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番茄SlMYB80转录激活结构域的鉴定及其在拟南芥花粉发育中的功能验证
1
作者
张雨晴
董丽雪
+4 位作者
张宝月
张颖
刘雪敖
熊双喜
张洪霞
《生物技术通报》
北大核心
2025年第10期222-232,共11页
【目的】MYB80是拟南芥和水稻中的一个花粉壁形成关键调节因子,探究番茄中同源基因SlMYB80的功能并鉴定其转录激活结构域,为进一步丰富MYB转录因子对番茄雄性不育系基因资源提供理论依据。【方法】以栽培番茄‘Moneymaker’为野生型材料...
【目的】MYB80是拟南芥和水稻中的一个花粉壁形成关键调节因子,探究番茄中同源基因SlMYB80的功能并鉴定其转录激活结构域,为进一步丰富MYB转录因子对番茄雄性不育系基因资源提供理论依据。【方法】以栽培番茄‘Moneymaker’为野生型材料,以其花苞cDNA为模板克隆SlMYB80基因。利用花椰菜花叶病毒CaMV 35s启动子驱动SlMYB80编码区(CDS)与绿色荧光蛋白eGFP编码序列融合,用于检测SlMYB80蛋白亚细胞定位。同时,将该基因编码区分成4个片段,分别连接酵母表达载体pGTBKT7,与pGTADT7共转酵母进行互作试验以确定其转录激活结构域。此外,构建拟南芥MS188(Male Sterile 188)/AtMYB80启动子驱动SlMYB80 CDS的融合双元载体p AtMYB80:SlMYB80并互补拟南芥ms188突变体,探究SlMYB80的生物学功能。【结果】MYB80氨基酸序列比对和进化树结果表明,MYB80的氨基酸序列在陆生植物中十分保守,特别是R2R3 DNA结合结构域区域;烟草亚细胞定位试验表明,SlMYB80-eGFP定位于细胞核。酵母互作试验表明,SlMYB80转录激活结构域位于肽链C末端17个氨基酸残基;拟南芥ms188突变体互补结果表明,在转基因互补突变体植株的花苞中表达SlMYB80基因,能使部分花粉正常形成,从而恢复部分育性。【结论】SlMYB80作为拟南芥MS188/AtMYB80的直系同源基因编码一个R2R3 MYB转录因子定位于细胞核中,其多肽链C末端17个氨基酸为激活结构域,能部分互补ms188突变体花粉败育的表型,揭示了MYB80转录因子功能的保守性。
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关键词
番茄
SlMYB80
转录
因子
转录激活结构域
雄性不育
同源性分析
酵母杂交
功能互补
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职称材料
Stat3蛋白氨基端转录激活结构域的鉴定
2
作者
张浩
陶无凡
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期845-849,共5页
Stat3是一个在调控胚胎发育、细胞增殖、凋亡、炎症反应和血管生成等多种生理过程发挥关键作用的重要转录因子。Stat3蛋白有Stat3α和缺少羧基端转录激活结构域的Stat3β两个剪接异构体。Stat3基因纯合缺失突变的小鼠在早期胚胎死亡。表...
Stat3是一个在调控胚胎发育、细胞增殖、凋亡、炎症反应和血管生成等多种生理过程发挥关键作用的重要转录因子。Stat3蛋白有Stat3α和缺少羧基端转录激活结构域的Stat3β两个剪接异构体。Stat3基因纯合缺失突变的小鼠在早期胚胎死亡。表达Stat3β可逆转Stat3纯合缺失突变小鼠的胚胎致死表型,并可诱导其下游基因的短期表达,然而其潜在的转录激活结构域一直没有被测定和证实。为进一步解析Stat3蛋白的结构和功能,本研究构建并在酵母中表达了一系列Stat3蛋白的截短体,利用酵母双杂交和双荧光素酶报告基因实验,在酵母和哺乳动物细胞中证实了Stat3蛋白的第2~11位短肽(aa2-11)具有转录激活的作用。这一发现为表达Stat3β逆转Stat3基因缺失引起小鼠胚胎致死表型提供了一种可能的解释,也进一步加深了对Stat3蛋白结构和功能的了解和认识。
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关键词
Stat3α
Stat3β
氨基端
转录激活结构域
胚胎发育
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职称材料
酵母单杂交系统在植物基因工程研究中的应用
被引量:
9
3
作者
王琪
朱延明
王冬冬
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期141-147,共7页
酵母单杂交系统是由酵母双杂交系统衍生来的研究DNA与蛋白质之间相互作用的新型系统。该文系统阐述了单杂交系统的基本原理和技术路线,详细综述了其在植物基因工程各个领域的应用研究进展,即克隆抗渗透胁迫类转录因子基因,确定已知DNA...
