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猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌的制备及其免疫原性分析被引量：4: 1; 作者叶丽萍郝凤奇 +1 位作者杨桂连王春凤《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期790-793,共4页; 为了解猪轮状病毒(RV)Vp4基因工程乳酸菌口服免疫小鼠是否能产生有效的免疫保护作用,本研究应用电转化技术将猪源A组RV重组质粒pW425et-Vp4转化至嗜酸乳杆菌中,重组菌经SDS-PAGE分析可见约87ku的重组蛋白。Western blot分析表明该蛋白... 展开更多; 关键词轮状病毒vp4基因乳酸菌制备免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

轮状病毒VP4蛋白与肠产毒性大肠杆菌热稳定肠毒素蛋白的融合表达被引量：3: 2; 作者王鹏雁陈创夫 +3 位作者余兴龙徐兴然涂长春张高轩《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期76-77,81,共3页; 利用DNA重组技术将轮状病毒 (RotavirusRV)VP4蛋白主要抗原编码区基因与产肠毒素大肠杆菌 (Enteotoxi genicEscherichiacoliETEC)热稳定肠毒素 (Heat -stableenterotoxinEscherichiacoliST)基因融合 ,插入原核表达质粒 pET -2 8a(+)中 ,... 展开更多; 关键词轮状病毒vp4 大肠杆菌肠毒素融合表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

轮状病毒VP4基因的原核表达、蛋白纯化及动物免疫试验被引量：6: 3; 作者刘馨孙茂盛《动物医学进展》 CSCD 2006年第12期88-90,共3页; 在大肠埃希菌中表达并纯化了轮状病毒SA11株的外壳蛋白VP4,并测定了该纯化产物免疫豚鼠后的中和抗体滴度。结果表明,轮状病毒VP4主要以包涵体的形式存在,利用阴离子交换层析纯化后,VP4纯度为80%,与弗氏佐剂混合接种豚鼠后,所产生的中和... 展开更多; 关键词轮状病毒vp4抗原大肠埃希菌中和抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪A组轮状病毒Vp4全基因在MA-104细胞中的表达与DNA疫苗的研究: 4; 作者张二芹王会岩 +1 位作者宫宇宏王春凤《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期306-311,共6页; 本研究采用LipofectamineTM2000将真核重组表达质粒pVAXI-Vp4转染至MA-104细胞中,得到了表达。以荧光抗体检测法和RT-PCR法双重检测了真核重组表达质粒pVAXI-Vp4在MA-104细胞中的表达情况。并将pVAXI-Vp4免疫BALB/c鼠,检测其血清抗体和... 展开更多; 关键词轮状病毒vp4 MA-104细胞表达 pVAXI-vp4 免疫活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌电转化条件的优化: 5; 作者叶丽萍王春凤《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期11-13,共3页; 为了提高pW425et-Vp4基因工程乳酸菌的转化效率,对影响电转化效率的主要因素进行研究,以得到最佳的电转化条件。试验结果表明,猪轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌电转化的最佳条件为:当感受态细胞的D600nm值为0.4时,在MRS培养基中加入1%甘氨酸... 展开更多; 关键词猪源A组轮状病毒vp4基因乳酸菌电转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪A组轮状病毒pW425et-Vp4基因工程乳酸菌的构建及表达被引量：3: 6; 作者叶丽萍王春玲王春凤《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期3-6,共4页; 以嗜酸乳杆菌为受体菌株,将pW425et-Vp4重组质粒电转化入嗜酸乳杆菌,构建猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌,对影响电转化效率的主要因素进行研究,并对构建的乳酸菌进行表达分析。结果表明,在MRS培养基中加入1%甘氨酸+0.3mol/L蔗糖,电... 