期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到10篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
基因转染技术及其在肿瘤研究中应用的研究进展 被引量：1
1
作者 张敏 刘微 +4 位作者 李擎 郭春燕 何俊霞 斯日古楞 吉日木图 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期71-74,共4页
基因转染技术应用于肿瘤基因治疗和基因功能的研究已受到广泛的关注。基因转染的方法包括物理法、化学法和生物法,它们各有优缺点。文章主要概述基因转染的基本方法及其在肿瘤基因功能研究及基因治疗中的应用。
关键词 基因转染技术 肿瘤 基因治疗 基因功能
在线阅读 下载PDF
用转染技术建立巨噬细胞传代株
2
作者 丁桂凤 《北京大学学报（医学版）》 CAS 1986年第4期281-284,共4页
本文报告应用转染技术建立巨噬细胞传代株,探讨应用不同来源的DNA获得具有不同功能特性的巨噬细胞株,应用SV40DNA、C-myc基因,U937DNA和胰岛素基因已获得7株细胞,经鉴定它们均有巨噬细胞的特性,即可分泌胶元酶、溶菌酶,其中有30—40％... 本文报告应用转染技术建立巨噬细胞传代株,探讨应用不同来源的DNA获得具有不同功能特性的巨噬细胞株,应用SV40DNA、C-myc基因,U937DNA和胰岛素基因已获得7株细胞,经鉴定它们均有巨噬细胞的特性,即可分泌胶元酶、溶菌酶,其中有30—40％的细胞带有Fc受体,并有经Fc受体介导的吞噬功能。细胞株内细胞功能各异是因为细胞株尚未克隆化。从本试验结果看不仅经转染方法可获得巨噬细胞株,而且有可能经此法获得B或T淋巴细胞传代株。 展开更多
关键词 巨噬细胞 转染方法 红血球 绵羊 DNA 细胞表面 吞噬细胞 红细胞 受体介导 单核细胞因子 转染技术
在线阅读 下载PDF
应用基因转染技术检测白血病患者骨髓细胞中DNA的转化活性
3
作者 王福生 吴祖泽 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1993年第2期187-188,共2页
急性髓系白血病(acute myeloid leuke-mia,AML)是高度恶性的造血系统的肿瘤,已发现ras等癌基因参与各系造血细胞的增殖与分化的调控过程,这些癌基因内部遗传信息的异常(即形成激活的癌基因或转化基因)与白血病的发生有密切的联系。通过D... 急性髓系白血病(acute myeloid leuke-mia,AML)是高度恶性的造血系统的肿瘤,已发现ras等癌基因参与各系造血细胞的增殖与分化的调控过程,这些癌基因内部遗传信息的异常(即形成激活的癌基因或转化基因)与白血病的发生有密切的联系。通过DNA-磷酸钙共沉淀基因转染NIH/3T3受体细胞,诱发转化灶的形成,是检测和鉴定转化基因的重要途径。基于这一原理。 展开更多
关键词 基因转染技术 DNA 细胞生长 转化基因 MYELOID 癌基因 转化灶 造血细胞 受体细胞 幼稚细胞
在线阅读 下载PDF
RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株A549增殖的抑制作用 被引量：1
4
作者 邓征浩 周建华 +2 位作者 曹慧秋 沈明 文继舫 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期193-196,共4页
目的:观察外源性RASSF1A基因对人肺腺癌细胞A549增殖及NF κB亚单位P65表达的影响。方法:利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA3. 0 RASSF1A质粒和空载体pcDNA3. 0质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Westernbl... 目的:观察外源性RASSF1A基因对人肺腺癌细胞A549增殖及NF κB亚单位P65表达的影响。方法:利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA3. 0 RASSF1A质粒和空载体pcDNA3. 0质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Westernblotting检测RASSF1A基因表达。采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法、流式细胞仪分析转染细胞的生物学行为。RT PCR和Westernblotting检测基因转染对P65表达的影响。结果:经脂质体转染和筛选,建立了稳定表达RASSF1A基因的A549细胞系。与未转染组和转染空白载体组比较,转染RASSF1A基因的细胞生长速度明显减慢(P<0. 05),细胞周期中G1 /G0期比例明显增加(P<0. 05),而S期比例减少;转染组细胞核内P65蛋白表达明显降低(P<0. 05),而全细胞P65蛋白及mRNA表达未见明显变化。结论:RASSF1A基因可能通过抑制P65活性而抑制人肺腺癌细胞A549的生长。 展开更多
