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紫杉醇诱导的胰腺癌SW1990细胞凋亡过程中转录激活因子5和Bax表达水平的变化 被引量:3
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作者 胡明 钱冬萌 +5 位作者 侯云 彭凯 李玲 宋旭霞 LIU David X 王斌 《医学研究生学报》 CAS 2010年第11期1127-1131,共5页
目的转录激活因子5(Activating transcription factor 5,ATF5)是一个新的与肿瘤细胞分化、增殖及凋亡密切相关的因子。文中检测胰腺癌SW1990细胞中ATF5的表达,并进一步研究紫杉醇(Paclitaxel,PTX)诱导的人胰腺癌SW1990细胞凋亡的水平,... 目的转录激活因子5(Activating transcription factor 5,ATF5)是一个新的与肿瘤细胞分化、增殖及凋亡密切相关的因子。文中检测胰腺癌SW1990细胞中ATF5的表达,并进一步研究紫杉醇(Paclitaxel,PTX)诱导的人胰腺癌SW1990细胞凋亡的水平,及其与ATF5、Bax表达水平的相关性。方法 RT-PCR检测未经药物处理的SW1990细胞中ATF5 mRNA表达水平;以不同浓度的紫杉醇(0、6.25、12.5、25、50、100、200 nmol/L)作用SW1990细胞不同时间(0、6、12、24、48 h),噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况;用100 nmol/L紫杉醇作用SW1990细胞不同时间(0、12、24、48 h)后,观察形态学变化并用Annexin V/7-AAD双染法,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;采用RT-PCR检测紫杉醇作用不同时间后ATF5、Bax的mRNA表达变化。结果胰腺癌SW1990细胞中表达ATF5。紫杉醇抑制胰腺癌SW1990细胞的增殖,并在一定范围内呈剂量、时间相关性。随着紫杉醇作用时间的增加,流式细胞仪检测凋亡率显著提高。半定量RT-PCR检测结果显示:ATF5、Bax mRNA表达均明显增强,且两者之间存在相关性(r=0.916,P<0.05)。结论 ATF5在胰腺癌SW1990细胞中高表达,并且在紫杉醇诱导的细胞凋亡过程中,表达量进一步上升,其变化趋势与Bax基因相似。提示ATF5参与紫杉醇诱导的细胞凋亡,并可能与Bax的凋亡途径存在相关性。 展开更多
关键词 转录激活因子5 紫杉醇 胰腺癌细胞SW1990 凋亡
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Notch信号通路通过ATF5调控脊髓神经干祖细胞分化 被引量:6
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作者 秦杰 赵立晶 +6 位作者 董晖 王丹 杨一亭 赵波 贺西京 李浩鹏 王栋 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第6期728-733,共6页
目的探讨Notch信号通路在调控成年小鼠脊髓来源神经干祖细胞(spNSPCs)分化中的作用及其机制。方法分离和原代培养成年小鼠spNSPCs,将spNSPCs分为对照组和DAPT组,贴壁培养spNSPCs并采用定向培养基进行分化,用神经元和星形胶质细胞的标志... 目的探讨Notch信号通路在调控成年小鼠脊髓来源神经干祖细胞(spNSPCs)分化中的作用及其机制。方法分离和原代培养成年小鼠spNSPCs,将spNSPCs分为对照组和DAPT组,贴壁培养spNSPCs并采用定向培养基进行分化,用神经元和星形胶质细胞的标志物对两组spNSPCs进行免疫荧光染色,并统计神经元和星形胶质细胞分化比例。用免疫细胞荧光染色观察Notch1和转录激活因子5(ATF5)共表达的情况,免疫印迹和实时定量PCR法分析ATF5蛋白和mRNA表达情况。结果成功分离成年小鼠spNSPCs,其表达神经干细胞标志物Nestin,并且具有向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的潜能。与对照组对比,DAPT组神经元标志物Tuj1的阳性比例从8.6%上升到23.3%(P<0.05),而星形胶质细胞标志物GFAP的阳性比例从65.7%下降到42.1%(P<0.05)。Notch受体与ATF5共表达,DAPT组Notch1胞内段的表达较对照组下降了26%(P<0.05),ATF5蛋白水平上升了60%(P<0.05),mRNA水平上升了108%(P<0.05)。结论Notch信号通路可能通过ATF5调控脊髓神经干祖细胞分化。 展开更多
关键词 NOTCH信号通路 脊髓神经干祖细胞 神经分化 转录激活因子5
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靶向STAT5的RNAi重组质粒的构建与鉴定 被引量:1
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作者 张丽杰 赵振军 +1 位作者 鹿刚 单保恩 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期199-201,共3页
