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用重组酶介导等温核酸扩增技术检测烟曲霉
被引量：
5
1
作者
廖新辉
易浔飞
+1 位作者
崔智慧
兰小鹏
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
2015年第3期214-218,共5页
目的建立检测烟曲霉的重组酶介导等温核酸扩增技术（RPA）方法。方法筛选针对烟曲霉ITS1-2靶DNA序列的特异性引物。建立RPA快速检测烟曲霉方法并进行条件优化。分析RPA特异性和敏感性并与Taq PCR结果进行比较。结果RPA检测烟曲霉的优化...
目的建立检测烟曲霉的重组酶介导等温核酸扩增技术（RPA）方法。方法筛选针对烟曲霉ITS1-2靶DNA序列的特异性引物。建立RPA快速检测烟曲霉方法并进行条件优化。分析RPA特异性和敏感性并与Taq PCR结果进行比较。结果RPA检测烟曲霉的优化条件为：引物长度：18-30 bp;产物长度：200-700 bp;扩增温度：37-42℃,最低在27℃也可实现扩增;扩增时间：15-40 min,15 min即可达到凝胶电泳可检测的产物量;只需简单的恒温加热设备。RPA和Taq PCR可检测到的最低DNA浓度均为100 ng/m L。RPA仅对烟曲霉有特异性扩增,对黄曲霉、土曲霉、黑曲霉、构巢曲霉、中国红酵母均无交叉扩增反应。结论建立的针对烟曲霉ITS1-ITS2靶DNA序列的RPA检测方法,可以快速、特异、灵敏地鉴定和检测烟曲霉。
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关键词
重组酶介导等温核酸扩增技术
转录间隔区1-2
烟曲霉
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职称材料
题名
用重组酶介导等温核酸扩增技术检测烟曲霉
被引量：
5
1
作者
廖新辉
易浔飞
崔智慧
兰小鹏
机构
第二军医大学福州总医院临床医学院
南京军区福州总医院检验科
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
2015年第3期214-218,共5页
基金
国家自然科学基金(81271928)
文摘
目的建立检测烟曲霉的重组酶介导等温核酸扩增技术（RPA）方法。方法筛选针对烟曲霉ITS1-2靶DNA序列的特异性引物。建立RPA快速检测烟曲霉方法并进行条件优化。分析RPA特异性和敏感性并与Taq PCR结果进行比较。结果RPA检测烟曲霉的优化条件为：引物长度：18-30 bp;产物长度：200-700 bp;扩增温度：37-42℃,最低在27℃也可实现扩增;扩增时间：15-40 min,15 min即可达到凝胶电泳可检测的产物量;只需简单的恒温加热设备。RPA和Taq PCR可检测到的最低DNA浓度均为100 ng/m L。RPA仅对烟曲霉有特异性扩增,对黄曲霉、土曲霉、黑曲霉、构巢曲霉、中国红酵母均无交叉扩增反应。结论建立的针对烟曲霉ITS1-ITS2靶DNA序列的RPA检测方法,可以快速、特异、灵敏地鉴定和检测烟曲霉。
关键词
重组酶介导等温核酸扩增技术
转录间隔区1-2
烟曲霉
Keywords
recombinase polymerase amplification assay
internal transcribed spacer regions
1
-
2
Aspergillus fumigatus
分类号
R446.5 [医药卫生—诊断学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用重组酶介导等温核酸扩增技术检测烟曲霉
廖新辉
易浔飞
崔智慧
兰小鹏
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
2015
5
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参考文献
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