酵母单杂交系统是由酵母双杂交系统衍生来的研究DNA与蛋白质之间相互作用的新型系统。该文系统阐述了单杂交系统的基本原理和技术路线,详细综述了其在植物基因工程各个领域的应用研究进展,即克隆抗渗透胁迫类转录因子基因,确定已知DNA与蛋白质之间的相互作用,定位已证实的具有相互作用的DNA结合结构域以及验证转录激活作用;并分析了当前该系统在植物基因工程研究中存在的问题,进而结合自己的研究对解决问题的途径进行了探讨。
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关键词
酵母单杂交
植物基因工程
转录
因子
转录激活结构域
DNA结合
结构域
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职称材料
酵母双杂交体系的原理及研究进展
被引量:
5
4
作者
段强德
陈铁桥
《畜牧兽医杂志》
2009年第1期56-58,共3页
阐述酵母双杂交技术能辨别两未知蛋白的相互作用,描述两己知相互作用蛋白的特征,控制蛋白的相互作用。与传统的生化和遗传学方法比较起来有明显的优势,得到愈来愈广泛的应用,并且在此过程中衍生了基于不同适用范围和不同物种的杂交技术...
阐述酵母双杂交技术能辨别两未知蛋白的相互作用,描述两己知相互作用蛋白的特征,控制蛋白的相互作用。与传统的生化和遗传学方法比较起来有明显的优势,得到愈来愈广泛的应用,并且在此过程中衍生了基于不同适用范围和不同物种的杂交技术。等酵母双杂交的原理及酵母双杂交体系的研究进展。
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关键词
酵母双杂交系统
DNA结合
结构域
转录激活结构域
酵母交配
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职称材料
题名
番茄SlMYB80转录激活结构域的鉴定及其在拟南芥花粉发育中的功能验证
1
作者
张雨晴
董丽雪
张宝月
张颖
刘雪敖
熊双喜
张洪霞
机构
鲁东大学农林工程研究院园艺学院烟台特色植物基因编辑种质创新技术中心
出处
《生物技术通报》
北大核心
2025年第10期222-232,共11页
基金
山东省自然科学基金青年项目(ZR2022QC145)。
文摘
【目的】MYB80是拟南芥和水稻中的一个花粉壁形成关键调节因子,探究番茄中同源基因SlMYB80的功能并鉴定其转录激活结构域,为进一步丰富MYB转录因子对番茄雄性不育系基因资源提供理论依据。【方法】以栽培番茄‘Moneymaker’为野生型材料,以其花苞cDNA为模板克隆SlMYB80基因。利用花椰菜花叶病毒CaMV 35s启动子驱动SlMYB80编码区(CDS)与绿色荧光蛋白eGFP编码序列融合,用于检测SlMYB80蛋白亚细胞定位。同时,将该基因编码区分成4个片段,分别连接酵母表达载体pGTBKT7,与pGTADT7共转酵母进行互作试验以确定其转录激活结构域。此外,构建拟南芥MS188(Male Sterile 188)/AtMYB80启动子驱动SlMYB80 CDS的融合双元载体p AtMYB80:SlMYB80并互补拟南芥ms188突变体,探究SlMYB80的生物学功能。【结果】MYB80氨基酸序列比对和进化树结果表明,MYB80的氨基酸序列在陆生植物中十分保守,特别是R2R3 DNA结合结构域区域;烟草亚细胞定位试验表明,SlMYB80-eGFP定位于细胞核。酵母互作试验表明,SlMYB80转录激活结构域位于肽链C末端17个氨基酸残基;拟南芥ms188突变体互补结果表明,在转基因互补突变体植株的花苞中表达SlMYB80基因,能使部分花粉正常形成,从而恢复部分育性。【结论】SlMYB80作为拟南芥MS188/AtMYB80的直系同源基因编码一个R2R3 MYB转录因子定位于细胞核中,其多肽链C末端17个氨基酸为激活结构域,能部分互补ms188突变体花粉败育的表型,揭示了MYB80转录因子功能的保守性。
关键词
番茄
SlMYB80
转录
因子
转录激活结构域
雄性不育
同源性分析
酵母杂交
功能互补
Keywords
tomato
SlMYB80
transcription factor
transcriptional activation domain
male sterility
homology analysis
yeast hybrid
functional complement
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
Stat3蛋白氨基端转录激活结构域的鉴定
2
作者
张浩
陶无凡
机构
复旦大学附属妇产科医院
复旦大学发育生物学研究所
出处