目的构建靶向信号转导及转录激活因子5(STAT5)的RNAi重组质粒并进行鉴定。方法设计针对STAT5编码区的有短发夹结构的3对DNA序列,克隆到质粒载体Pgenesil-1中构建重组质粒,再对其进行酶切鉴定、DNA测序分析。脂质体法转染重组质粒至SMMC7... 目的构建靶向信号转导及转录激活因子5(STAT5)的RNAi重组质粒并进行鉴定。方法设计针对STAT5编码区的有短发夹结构的3对DNA序列,克隆到质粒载体Pgenesil-1中构建重组质粒,再对其进行酶切鉴定、DNA测序分析。脂质体法转染重组质粒至SMMC7721细胞株中,western-blot、RT-PCR检测STAT5基因表达。结果酶切鉴定和测序分析提示,靶向STAT5的RNAi重组质粒构建成功,3条靶向STAT5的序列特异性小发夹状RNA(shRNA)可有效抑制SMMC7721细胞STAT5表达,mRNA表达抑制率分别为70.43%、43.02%、45.07%,蛋白质表达抑制率分别为67.45%、37.36%、41.86%(P<0.05)。其中以Pgenesil-1-STAT5A1抑制效应最强。结论成功构建靶向STAT5的RNAi重组质粒,为进一步用该重组干扰载体进行体内肿瘤基因治疗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 信号转导及转录激活因子5 RNA干扰 SMMC7721细胞株
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STAT3与STAT5在小鼠卵巢组织发育过程中的定位及表达变化 被引量:1
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作者 朱晓静 徐娟 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第21期27-29,共3页
目的探讨STAT3与STAT5在小鼠卵巢组织发育过程中的定位及表达变化。方法收集胚胎13.5 d及出生后1、7、14、21、28、106 d的C57BL/6J小鼠卵巢组织,用免疫荧光染色法检测各级卵泡中STAT3和STAT5蛋白表达,RT-PCR技术检测小鼠卵巢组织发育... 目的探讨STAT3与STAT5在小鼠卵巢组织发育过程中的定位及表达变化。方法收集胚胎13.5 d及出生后1、7、14、21、28、106 d的C57BL/6J小鼠卵巢组织,用免疫荧光染色法检测各级卵泡中STAT3和STAT5蛋白表达,RT-PCR技术检测小鼠卵巢组织发育过程中STAT3、STAT5 mRNA表达。结果 STAT3在原始卵泡、初级卵泡卵母细胞的细胞质和细胞核中高表达,在次级卵泡和窦状卵泡卵母细胞的细胞核中低表达,在其他细胞如颗粒细胞中不表达。出生后1、7 d STAT3 mRNA相对表达量与其他时间点比较,P均<0.05。STAT5在原始卵泡、初级卵泡卵母细胞的细胞核中高表达,在初级卵泡、次级卵泡的颗粒细胞及部分次级卵泡卵母细胞的核仁区低表达。出生后14 d STAT5a mRNA相对表达量与胚胎13.5 d及出后生1、7 d比较,P均<0.05。出生后106 d STAT5b mRNA相对表达量与其他时间点比较,P均<0.05。结论 STAT3与STAT5在小鼠卵巢组织发育过程中均有不同程度的表达,且其定位与表达随着小鼠卵泡的发育而变化。 展开更多
关键词 卵巢 卵泡 卵母细胞 颗粒细胞 信号转换和转录激活因子3基因 信号转换和转录激活因子5基因 小鼠
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慢病毒介导的ATF5基因沉默及其对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤增殖的影响
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作者 盖雪飞 谷雪 +4 位作者 丁朝霞 胡明 王斌 陈爱平 钱冬萌 《山东医药》 CAS 2014年第16期29-31,I0003,共4页
目的观察慢病毒介导的人转录激活因子5(ATF5)基因沉默效果,及其对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤增殖的影响。方法建立荷人卵巢癌裸鼠模型30只,随机分为实验组、阴性对照组、空白对照组各10只,分别瘤内注射ATF5-siRNA慢病毒、空载慢病毒、PBS。... 目的观察慢病毒介导的人转录激活因子5(ATF5)基因沉默效果,及其对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤增殖的影响。方法建立荷人卵巢癌裸鼠模型30只,随机分为实验组、阴性对照组、空白对照组各10只,分别瘤内注射ATF5-siRNA慢病毒、空载慢病毒、PBS。观察移植瘤生长情况,绘制移植瘤生长曲线。4周后处死裸鼠,取出移植瘤组织并称重,计算实验组抑瘤率。采用RT-PCR和Western blot方法检测各组ATF5 mRNA和蛋白相对水平,TUNEL法检测各组移植瘤组织凋亡指数(AI)。结果实验组移植瘤生长速度明显小于阴性对照组和空白对照组,其抑瘤率为49.60%。实验组ATF5 mRNA及蛋白相对表达量、AI分别为0.40±0.09、0.46±0.05、34.63%±1.91%,阴性对照组分别为0.67±0.07、0.72±0.03、6.04%±0.19%,空白对照组分别为0.80±0.07、0.82±0.05、5.07%±0.20%;实验组与阴性对照组、空白对照组比较,P均<0.01;空白对照组与阴性对照组比较,P>0.05。结论慢病毒介导的ATF5-siRNA能抑制荷人卵巢癌裸鼠移植瘤中ATF5基因的表达,并明显抑制移植瘤的生长、促进其凋亡。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 RNA干扰 慢病毒载体 转录激活因子5 裸鼠
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