展开更多; 关键词猪源A组轮状病毒vp4基因乳酸菌电转化表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌的制备及其免疫原性分析被引量：4: 1; 作者叶丽萍郝凤奇杨桂连王春凤; 机构吉林农业大学动物科学技术学院预防兽医学学科; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期790-793,共4页; 基金国家863计划(2003AA24112002 2006AA10A205) +1 种基金国家自然科学基金(0200199 30671573); 文摘为了解猪轮状病毒(RV)Vp4基因工程乳酸菌口服免疫小鼠是否能产生有效的免疫保护作用,本研究应用电转化技术将猪源A组RV重组质粒pW425et-Vp4转化至嗜酸乳杆菌中,重组菌经SDS-PAGE分析可见约87ku的重组蛋白。Western blot分析表明该蛋白能与猪RV多克隆抗体反应。大量培养pW425et-Vp4乳酸菌,经离心加入灭菌脱脂乳液给BALB/c小鼠灌服;应用ELISA方法检测血清抗体水平,试剂盒检测肠黏膜SIgA水平,最后进行小鼠免疫保护性试验。结果表明pW425et-Vp4乳酸菌能增强小鼠的黏膜免疫反应,对猪PV强毒株的攻击具有一定的保护作用,为下一步在猪体内进行试验奠定基础。; 关键词轮状病毒vp4基因乳酸菌制备免疫原性; Keywords Rotavirus group vp4 gene Lactobacillus preparation immunogenicity; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名轮状病毒VP4蛋白与肠产毒性大肠杆菌热稳定肠毒素蛋白的融合表达被引量：3: 2; 作者王鹏雁陈创夫余兴龙徐兴然涂长春张高轩; 机构新疆石河子大学动物科技学院解放军军需大学军事兽医研究所; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期76-77,81,共3页; 文摘利用DNA重组技术将轮状病毒 (RotavirusRV)VP4蛋白主要抗原编码区基因与产肠毒素大肠杆菌 (Enteotoxi genicEscherichiacoliETEC)热稳定肠毒素 (Heat -stableenterotoxinEscherichiacoliST)基因融合 ,插入原核表达质粒 pET -2 8a(+)中 ,经PCR、酶切、测序分析表明已将vp4 -st片段克隆入PET - 2 8a(+) ,而且具有正确的读码框和方向性 ,正确构建了VP4 -ST的融合表达载体 pET2 8a -VP4 -ST。表达质粒转化受体菌BL2 1(DE3 ) plysS ,取经IPTG诱导后表达的目的蛋白进行SDS -PAGE、凝胶薄层扫描分析。结果表明 :表达的目的蛋白以包涵体的形式存在 ,大小约 4 0 2kDa,表达的蛋白量占菌体总蛋白的 13 0 4 8%。; 关键词轮状病毒vp4 大肠杆菌肠毒素融合表达载体; Keywords RV vp4 Enteotoxigenic Escherichia coli ST Fusion expression vector; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名轮状病毒VP4基因的原核表达、蛋白纯化及动物免疫试验被引量：6: 3; 作者刘馨孙茂盛; 机构中国医学科学院医学生物学研究所; 出处《动物医学进展》 CSCD 2006年第12期88-90,共3页; 文摘在大肠埃希菌中表达并纯化了轮状病毒SA11株的外壳蛋白VP4,并测定了该纯化产物免疫豚鼠后的中和抗体滴度。结果表明,轮状病毒VP4主要以包涵体的形式存在,利用阴离子交换层析纯化后,VP4纯度为80%,与弗氏佐剂混合接种豚鼠后,所产生的中和抗体效价为1∶500。; 关键词轮状病毒vp4抗原大肠埃希菌中和抗体; Keywords Rotavirus vp4 antigen E. coli neutralizing antibody; 分类号 S852.659.4 [农业科学—基础兽医学] Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪A组轮状病毒Vp4全基因在MA-104细胞中的表达与DNA疫苗的研究: 4; 作者张二芹王会岩宫宇宏王春凤; 机构吉林农业大学动物科学与技术学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期306-311,共6页; 基金国家863计划(No.2003AA241121002) 国家自然科学基金项目(No.30200199) +3 种基金吉林省科技厅项目(No.20020220) 吉林农业大学青年教师启动基金(No.2002-QQN-002); 文摘本研究采用LipofectamineTM2000将真核重组表达质粒pVAXI-Vp4转染至MA-104细胞中,得到了表达。以荧光抗体检测法和RT-PCR法双重检测了真核重组表达质粒pVAXI-Vp4在MA-104细胞中的表达情况。并将pVAXI-Vp4免疫BALB/c鼠,检测其血清抗体和脾脏中的淋巴细胞增殖情况及CD4+,CD8+T细胞的数量变化情况。