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日本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录因子SⅢ-p15亚单位的分离和序列分析
被引量：
5
1
作者
包俊英
余新炳
吴忠道
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2002年第4期14-16,共3页
目的 分离和鉴定日本血吸虫 (Schistosomajaponisum ,Sj)新基因。 方法 应用表达序列标签 (Expressedse quencetags ,ESTs)法随机筛选SjcDNA文库 ,通过PCR直接序列测定技术和同源性比较对阳性插入片段进行鉴定。采用亚克隆技术和生物...
目的 分离和鉴定日本血吸虫 (Schistosomajaponisum ,Sj)新基因。 方法 应用表达序列标签 (Expressedse quencetags ,ESTs)法随机筛选SjcDNA文库 ,通过PCR直接序列测定技术和同源性比较对阳性插入片段进行鉴定。采用亚克隆技术和生物信息学分析对日本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录延长因子SⅢ -p15亚单位进行结构和功能的鉴定。结果 我们从SjcDNA文库中随机筛选到一个cDNA克隆 ,它含有一个 371个碱基组成的阅读框 ,编码 118个氨基酸 ,与哺乳动物等的RNA聚合酶Ⅱ转录因子SⅢ - p15亚单位具有较高的同源性 ,且具有该因子所特有的氨基酸序列 ,表明我们已经获得了日本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录因子SⅢ - p15亚单位。 结论 获得了日本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录因子SⅢ - p15亚单位的全长cDNA序列 。
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关键词
日本血吸虫
RNA聚合酶
ⅱ
转录因子sⅱ-p15
序列分析
CDNA
表达序列档签法
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职称材料
甘蓝型油菜BnWRKY15s基因克隆及锑胁迫下的表达分析
2
作者
刘显军
喻文聪
+4 位作者
王利群
陈文
王艳红
袁玉辉
向国红
《云南农业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第1期12-21,共10页
【目的】克隆甘蓝型油菜BnWRKY15s基因,探讨其在锑(antimony,Sb)胁迫下的功能。【方法】以甘蓝型油菜品种湘杂油512为材料,通过RT-PCR技术克隆BnWRKY15s基因,利用生物信息学工具和qRTPCR分析其蛋白结构、理化性质、表达模式及在Sb胁迫...
【目的】克隆甘蓝型油菜BnWRKY15s基因,探讨其在锑(antimony,Sb)胁迫下的功能。【方法】以甘蓝型油菜品种湘杂油512为材料,通过RT-PCR技术克隆BnWRKY15s基因,利用生物信息学工具和qRTPCR分析其蛋白结构、理化性质、表达模式及在Sb胁迫下的表达。【结果】成功克隆了BnA04.WRKY15和BnC04.WRKY15基因,其cDNA序列分别为960和996 bp,分别编码319和331个氨基酸。BnA04.WRKY15的氨基酸分子质量为34.63 ku,等电点为9.75;BnC04.WRKY15的氨基酸分子质量为35.81 ku,等电点为9.75。两者均为不稳定型亲水蛋白,主要二级结构为无规则卷曲,其次为α-螺旋。序列一致性分析表明:BnA04.WRKY15与白菜蛋白的相似性为99.06%,BnC04.WRKY15与甘蓝蛋白的相似性为99.09%。系统进化树分析显示:BnWRKY15s蛋白与白菜、甘蓝、花椰菜蛋白属于同一进化分支,亲缘关系较近。BnWRKY15s在根部的表达量最高,达到叶组织的99.1倍。经过75 mg/L Sb溶液处理0、1、3、6、12和24 h后,BnA04.WRKY15和BnC04.WRKY15的表达量呈先上升后下降再缓慢上升的变化趋势,且在叶组织中的表达量于处理1 h后达到峰值,而在根组织中的表达量于处理24 h后达到峰值。【结论】在甘蓝型油菜中,BnWRKY15s基因可能作为关键转录因子参与调控Sb胁迫反应。
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关键词
甘蓝型油菜
锑胁迫
BnWRKY
15
s
基因克隆
转录
因子
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职称材料
B8N6S4调控黄曲霉生长及黄曲霉毒素B_(1)合成的功能研究
3
作者
张昕泽
蒲睿思
+4 位作者
牛锦璐
黄文洁
晏石娟
张文洋
吴绍文
《广东农业科学》
2025年第5期54-63,共10页
【目的】明确黄曲霉(Aspergillus flavus)中Zn(Ⅱ)_(2)Cys_(6)锌簇转录因子B8N6S4的功能,解析B8N6S4对黄曲霉生长发育和黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))合成的调控作用。【方法】利用聚乙二醇介导的同源重组构建B8N6S4基因缺...
