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驼乳中产转糖基活性β-半乳糖苷酶乳酸菌的筛选鉴定及其酶学特性分析
被引量：
4
1
作者
韩明明
褚宇欣
+3 位作者
关波
胡有贞
李谞
倪永清
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第24期74-83,共10页
分离筛选高产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳源微生物,为高效合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)提供新酶源。以添加5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal)的乳糖为碳源的乳酸细菌培养基(MRS)进行初级分离筛选,以产酶菌株粗...
分离筛选高产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳源微生物,为高效合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)提供新酶源。以添加5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal)的乳糖为碳源的乳酸细菌培养基(MRS)进行初级分离筛选,以产酶菌株粗酶液催化乳糖转糖基反应产物的薄层层析进行复筛,单因素优化最佳产酶条件和转糖基反应条件,硫酸铵分级沉淀纯化β-半乳糖苷酶并对其酶学特性进行初步分析。筛选获得产转糖基活性β-半乳糖苷酶乳酸菌20株,选择产酶水平较高、转糖基活性最强的产β-半乳糖苷酶菌株L6进行进一步研究。生理生化和分子生物学鉴定确定L6菌株为Lactobacillus kefiri。该菌株在2 g/100 mL乳糖、1 g/100 mL氮源(蛋白胨、牛肉膏和酵母浸粉)及初始pH 5.5的条件下,37℃培养20 h,产酶水平最高可达(3.81±0.02)U/mL。L6菌株所产β-半乳糖苷酶催化反应的温度范围较宽,45~70℃均能保持50%以上相对酶活力。以45 g/100 mL乳糖为底物,该酶在65℃、pH 7.0条件下,反应4 h生成转移二糖的得率为13.51%(m/m,下同),转移三糖为13.85%,转移三糖以上的GOS为4.15%。
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关键词
Β-半乳
糖
苷酶
低聚半乳
糖
转糖基反应
开菲尔乳杆菌
酶学特性
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职称材料
酶促小分子化合物β-糖基化研究进展
2
作者
周家伟
胡友明
+2 位作者
陆跃乐
朱林江
陈小龙
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第19期280-286,共7页
糖基化是自然界增加小分子化合物功能多样性的有效方法,并能显著改善化合物的水溶性、稳定性等物理化学性质,其中β-糖苷类化合物广泛存在于自然界中,具有重要的生物活性。由于缺乏高效β-糖基化修饰的酶催化剂,许多β-异构体糖苷的生...
糖基化是自然界增加小分子化合物功能多样性的有效方法,并能显著改善化合物的水溶性、稳定性等物理化学性质,其中β-糖苷类化合物广泛存在于自然界中,具有重要的生物活性。由于缺乏高效β-糖基化修饰的酶催化剂,许多β-异构体糖苷的生产主要采用天然产物的分离提取和化学合成等方法。文章主要总结了可实现小分子化合物β-糖基化的酶的特性、催化机制和底物特异性等,并概述了以廉价寡糖为供体的β-糖基化酶的定向进化,为小分子化合物的β-糖基化研究提供参考。
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关键词
β-
糖
基
化
生物催化
底物特异性
转糖基反应
β-
糖
苷酶
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职称材料
题名
驼乳中产转糖基活性β-半乳糖苷酶乳酸菌的筛选鉴定及其酶学特性分析
被引量：
4
1
作者
韩明明
褚宇欣
关波
胡有贞
李谞
倪永清
机构
石河子大学食品学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第24期74-83,共10页
基金
国家自然科学基金地区科学基金项目(32060522)
兵团国际科技合作项目(2017BC012)
石河子大学青年创新人才培育计划项目(CXRC201702)。
文摘
分离筛选高产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳源微生物,为高效合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)提供新酶源。以添加5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-Gal)的乳糖为碳源的乳酸细菌培养基(MRS)进行初级分离筛选,以产酶菌株粗酶液催化乳糖转糖基反应产物的薄层层析进行复筛,单因素优化最佳产酶条件和转糖基反应条件,硫酸铵分级沉淀纯化β-半乳糖苷酶并对其酶学特性进行初步分析。筛选获得产转糖基活性β-半乳糖苷酶乳酸菌20株,选择产酶水平较高、转糖基活性最强的产β-半乳糖苷酶菌株L6进行进一步研究。生理生化和分子生物学鉴定确定L6菌株为Lactobacillus kefiri。该菌株在2 g/100 mL乳糖、1 g/100 mL氮源(蛋白胨、牛肉膏和酵母浸粉)及初始pH 5.5的条件下,37℃培养20 h,产酶水平最高可达(3.81±0.02)U/mL。L6菌株所产β-半乳糖苷酶催化反应的温度范围较宽,45~70℃均能保持50%以上相对酶活力。以45 g/100 mL乳糖为底物,该酶在65℃、pH 7.0条件下,反应4 h生成转移二糖的得率为13.51%(m/m,下同),转移三糖为13.85%,转移三糖以上的GOS为4.15%。
关键词
Β-半乳
糖
苷酶
低聚半乳
糖
转糖基反应
开菲尔乳杆菌
酶学特性
Keywords
β-galactosidase
galacto-oligosaccharides
transglycosylation activity
Lactobacillus kefiri
enzymatic properties
分类号
Q815 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
酶促小分子化合物β-糖基化研究进展
2
作者
周家伟
胡友明
陆跃乐
朱林江
陈小龙
机构
浙江工业大学生物工程学院
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第19期280-286,共7页
基金
浙江省自然科学基金项目(LY19B060008,LQ22H280012)
浙江省重点研发计划项目(2019C02088)
国家自然科学基金项目(82104322)。
文摘
糖基化是自然界增加小分子化合物功能多样性的有效方法,并能显著改善化合物的水溶性、稳定性等物理化学性质,其中β-糖苷类化合物广泛存在于自然界中,具有重要的生物活性。由于缺乏高效β-糖基化修饰的酶催化剂,许多β-异构体糖苷的生产主要采用天然产物的分离提取和化学合成等方法。文章主要总结了可实现小分子化合物β-糖基化的酶的特性、催化机制和底物特异性等,并概述了以廉价寡糖为供体的β-糖基化酶的定向进化,为小分子化合物的β-糖基化研究提供参考。
关键词
β-
糖
基
化
生物催化
底物特异性
转糖基反应
β-
糖
苷酶
Keywords
β-glycosylation
biocatalysis
substrate specificity
transglycosylation reaction
β-glycosidase
分类号
O629.13 [理学—有机化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
驼乳中产转糖基活性β-半乳糖苷酶乳酸菌的筛选鉴定及其酶学特性分析
韩明明
褚宇欣
关波
胡有贞
李谞
倪永清
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
酶促小分子化合物β-糖基化研究进展
周家伟
胡友明
陆跃乐
朱林江
陈小龙
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
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职称材料
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