关键词 基因转染 细胞株A549 RASSF1A基因 抑制作用 人肺腺癌 肺腺癌细胞A549 增殖 blotting Western pcDNA3 真核表达重组体 脂质体转染技术 四甲基偶氮唑盐 流式细胞仪分析 A549细胞系 RT-PCR mRNA表达 P65 生物学行为 B亚单位
在线阅读 下载PDF
nm23-H1基因逆转肺癌细胞转移表型的功能鉴定 被引量：2
5
作者 郑海霞 申东兰 +4 位作者 周清华 何艳玲 彭安 朱文 王艳萍 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期335-336,共2页
关键词 NM23-H1基因 转移表型 肺癌细胞 功能鉴定 metastasis 肿瘤转移抑制基因 侵袭和转移 逆转 基因转染技术 细胞癌变 功能异常 基因结构 细胞水平 转移潜力 研究利用 多基因
在线阅读 下载PDF
pEGFP-N1-亚麻苦甙水解酶重组真核表达载体的构建及亚麻苦甙水解酶在SGC-7901细胞中的表达 被引量：1
6
作者 马俊 陈明浩 +5 位作者 窦科峰 李军 郑伟 霍斌亮 张福琴 李海民 《医学研究生学报》 CAS 2008年第7期678-681,I0004,共5页
目的:构建携带亚麻苦甙水解酶(lis)基因的重组真核表达载体,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,导入SGC-7901细胞中表达。方法:提取木薯总RNA,PCR扩增lis目的基因,将该基因全长定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒载体。用电穿... 目的:构建携带亚麻苦甙水解酶(lis)基因的重组真核表达载体,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,导入SGC-7901细胞中表达。方法:提取木薯总RNA,PCR扩增lis目的基因,将该基因全长定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒载体。用电穿孔法转染体外培养的SGC-7901细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察lis-EGFP融合蛋白在细胞中的表达。用PCR检测lis转录水平的表达,用Western blot法验证lis蛋白水平的表达。结果:酶切和测序证实pEGFP-N1-lis重组质粒构建正确,重组质粒载体在SGC-7901细胞中获得了表达,表达的融合蛋白具有lis和EGFP的双重活性。结论:通过基因克隆方法成功地构建了pEGFP-N1-lis重组质粒载体,并且在SGC-790细胞中稳定表达。 展开更多
关键词 木薯B-葡萄糖苷酸 聚合酶链反应 基因转染技术 自杀基因
在线阅读 下载PDF
SmacsiRNA慢病毒载体的构建及其对Smac基因沉默效果的鉴定 被引量：1
7
作者 李云 郑广瑛 蒋瑜 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期199-204,共6页
背景研究证实半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂（Smac）蛋白是肿瘤细胞的促凋亡蛋白，我们先前的研究表明，Smac蛋白在白内障患者LECs中表达量明显高于正常人，因此推测沉默LECs中Smac的表达可抑制LECs的过度凋亡，但如何成功将Smacsi... 背景研究证实半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂（Smac）蛋白是肿瘤细胞的促凋亡蛋白，我们先前的研究表明，Smac蛋白在白内障患者LECs中表达量明显高于正常人，因此推测沉默LECs中Smac的表达可抑制LECs的过度凋亡，但如何成功将SmacsiRNA转染进入LECs是研究的关键。目的构建人SmacsiRNA慢病毒载体并对人LECs进行感染，研究慢病毒载体构建方法及其在人晶状体上皮细胞HLE—B3中的干扰效率，利用RNA干扰（RNAi）技术建立Smac低表达的HLE—B3株。方法根据我们前期的工作设计并合成针对Smac基因序列的siRNA序列，将合成的双链DNA以T4噬菌体DNA连接酶与GV118慢病毒载体相连接，转化DH5α感受态细胞，采用PCR筛选阳性克隆，经测序鉴定正确后，感染293T细胞，收集上清液并标定病毒滴度。用重组慢病毒感染HLE—B3细胞，荧光显微镜下观察转染后的阳性HLE—B3细胞数并计算病毒感染复数（MOI）。