【目的】明确黄曲霉(Aspergillus flavus)中Zn(Ⅱ)_(2)Cys_(6)锌簇转录因子B8N6S4的功能,解析B8N6S4对黄曲霉生长发育和黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))合成的调控作用。【方法】利用聚乙二醇介导的同源重组构建B8N6S4基因缺失突变体菌株(ΔB8N6S4),比较ΔB8N6S4突变体和野生型(WT)菌株在生长发育、毒素合成及侵染能力方面的差异。【结果】生物信息学分析显示,B8N6S4含有典型的GAL4样Zn(Ⅱ)_(2)Cys_(6)DNA结合域和真菌特异性转录因子结构域。系统发育分析表明,B8N6S4与黄曲霉毒素高产菌株A.minisclerotigenes的同源蛋白KAB8271990.1具有最高序列相似性(97.99%)。利用同源重组方法,成功构建2个黄曲霉B8N6S4基因敲除菌株ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2。与野生型相比,2个ΔB8N6S4突变体在PDA培养基上的菌丝生长速率无显著变化,但分生孢子产量显著降低至7.5×10^(6)、8.0×10^(6)个/mL,较WT菌株的4.4×10^(7)个/mL分别降低83%和82%。且2个ΔB8N6S4突变体的菌核形成能力显著提高,其菌核数量达767、836个,约为WT菌株的2倍。薄层色谱分析结果显示,与WT菌株相比,ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体毒素合成能力增强,分别增加约78%和104%。此外,玉米籽粒侵染试验表明,ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体的侵染能力与WT菌株无显著差异,侵染后的产孢能力与WT菌株相当,但在玉米基质上的AFB_(1)产量显著增加,分别约为WT菌株的5.2倍和3.9倍。【结论】黄曲霉Zn(Ⅱ)_(2)Cys_(6)转录因子B8N6S4正调控黄曲霉的无性产孢、负调控菌核形成,同时抑制AFB_(1)的生物合成。B8N6S4基因缺失不直接影响黄曲霉的致病力,但显著增强其毒素产生能力。本研究首次揭示B8N6S4转录因子在黄曲霉毒素合成网络中的调控作用,可为靶向阻断毒素合成的防控策略提供新靶点。
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关键词
黄曲霉
Zn(
ⅱ
)_(2)Cy
s
_(6)
转录
因子
黄曲霉毒素
B8N6
s
4
致病性
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职称材料
题名
日本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录因子SⅢ-p15亚单位的分离和序列分析
被引量：
5
1
作者
包俊英
余新炳
吴忠道
机构
中山医科大学寄生虫教研室
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2002年第4期14-16,共3页
基金
国家自然科学基金 (3 0 0 70 683 )
国家教育部博士点基金(2 0 0 0 45 )
+1 种基金
广东省自然科学团队研究基金
广东省"2 11工程"重点学科建设课题基金98169)的资助
文摘
目的 分离和鉴定日本血吸虫 (Schistosomajaponisum ,Sj)新基因。 方法 应用表达序列标签 (Expressedse quencetags ,ESTs)法随机筛选SjcDNA文库 ,通过PCR直接序列测定技术和同源性比较对阳性插入片段进行鉴定。采用亚克隆技术和生物信息学分析对日本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录延长因子SⅢ -p15亚单位进行结构和功能的鉴定。结果 我们从SjcDNA文库中随机筛选到一个cDNA克隆 ,它含有一个 371个碱基组成的阅读框 ,编码 118个氨基酸 ,与哺乳动物等的RNA聚合酶Ⅱ转录因子SⅢ - p15亚单位具有较高的同源性 ,且具有该因子所特有的氨基酸序列 ,表明我们已经获得了日本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录因子SⅢ - p15亚单位。 结论 获得了日本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录因子SⅢ - p15亚单位的全长cDNA序列 。
关键词
日本血吸虫
RNA聚合酶
ⅱ
转录因子sⅱ-p15
序列分析
CDNA
表达序列档签法
Keywords
s
chi
s
to
s
ma japonicum
RNA polymera
s
e
ⅱ
Tran
s
cription factor
s
Ⅲ p
15
s
equence analy
s
i
s
cDNA
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
甘蓝型油菜BnWRKY15s基因克隆及锑胁迫下的表达分析
2
作者
刘显军
喻文聪
王利群
陈文
王艳红
袁玉辉
向国红
机构
湖南人文科技学院农业与生物技术学院
娄底市农业技术推广中心
出处
《云南农业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第1期12-21,共10页
基金
湖南省教育厅科学研究项目(21C0785)
湖南省教育厅优秀青年项目(22B0844)
+1 种基金
湖南省联合基金项目(2023JJ50083)
湖南人文科技学院研究生科研创新项目(ZSCX2021Y33)。
文摘