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期845-849,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(31671330)。
文摘
Stat3是一个在调控胚胎发育、细胞增殖、凋亡、炎症反应和血管生成等多种生理过程发挥关键作用的重要转录因子。Stat3蛋白有Stat3α和缺少羧基端转录激活结构域的Stat3β两个剪接异构体。Stat3基因纯合缺失突变的小鼠在早期胚胎死亡。表达Stat3β可逆转Stat3纯合缺失突变小鼠的胚胎致死表型,并可诱导其下游基因的短期表达,然而其潜在的转录激活结构域一直没有被测定和证实。为进一步解析Stat3蛋白的结构和功能,本研究构建并在酵母中表达了一系列Stat3蛋白的截短体,利用酵母双杂交和双荧光素酶报告基因实验,在酵母和哺乳动物细胞中证实了Stat3蛋白的第2~11位短肽(aa2-11)具有转录激活的作用。这一发现为表达Stat3β逆转Stat3基因缺失引起小鼠胚胎致死表型提供了一种可能的解释,也进一步加深了对Stat3蛋白结构和功能的了解和认识。
关键词
Stat3α
Stat3β
氨基端
转录激活结构域
胚胎发育
Keywords
Stat3α
Stat3β
N-terminal transcriptional activation domain
embryonic development
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
酵母单杂交系统在植物基因工程研究中的应用
被引量:
9
3
作者
王琪
朱延明
王冬冬
机构
东北农业大学生命科学学院
出处
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期141-147,共7页
基金
国家自然科学基金项目(30570990)
黑龙江省科技厅重点攻关项目(GB05B104)。
文摘
酵母单杂交系统是由酵母双杂交系统衍生来的研究DNA与蛋白质之间相互作用的新型系统。该文系统阐述了单杂交系统的基本原理和技术路线,详细综述了其在植物基因工程各个领域的应用研究进展,即克隆抗渗透胁迫类转录因子基因,确定已知DNA与蛋白质之间的相互作用,定位已证实的具有相互作用的DNA结合结构域以及验证转录激活作用;并分析了当前该系统在植物基因工程研究中存在的问题,进而结合自己的研究对解决问题的途径进行了探讨。
关键词
酵母单杂交
植物基因工程
转录
因子
转录激活结构域
DNA结合
结构域
Keywords
yeast one hybrid
plant genetic engineering
transcription factor
transcription activation domain
DNA binding domain
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
酵母双杂交体系的原理及研究进展
被引量:
5
4
作者
段强德
陈铁桥
机构
湖南农业大学动物医学院
出处
《畜牧兽医杂志》
2009年第1期56-58,共3页
文摘
阐述酵母双杂交技术能辨别两未知蛋白的相互作用,描述两己知相互作用蛋白的特征,控制蛋白的相互作用。与传统的生化和遗传学方法比较起来有明显的优势,得到愈来愈广泛的应用,并且在此过程中衍生了基于不同适用范围和不同物种的杂交技术。等酵母双杂交的原理及酵母双杂交体系的研究进展。
关键词
酵母双杂交系统
DNA结合
结构域
转录激活结构域
酵母交配
Keywords
Yeast Two - Hybrid system, DNA - binding domain, DNA - activating domain, yeast mating.
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
番茄SlMYB80转录激活结构域的鉴定及其在拟南芥花粉发育中的功能验证
张雨晴
董丽雪
张宝月
张颖
刘雪敖
熊双喜
张洪霞
《生物技术通报》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Stat3蛋白氨基端转录激活结构域的鉴定
张浩
陶无凡
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
酵母单杂交系统在植物基因工程研究中的应用
王琪
朱延明
王冬冬
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
酵母双杂交体系的原理及研究进展
段强德
陈铁桥
《畜牧兽医杂志》
2009
5
在线阅读
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职称材料
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