胞活力和增殖能力。 展开更多

关键词 奶牛乳腺上皮细胞 软脂酸 细胞活力 甘油三酯合成 基因表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

脂肪分化相关蛋白对软脂酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响 被引量：1

15

作者 鲍苑苑 方舟 +2 位作者 周丽诺 胡仁明 丁薇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期382-385,共4页

目的:构建编码脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因全长序列的真核表达载体,探讨ADRP过表达对软脂酸诱导的H9 c2心肌细胞凋亡有何影响。方法:(1)采用PCR的方法,以成年SD大鼠心肌cDNA为模板扩增编码ADRP全长的DNA序列,重组入pEGFP-C1质粒表达载体... 目的:构建编码脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因全长序列的真核表达载体,探讨ADRP过表达对软脂酸诱导的H9 c2心肌细胞凋亡有何影响。方法:(1)采用PCR的方法,以成年SD大鼠心肌cDNA为模板扩增编码ADRP全长的DNA序列,重组入pEGFP-C1质粒表达载体中,酶切、测序鉴定后转化大肠埃希菌DH5α,挑取阳性克隆,扩增后提取质粒,进行酶切和测序鉴定;(2)采用脂质体转染法将鉴定后的重组质粒转染H9 c2心肌细胞株,经G418筛选获得抗性细胞克隆后扩大培养;荧光显微镜观察细胞内绿色荧光蛋白报告基因表达情况;RT-qPCR和Western blot检测转染细胞与正常细胞ADRP mRNA和蛋白表达水平;(3)采用流式细胞术检测不同浓度软脂酸对上述细胞细胞凋亡率的影响。结果:(1)酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入表达质粒pEGFP-C1;(2)荧光显微镜观察细胞内有绿色荧光蛋白表达且传20代以上无消失;RT-qPCR和Western blot证明重组质粒转染H9 c2细胞ADRP mRNA和蛋白表达水平明显高于空质粒转染组和正常对照组(P<0.01);(3)经不同软脂酸刺激后,重组质粒转染H9 c2细胞凋亡率明显低于空质粒转染组和正常H9 c2细胞组(P<0.05)。结论:(1)成功构建了H9 c2细胞真核质粒表达载体pEGFP-C1-ADRP,获得了稳定表达ADRP基因的H9 c2心肌细胞株;(2)ADRP能够抑制软脂酸诱导的H9 c2心肌细胞凋亡,表明ADRP对高脂环境中心肌细胞可能具有一定的保护作用。 展开更多

关键词 脂肪分化相关蛋白 H9C2心肌细胞 软脂酸 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

胰高血糖素样肽-1抑制软脂酸诱导的MIN6细胞凋亡

16

作者 姜苏原 李小英 +1 位作者 宁光 王卫庆 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1215-1217,共3页

目的探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对软脂酸(PA)诱导的MIN6细胞凋亡及分泌胰岛素功能的影响。方法传代培养处于对数生长期的胰岛β细胞MIN6细胞株分为三组。PA组:加入0.5 mmol/L PA孵育36 h;GLP-1+PA组:加入10 nmol/LGLP-1,12 h后再加入0... 目的探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对软脂酸(PA)诱导的MIN6细胞凋亡及分泌胰岛素功能的影响。方法传代培养处于对数生长期的胰岛β细胞MIN6细胞株分为三组。PA组:加入0.5 mmol/L PA孵育36 h;GLP-1+PA组:加入10 nmol/LGLP-1,12 h后再加入0.5 mmol/L PA继续孵育36 h,期间每12 h加1次相同浓度的GLP-1;对照组:未加GLP-1或PA,其他培养条件相同。MTT比色法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡百分率;放射免疫分析法测定MIN6细胞胰岛素分泌量。结果PA组MIN6细胞凋亡率为(39.41±10.16)%,细胞活力较对照组减少25.8%(P<0.05);GLP-1+PA组MIN6细胞凋亡率为(32.80±8.06)%,细胞活力较PA组增强13.88%(P<0.05),其高糖和低糖状态下胰岛素分泌均明显高于PA组(P<0.05)。结论GLP-1可以抑制PA诱导的MIN6细胞凋亡,同时改善细胞胰岛素分泌功能。 展开更多