【目的】克隆甘蓝型油菜BnWRKY15s基因,探讨其在锑(antimony,Sb)胁迫下的功能。【方法】以甘蓝型油菜品种湘杂油512为材料,通过RT-PCR技术克隆BnWRKY15s基因,利用生物信息学工具和qRTPCR分析其蛋白结构、理化性质、表达模式及在Sb胁迫下的表达。【结果】成功克隆了BnA04.WRKY15和BnC04.WRKY15基因,其cDNA序列分别为960和996 bp,分别编码319和331个氨基酸。BnA04.WRKY15的氨基酸分子质量为34.63 ku,等电点为9.75;BnC04.WRKY15的氨基酸分子质量为35.81 ku,等电点为9.75。两者均为不稳定型亲水蛋白,主要二级结构为无规则卷曲,其次为α-螺旋。序列一致性分析表明:BnA04.WRKY15与白菜蛋白的相似性为99.06%,BnC04.WRKY15与甘蓝蛋白的相似性为99.09%。系统进化树分析显示:BnWRKY15s蛋白与白菜、甘蓝、花椰菜蛋白属于同一进化分支,亲缘关系较近。BnWRKY15s在根部的表达量最高,达到叶组织的99.1倍。经过75 mg/L Sb溶液处理0、1、3、6、12和24 h后,BnA04.WRKY15和BnC04.WRKY15的表达量呈先上升后下降再缓慢上升的变化趋势,且在叶组织中的表达量于处理1 h后达到峰值,而在根组织中的表达量于处理24 h后达到峰值。【结论】在甘蓝型油菜中,BnWRKY15s基因可能作为关键转录因子参与调控Sb胁迫反应。
关键词
甘蓝型油菜
锑胁迫
BnWRKY
15
s
基因克隆
转录
因子
Keywords
Bra
s
s
ica napu
s
antimony
s
tre
s
s
BnWRKY
15
s
gene cloning
tran
s
cription factor
分类号
S565.01 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
B8N6S4调控黄曲霉生长及黄曲霉毒素B_(1)合成的功能研究
3
作者
张昕泽
蒲睿思
牛锦璐
黄文洁
晏石娟
张文洋
吴绍文
机构
广东省农业科学院农业生物基因研究中心/猪禽种业全国重点实验室
出处
《广东农业科学》
2025年第5期54-63,共10页
基金
国家自然科学基金(22307022)
广东省自然科学基金(2022A1515110962,2024A1515010062)
广东省农业科学院科技创新战略专项(高水平农科院建设)(R2023PY-JX024,R2021YJ-YB1004,R2023PY-JG025,2023QZ-NK04,GDNKY-ZQQZ-K5)。
文摘
【目的】明确黄曲霉(Aspergillus flavus)中Zn(Ⅱ)_(2)Cys_(6)锌簇转录因子B8N6S4的功能,解析B8N6S4对黄曲霉生长发育和黄曲霉毒素B_(1)(Aflatoxin B_(1),AFB_(1))合成的调控作用。【方法】利用聚乙二醇介导的同源重组构建B8N6S4基因缺失突变体菌株(ΔB8N6S4),比较ΔB8N6S4突变体和野生型(WT)菌株在生长发育、毒素合成及侵染能力方面的差异。【结果】生物信息学分析显示,B8N6S4含有典型的GAL4样Zn(Ⅱ)_(2)Cys_(6)DNA结合域和真菌特异性转录因子结构域。系统发育分析表明,B8N6S4与黄曲霉毒素高产菌株A.minisclerotigenes的同源蛋白KAB8271990.1具有最高序列相似性(97.99%)。利用同源重组方法,成功构建2个黄曲霉B8N6S4基因敲除菌株ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2。与野生型相比,2个ΔB8N6S4突变体在PDA培养基上的菌丝生长速率无显著变化,但分生孢子产量显著降低至7.5×10^(6)、8.0×10^(6)个/mL,较WT菌株的4.4×10^(7)个/mL分别降低83%和82%。且2个ΔB8N6S4突变体的菌核形成能力显著提高,其菌核数量达767、836个,约为WT菌株的2倍。薄层色谱分析结果显示,与WT菌株相比,ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体毒素合成能力增强,分别增加约78%和104%。此外,玉米籽粒侵染试验表明,ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体的侵染能力与WT菌株无显著差异,侵染后的产孢能力与WT菌株相当,但在玉米基质上的AFB_(1)产量显著增加,分别约为WT菌株的5.2倍和3.9倍。【结论】黄曲霉Zn(Ⅱ)_(2)Cys_(6)转录因子B8N6S4正调控黄曲霉的无性产孢、负调控菌核形成,同时抑制AFB_(1)的生物合成。B8N6S4基因缺失不直接影响黄曲霉的致病力,但显著增强其毒素产生能力。本研究首次揭示B8N6S4转录因子在黄曲霉毒素合成网络中的调控作用,可为靶向阻断毒素合成的防控策略提供新靶点。
关键词
黄曲霉
Zn(
ⅱ
)_(2)Cy
s
_(6)
转录
因子
黄曲霉毒素
B8N6
s
4
致病性
Keywords
A
s
pergillu
s
flavu
s
Zn(
ⅱ
)_(2)Cy
s
_(6)tran
s
cription factor
aflatoxin
B8N6
s
4
pathogenicity
分类号
S182 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
日本血吸虫RNA聚合酶Ⅱ转录因子SⅢ-p15亚单位的分离和序列分析
包俊英
余新炳
吴忠道
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2002
5
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职称材料
2
甘蓝型油菜BnWRKY15s基因克隆及锑胁迫下的表达分析
刘显军
喻文聪
王利群
陈文
王艳红
袁玉辉
向国红
《云南农业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025
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职称材料
3
B8N6S4调控黄曲霉生长及黄曲霉毒素B_(1)合成的功能研究
张昕泽
蒲睿思
牛锦璐
黄文洁
晏石娟
张文洋
吴绍文
《广东农业科学》
2025
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