将常规培养的HLE—B3细胞分为阴性对照组、空质粒组和GV118-Smac—siRNA1组，阴性对照组为常规培养的细胞，空质粒组细胞仅转染不含慢病毒载体的siRNA质粒，GV118-Smac·siRNA1组细胞转染GV118-Smac—siRNA1质粒，采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中SmacmRNA的相对表达量。结果构建的重组载体GV118-Smac—siRNAl转化DH5c感受态细胞后阳性克隆产物大小为340bp，空载的克隆产物为299bp，与预期结果相符，测序结果显示合成的Smac—siRNA1与预期目的序列一致。构建的GV118-Smac—siRNA1病毒滴度为3．0x10。TU／m1。感染HLE．B3细胞后荧光显微镜下可见MOI为100时，细胞毒性低且感染效率高，约为82％。阴性对照组、空载质粒组和GV118-Smac—siRNA1质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量分别为（101．290±8．349）％、（92．330±6．320）％和（32．540±4．221）％，3个组间总体比较差异有统计学意义（F=32．871，P〈0．01），其中GV118-Smac—siRNA1质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量较阴性对照组明显下降，差异有统计学意义（P=0．000），而空载质粒组细胞中SmacmRNA相对表达量略低于阴性对照组，但组间差异无统计学意义（P=0．535）。结论本研究中成功构建了siRNA慢病毒载体GV118-Smac—siRNA1，其转染HLE—B3效率高，该siRNA载体能够有效地抑制人LECs中Smac基因的表达。 展开更多
关键词 线粒体蛋白 凋亡 小干扰RNA 基因载体 慢病毒载体/基因 基因转染技术 人 晶状体上皮细胞
在线阅读 下载PDF
肝细胞内相关mRNA抑制HBV复制与表达的功能验证
8
作者 黄鹏 邱华 +4 位作者 范春娇 毛德文 李旺 蒙荫杰 何锦轶 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第5期779-785,共7页
目的验证肝细胞内抑制乙型肝炎病毒(HBV)复制与表达的相关mRNA。方法通过慢病毒介导的方式将过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、核因子I/B(NFIB)及白细胞介素-8(IL-8)基因转入HepG2.2.15及HBV全基因组1.3倍体HepG2(HBV1.3P-HepG2)... 目的验证肝细胞内抑制乙型肝炎病毒(HBV)复制与表达的相关mRNA。方法通过慢病毒介导的方式将过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、核因子I/B(NFIB)及白细胞介素-8(IL-8)基因转入HepG2.2.15及HBV全基因组1.3倍体HepG2(HBV1.3P-HepG2)细胞模型中,以空白对照(NC)组为对照,转染48 h后采用qPCR检测mRNA表达及HBV DNA复制水平,化学发光法检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg的表达,免疫荧光法检测细胞内HBsAg的表达。结果在HepG2.2.15和HBV1.3P-HepG2细胞模型中,PPARα能够促进HBV DNA复制和HBsAg表达,其HBV DNA的表达分别是NC组的1.46倍和1.27倍(P<0.05)。NFIB可以抑制HBV DNA复制和HBsAg表达,其HBV DNA的表达分别是NC组的0.76和0.55倍(P<0.05)。IL-8能够促进HBV DNA复制和HBsAg表达,其HBV DNA的表达分别是NC组的1.54倍和1.62倍(P<0.05)。结论肝细胞内PPARα和IL-8能够促进HBV复制与表达,NFIB可以抑制HBV复制与表达,可为后续研究提供实验室依据。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 信使核糖核酸 肝细胞 慢病毒转染技术
在线阅读 下载PDF
大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体的构建及其对大鼠RPE细胞中Slit2基因的下调作用
9
作者 蒋少秋 周希瑗 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期683-689,共7页