关键词 胰高血糖素样肽-1 软脂酸 凋亡 MIN6细胞 胰岛素

在线阅读 下载PDF 职称材料

附植前小鼠胚胎体外培养中外源软脂酸的掺入、分布和氧化(英文)

17

作者 王公金 井弘忠 +1 位作者 范必勤 单祥年 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 1999年第4期216-225,共10页

对体外培养的1细胞期、2细胞期、8细胞期、桑椹期和囊胚期小鼠胚胎从M16培养液中掺入放射性标记软脂酸、合成胚胎脂以及氧化作用分别进行系统试验。结果证明:不同细胞期鼠胚胎在体外培养过程程中均能掺入外源软脂酸;除1细胞期外,其余细... 对体外培养的1细胞期、2细胞期、8细胞期、桑椹期和囊胚期小鼠胚胎从M16培养液中掺入放射性标记软脂酸、合成胚胎脂以及氧化作用分别进行系统试验。结果证明:不同细胞期鼠胚胎在体外培养过程程中均能掺入外源软脂酸;除1细胞期外,其余细胞期胚胎掺入量均较高,2细胞期和桑椹期达到最高水平。软脂酸掺入胚胎脂的组分经薄层层析,分成中性脂和极性脂两大类。不同细胞期掺入胚胎脂的总放射性活度的770%～834%存在于中性脂内,少量(132%～204%)存在于极性脂中,极微量的(29%～42%)发现于非脂类(水溶性)组分中。在标记中性脂类中大约839%～924%放射性分布于甘油酯类中,其中以三酰基甘油酯为主,占中性脂类的644%～783%;在标记极性脂类中,772%～866%放射性存在于各种磷脂中,135%～228%放射性掺入到糖脂类组分中。由外源软脂酸合成的磷脂主要为胆碱磷脂(350%～457%),其次为乙醇胺磷脂(189%～306%)。外源软脂酸掺入胚胎后,除合成的甘油三酯、胆碱磷脂和乙醇胺磷脂数量比较稳定外,其余脂类的合成随不同细胞期呈现不同程度的差异。不同细胞期小鼠胚胎在无糖源和有糖源培养液中均能氧化掺入的外源软脂酸,且从8细胞期至囊胚期显著增加。无糖源培养处理组中软脂酸氧化作用亦为8细胞期至囊胚期显著高于有糖源培养处理组。 展开更多

关键词 小鼠胚胎 软脂酸 掺入 分配 氧化

在线阅读 下载PDF 职称材料

蚓激酶对正常与软脂酸诱导的人肝细胞增殖的影响

18

作者 李姣 石挺 +4 位作者 吕轩 陈志刚 姚立 王佳禹 李文平 《中兽医医药杂志》 2016年第6期21-24,共4页

目的:探讨不同浓度蚓激酶(EFE)在体外对LO2细胞株(人正常肝细胞)及软脂酸(PA)诱导的LO2细胞增殖的影响及EFE的最佳作用浓度。方法:用不同浓度(100 u/m L、200 u/m L、400 u/m L、600 u/m L、800 u/m L、1 000 u/m L)EFE作用于LO2细胞,... 目的:探讨不同浓度蚓激酶(EFE)在体外对LO2细胞株(人正常肝细胞)及软脂酸(PA)诱导的LO2细胞增殖的影响及EFE的最佳作用浓度。方法:用不同浓度(100 u/m L、200 u/m L、400 u/m L、600 u/m L、800 u/m L、1 000 u/m L)EFE作用于LO2细胞,分别在作用6 h、12 h、24 h,通过MTT法检测各组细胞的OD值;用20μg/m L的PA作用LO2细胞24 h,然后用不同浓度(100 u/m L、200 u/m L、400 u/m L、600 u/m L、800 u/m L、1 000 u/m L)的EFE进行干预,并于6 h、12 h、24 h检测细胞增殖情况。结果:200 u/m L、400 u/m L的EFE可促进LO2细胞的增殖,但无统计学意义,高浓度(800 u/m L、1 000 u/m L)的EFE能明显抑制LO2细胞的增殖(P<0.05),且其抑制作用随着时间的延长而增强;低浓度(100 u/m L)的EFE可促进经PA诱导的LO2细胞的增殖,其作用效果显著(P<0.05);200 u/m L、400U/m L的EFE对经PA诱导的LO2细胞的促进作用极显著(P<0.01)。结论:EFE能缓解PA诱导的细胞损伤,对PA诱导的LO2细胞具有保护作用,且其最佳作用浓度为400 u/m L。 展开更多