结果表明,猪A组轮状病毒Vp4全基因不但在哺乳动物细胞中获得了表达,而且将真核重组表达质粒pVAX-I-Vp4给动物免疫后,获得了免疫效果。这为pVAXI-Vp4DNA核酸疫苗的进一步推广应用提供了科学依据。; 关键词轮状病毒vp4 MA-104细胞表达 pVAXI-vp4 免疫活性; Keywords rotavirus vp4 gene MA-104 cell expression pVAXI-vp4 immunity; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌电转化条件的优化: 5; 作者叶丽萍王春凤; 机构吉林农业大学动物科学技术学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期11-13,共3页; 基金国家863计划(2006AA10A205 2007AA10Z322) +1 种基金国家自然科学基金(30671573 30870116); 文摘为了提高pW425et-Vp4基因工程乳酸菌的转化效率,对影响电转化效率的主要因素进行研究,以得到最佳的电转化条件。试验结果表明,猪轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌电转化的最佳条件为:当感受态细胞的D600nm值为0.4时,在MRS培养基中加入1%甘氨酸+0.3mol/L蔗糖,电场强度为11kV/cm,脉冲时间为3.8ms,电击后细胞复苏3～4h等条件时,得到较高的转化效率,最高可达3.8×104 CFU/μg DNA。; 关键词猪源A组轮状病毒vp4基因乳酸菌电转化; Keywords porcine rotavirus group A vp4 gene Lactobacillus electrotransformation; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪A组轮状病毒pW425et-Vp4基因工程乳酸菌的构建及表达被引量：3: 6; 作者叶丽萍王春玲王春凤; 机构吉林农业大学动物科学技术学院吉林省永吉县畜牧局黄榆乡畜牧站; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期3-6,共4页; 基金国家863计划(2006AA10A205,2007AA10Z322) 国家自然科学基金(30671573,30870116); 文摘以嗜酸乳杆菌为受体菌株,将pW425et-Vp4重组质粒电转化入嗜酸乳杆菌,构建猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌,对影响电转化效率的主要因素进行研究,并对构建的乳酸菌进行表达分析。结果表明,在MRS培养基中加入1%甘氨酸+0.3mol/L蔗糖,电场强度为11kV/cm,脉冲时间为3.8ms,电击后细胞复苏3～4h等条件时,得到较高的转化效率,最高可达3.8×104 CFU/μg DNA。pW425et-Vp4乳酸菌阳性克隆经Western-blot分析表明,其蛋白具有与猪轮状病毒多克隆抗体的反应原性。; 关键词猪源A组轮状病毒vp4基因乳酸菌电转化表达; Keywords vp4 gene of porcine rotavirus Lactobacillus electroporation expression; 分类号 S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌的制备及其免疫原性分析	叶丽萍郝凤奇杨桂连王春凤	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	轮状病毒VP4蛋白与肠产毒性大肠杆菌热稳定肠毒素蛋白的融合表达	王鹏雁陈创夫余兴龙徐兴然涂长春张高轩	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2003	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	轮状病毒VP4基因的原核表达、蛋白纯化及动物免疫试验	刘馨孙茂盛	《动物医学进展》 CSCD	2006	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪A组轮状病毒Vp4全基因在MA-104细胞中的表达与DNA疫苗的研究	张二芹王会岩宫宇宏王春凤	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌电转化条件的优化	叶丽萍王春凤	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	猪A组轮状病毒pW425et-Vp4基因工程乳酸菌的构建及表达	叶丽萍王春玲王春凤	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料