背景年龄相关性黄斑变性（AMD）是老年人致盲的首要原因。目前，AMD的治疗方式在取得显著疗效的同时亦有一定的不足，寻找新的有效治疗靶点是当前的研究热点。目的构建大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体，筛选有效干扰序列以用于大鼠视网膜... 背景年龄相关性黄斑变性（AMD）是老年人致盲的首要原因。目前，AMD的治疗方式在取得显著疗效的同时亦有一定的不足，寻找新的有效治疗靶点是当前的研究热点。目的构建大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体，筛选有效干扰序列以用于大鼠视网膜色素上皮（RPE）细胞中Slit2基因沉默，为大鼠相关体内实验奠定基础。方法设计2条大鼠Slit2基因siRNA序列，退火形成DNA，连接形成慢病毒干扰载体并进行测序鉴定。采用三质粒共转染293T细胞法收获慢病毒（Lv-rSlit2-siRNA），用药物筛选法测定病毒悬液滴度。将大鼠RPE细胞分为空白对照组、空病毒组、Lv—rSlit2-siRNAl组和Lv—rSlit2-siRNA2组，根据分组分别用仅有病毒的载体和不同序列的Lv—rSlit2-siRNA载体转染细胞，分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法测定各组细胞中Slit2mRNA及蛋白的表达以确定Slit2基因的敲减率，筛选有效干扰序列。采用0、100、200和400μmol／LCoCl，孵育大鼠RPE细胞以制备缺氧细胞模型并转染筛选Lv—rSlit2-siRNA2干扰序列，采用实时荧光定量PCR法和ELISA法测定大鼠RPE细胞中血管内皮生长因子A（VEGFA）表达变化及细胞上清液中VEGFA质量浓度。结果成功构建2条大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体，病毒滴度分别为5×10^8TU／ml和3×10^8TU／ml，转染病毒后72h于荧光显微镜下观察RPE细胞慢病毒转染率均在70％以上。Lv—rSlit2-siRNAl组和Lv—rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中Slit2mRNA相对表达量分别为0．67±0．09和0．23±0．11，明显低于空白对照组的1．03±0．31和空病毒组的0．92±0．07；Lv—rSlit2-siRNAl组和Lv—rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中Slit2蛋白相对表达量分别为0．62±0．07和0．49±0．02，明显低于空白对照组的1．00±0．10和空病毒组的0．95±0．11，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。0、100、200和400μmol／LCoCl，作用后，空白对照组和Lv—rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中VEGFAmRNA的相对表达量明显不同，差异均有统计学意义（F浓度=127．998，P〈0．01；Fn自=69．663，P〈0．01），不同浓度CoCl2作用后各组大鼠RPE细胞中VEGFA蛋白相对表达量均明显不同，差异均有统计学意义（F浓度=17．059，P〈0．01；F分组=91．791，P〈0．01）。100、200和400μmol／LCoCl2作用后Lv—rSlit2-siRNA2组大鼠RPE细胞中VEGFAmRNA表达量及蛋白质量浓度均明显低于空白对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论大鼠Slit2基因慢病毒干扰载体构建成功并筛选出有效干扰重组序列，其能有效下调大鼠RPE细胞中Slit2基因的表达，并抑制缺氧环境下VEGFA在大鼠RPE细胞中的表达。 展开更多
关键词 慢病毒 转染技术 RNA干扰 视网膜色素上皮/基因 血管内皮生长因子A/代谢
在线阅读 下载PDF
本期导读
10
《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期I0001-I0001,共1页
本期主要刊出视网膜疾病及诱导多能干细胞的相关研究新进展。视网膜疾病是眼科的一大类疾病，本期对缺氧性视网膜疾病、黄斑病变等眼科研究热点的相关应用基础研究和临床研究进行了报道，还涉及到视网膜疾病相关的新型药物研究、光照节... 本期主要刊出视网膜疾病及诱导多能干细胞的相关研究新进展。视网膜疾病是眼科的一大类疾病，本期对缺氧性视网膜疾病、黄斑病变等眼科研究热点的相关应用基础研究和临床研究进行了报道，还涉及到视网膜疾病相关的新型药物研究、光照节律改变及光损伤等在视网膜疾病中的研究。诱导多能干细胞（iPSCs）是通过基因转染技术将转录因子导入动物或人的体细胞内，使体细胞直接重构成为胚胎干细胞样的多潜能细胞。 展开更多
关键词 视网膜疾病 多能干细胞 导读 基因转染技术 临床研究 黄斑病变 转录因子 缺氧性
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
关于我们 | 版权声明 | 联系我们 | 帮助中心| 意见反馈
主办单位：上海市教育委员会
技术支持：重庆维普资讯有限公司
渝公网安备 50019002500403号
使用帮助 返回顶部