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RIPK3基因转染的SH-SY5Y细胞中HIF-1α基因及其信号通路相关基因表达变化
被引量：
1
1
作者
张国禄
程世翔
+4 位作者
徐忠伟
衣泰龙
廖吉连
涂悦
张赛
《山东医药》
CAS
北大核心
2016年第7期13-16,共4页
目的观察受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)基因转染的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y中低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA及其信号通路相关基因表达变化。方法构建表达RIPK3基因的p CMV6-AC-GFP质粒(重组质粒),培养SH-SY5Y细胞,分为实验组及对照组...
目的观察受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)基因转染的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y中低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA及其信号通路相关基因表达变化。方法构建表达RIPK3基因的p CMV6-AC-GFP质粒(重组质粒),培养SH-SY5Y细胞,分为实验组及对照组,分别转染重组质粒和空载质粒。采用Western blotting法检测细胞中的RIPK3蛋白,分别于培养8、14、20、26、32、38 h后,通过MTT实验检测细胞增殖情况(OD值)。采用转录组测序技术(RNAseq)及Ingenuity Pathway Analysis(IPA)软件检测并筛选RIPK3-HIF1α下游信号通路中的关键基因。采用微滴式数字PCR(dd PCR)检测两组细胞中的HIF-1αmRNA。结果实验组细胞中RIPK3蛋白相对表达量(0.806±0.097 5)高于对照组(0.455±0.088 6),P<0.05。随培养时间延长,实验组细胞增殖受到抑制。实验组细胞中HIF-1αmRNA相对表达量(0.015 43±0.003 47)低于对照组(0.046 28±0.010 26),P<0.05。在HIF-1α为核心的相互作用关系网络中,筛选出关键分子泛素缀合酶样蛋白(UBC)、希佩尔-林道蛋白(VHL)、转录延伸因子B多肽1(TCEB1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)。结论 RIPK3基因转染SH-SY5Y后,细胞中HIF-1αmRNA表达下调,同时HIF-1α信号通路相关基因(UBC、VHL、TCEB1、VEGFA)的表达水平受到影响。
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关键词
神经母细胞瘤
受体相互作用蛋白激酶3
低氧诱导
因子
1Α
泛素缀合酶样蛋白
希佩尔-林道蛋白
转录延伸因子b多肽
血管内皮生长
因子
A
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题名
RIPK3基因转染的SH-SY5Y细胞中HIF-1α基因及其信号通路相关基因表达变化
被引量：
1
1
作者
张国禄
程世翔
徐忠伟
衣泰龙
廖吉连
涂悦
张赛
机构
武警后勤学院附属医院脑科医院
武警后勤学院中心实验室
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2016年第7期13-16,共4页
基金
国家自然科学基金项目(31200809)
武警部队后勤科研项目(WJHQ2012-20)
文摘
目的观察受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)基因转染的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y中低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA及其信号通路相关基因表达变化。方法构建表达RIPK3基因的p CMV6-AC-GFP质粒(重组质粒),培养SH-SY5Y细胞,分为实验组及对照组,分别转染重组质粒和空载质粒。采用Western blotting法检测细胞中的RIPK3蛋白,分别于培养8、14、20、26、32、38 h后,通过MTT实验检测细胞增殖情况(OD值)。采用转录组测序技术(RNAseq)及Ingenuity Pathway Analysis(IPA)软件检测并筛选RIPK3-HIF1α下游信号通路中的关键基因。采用微滴式数字PCR(dd PCR)检测两组细胞中的HIF-1αmRNA。结果实验组细胞中RIPK3蛋白相对表达量(0.806±0.097 5)高于对照组(0.455±0.088 6),P<0.05。随培养时间延长,实验组细胞增殖受到抑制。实验组细胞中HIF-1αmRNA相对表达量(0.015 43±0.003 47)低于对照组(0.046 28±0.010 26),P<0.05。在HIF-1α为核心的相互作用关系网络中,筛选出关键分子泛素缀合酶样蛋白(UBC)、希佩尔-林道蛋白(VHL)、转录延伸因子B多肽1(TCEB1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)。结论 RIPK3基因转染SH-SY5Y后,细胞中HIF-1αmRNA表达下调,同时HIF-1α信号通路相关基因(UBC、VHL、TCEB1、VEGFA)的表达水平受到影响。
关键词
神经母细胞瘤
受体相互作用蛋白激酶3
低氧诱导
因子
1Α
泛素缀合酶样蛋白
希佩尔-林道蛋白
转录延伸因子b多肽
血管内皮生长
因子
A
Keywords
neuro
b
lastoma
receptor interacting serine / threonine kinase 3
hypoxia-induci
b
le factor 1α
u
b
iquitin-conjugating enzyme-like protein
Von Hippel-Lindau protein
transcription elongation factor
b
polypeptide 1
vascular endothelial growth factor A
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RIPK3基因转染的SH-SY5Y细胞中HIF-1α基因及其信号通路相关基因表达变化
张国禄
程世翔
徐忠伟
衣泰龙
廖吉连
涂悦
张赛
《山东医药》
CAS
北大核心
2016
1
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