关键词 蚓激酶 人正常肝细胞 软脂酸 MTT 增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

软脂酸诱导人肝癌HepG2细胞的凋亡 被引量：7

19

作者 张利 纪军 +5 位作者 朱晓钰 吴园园 于环 张槟 李雪岭 孙喜琢 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期671-676,共6页

目的探讨软脂酸(PA)对肝细胞的损害作用及其机制。方法采用人肝癌细胞系HepG2细胞为研究对象,观察PA对细胞生存力的影响。用Trypanblue法检测细胞死亡率;流式细胞记数仪检测细胞周期;AnnexinⅤ和碘化丙啶双重染色定量检测早期凋亡及Bcl-... 目的探讨软脂酸(PA)对肝细胞的损害作用及其机制。方法采用人肝癌细胞系HepG2细胞为研究对象,观察PA对细胞生存力的影响。用Trypanblue法检测细胞死亡率;流式细胞记数仪检测细胞周期;AnnexinⅤ和碘化丙啶双重染色定量检测早期凋亡及Bcl-2/Bax的表达。结果在人HepG2细胞系中PA诱导了时间相关性细胞死亡和剂量依赖性的细胞生存能力下降;PA诱导了HepG2细胞随处理时间而增加的早期凋亡,PA处理后HepG2细胞中Bcl-2/Bax的比值下降。结论PA能诱导肝细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2/Bax比值有关。 展开更多

关键词 软脂酸 肝癌细胞 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

马里苷通过AMPK通路抑制高糖软脂酸诱导大鼠肾小球系膜细胞氧化应激及炎症损伤的作用机制 被引量：5

20

作者 阿米拉·阿不拉提 张楠楠 +3 位作者 古丽拜克热木·热合曼 范雪梅 毛新民 姚蓝 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1133-1137,共5页

目的 研究马里苷介导AMPK信号通路,延缓糖尿病肾病(DN)氧化应激、炎症损伤,抑制纤维蛋白表达的作用。方法高糖软脂酸诱导大鼠肾小球系膜细胞(HBZY^-1)建立体外DN模型,将细胞分为:正常对照组(NG)、模型组(葡萄糖100 mmol·L ^-1 +软... 目的 研究马里苷介导AMPK信号通路,延缓糖尿病肾病(DN)氧化应激、炎症损伤,抑制纤维蛋白表达的作用。方法高糖软脂酸诱导大鼠肾小球系膜细胞(HBZY^-1)建立体外DN模型,将细胞分为:正常对照组(NG)、模型组(葡萄糖100 mmol·L ^-1 +软脂酸250 μmol·L ^-1 ,HG+PA)、马里苷不同剂量组(25、50、100、200 μmol·L ^-1)。采用MTS法检测马里苷对HBZY^-1细胞增殖的影响,从中筛选最适给药浓度;Western blot法检测各组细胞中NOX4、MCP^-1、TGF-β1、FN、α-SMA、Collagen Ⅵ,以及AMPK蛋白家族中AMPKγ1、p-AMPKα的表达水平。结果马里苷抑制高糖软脂酸诱导的HBZY^-1细胞增殖;下调模型细胞中NOX4、TGF-β1、MCP^-1、α-SMA、FN及Collagen Ⅵ的表达;上调p-AMPKα及AMPKγ1的表达。结论马里苷可能通过活化AMPKγ1,激活AMPK信号通路,抑制HBZY^-1细胞氧化应激、炎症反应与纤维化蛋白的表达,延缓DN肾脏损伤。 展开更多

关键词 马里苷 高糖软脂酸 HBZY-1细胞 AMPK 氧化应激 炎症损伤

在线阅读 下载PDF 职称材料